一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：HCT-116 人结肠癌细胞（STR 鉴定正确）（与 CW2（低增殖、CEA 阳性）、COLO 320DM（激素分泌、半贴半悬）同属结直肠癌细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、SNU-216（胃癌），核心特色为 “1979 年经典建系 + 成年男性来源 + 短倍增时间 + 瘤球形成能力”，是结直肠癌基础研究、3D 肿瘤模型构建的 “标杆级” 模型；可与 CW2（低增殖、女性）、COLO 320DM（激素分泌、局部转移）、GES-1（正常）组成 “结直肠癌细胞 – 不同增殖速度 / 性别 / 功能表型 + 正常对照” 体系，探索结直肠癌增殖机制、性别差异及 3D 微环境下的生物学特性，同时因经典特性，可作为结直肠癌实验的 “阳性对照细胞” 验证实验体系可靠性）
- 细胞别称：HCT-116; HCT.116; HCT_116; HCT116; CoCL2；人结肠癌细胞（别称以 “HCT” 为核心前缀，与 “CW” 系列（CW2）、“COLO” 系列（COLO 320DM）形成结直肠癌细胞株的清晰区分，数字 “116” 与建系背景关联，“CoCL2” 为历史曾用名，统一标注便于文献检索；“人结肠癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，贴合 “结直肠癌细胞 + 字母 + 编号” 的精准命名体系，避免与其他 “HCT” 前缀细胞（如乳腺癌细胞 HCT-15）混淆）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；成年（明确的成年男性背景，填补结直肠癌细胞模型中成年男性的空白，与 CW2（女性）形成 “男性 – 女性” 性别对照，与 COLO205（70 岁男，老年）形成 “成年 – 老年” 年龄梯度，与 GES-1（9 个月胎儿）形成 “成年 – 胎儿” 极端年龄对照，为结直肠癌男性高发机制、成年与老年患者肿瘤特性差异研究提供精准模型，适合模拟临床成年男性结直肠癌研究场景）
- 组织来源：结直肠癌（未明确具体病理分期，推测为原发结直肠癌组织，保留结直肠癌核心生物学特征，且 1979 年建系历史悠久，特性经全球实验室验证；区别于 CW2 的推测原发灶、COLO 320DM 的 Dukes 氏 C 型（局部转移），可用于结直肠癌基础生物学特性（如细胞周期调控、增殖信号通路）研究，同时为临床结直肠癌通用实验（如药物筛选、基因编辑）提供经典模型）
- 生长特性：贴壁生长（核心特色为纯贴壁生长模式，与 COLO 320DM 的半贴半悬形成差异，与 CW2 的纯贴壁一致但增殖节奏更快；对数生长期细胞增殖迅速（贴合 25-48 小时短倍增时间特性，快于 CW2 的 72-96 小时，与 COLO205 的 25-30 小时相近）；贴壁强度高于 CW2、与 COLO 320DM 相近，细胞间连接紧密，呈单层均匀分布，无悬浮细胞或成簇生长现象；传代操作可参考常规快速增殖贴壁细胞流程，传代间隔短（2-3 天 / 次），适合开展短周期药物处理、基因编辑等实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，核浆比适中，具备结直肠腺癌细胞典型上皮形态特征；与 CW2（上皮样，生长稀疏）相比，排列更密集，与 COLO 320DM（圆形折光、非上皮样）形成鲜明对比；可通过 “规整上皮样 + 快速增殖” 形态及生长特性快速鉴别，避免与同器官其他细胞混淆，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过结直肠特异性标志物（如 CK20）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “短倍增时间、瘤球形成能力、CEA 表达量” 核心特征，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如增殖速度减慢、瘤球形成率下降、CEA 表达异常）
- 背景介绍：HCT116 是 1979 年 M.Brattain 等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一，核心特性及应用如下：①经典与增殖特色：作为结直肠癌研究的 “金标准” 细胞，建系历史超 40 年，在半固体琼脂糖培养基中形成克隆的能力，验证其克隆形成潜能；短倍增时间特性适合开展高 throughput 药物筛选、细胞周期动力学研究；②体内外成瘤能力：无胸腺裸鼠致瘤性强，形成上皮样肿瘤，且具备瘤球形成能力（3D 培养），可同时构建 2D（贴壁）与 3D（瘤球）模型，模拟体内肿瘤微环境差异；③应用场景：广泛用于结直肠癌增殖机制（如 Wnt/β-catenin 信号通路调控）、3D 肿瘤模型构建、药物敏感性实验，同时可与 CW2（低增殖）搭配开展 “快慢增殖” 对比实验，探索增殖速度与药物响应的关联。
- 生物安全等级：1（与 CW2、COLO 320DM、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，便于实验室统一管理不同安全等级的消化道细胞，降低实验操作门槛）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（因短倍增时间，复苏后 24 小时即可快速增殖），且上皮样形态、瘤球形成能力无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%，确保到达后可快速传代或开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞快速增殖及瘤球形成，保障与 CW2、COLO 320DM 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CCL-247，BCRC; 60349，BCRJ; 0288，DSMZ; ACC-581（国际权威机构（ATCC、DSMZ）与地区性机构（BCRC、BCRJ）多重保藏，细胞来源可追溯性极强，生物学特性经全球实验室验证，与 CW2（未明确保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：McCoy’s 5a+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 McCoy’s 5a 培养基，与 CW2 的 RPMI-1640、COLO 320DM 的 RPMI-1640 显著不同；McCoy’s 5a 含独特氨基酸配比及维生素，适配快速增殖结直肠癌细胞的代谢需求，支持其短倍增时间及瘤球形成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中增殖抑制因子影响细胞快速生长；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞瘤球形成及 CEA 表达）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；开展 3D 瘤球培养时，湿度提升至 80%，减少培养基蒸发导致瘤球干裂；与 CW2、COLO 320DM、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需在 3D 培养时调整耗材，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配短倍增与贴壁特性：①选择对数生长期细胞（接种后 24-36 小时，增殖活性最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1.5-2.5 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，补偿快速增殖导致的传代需求）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 McCoy’s 5a 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对细胞增殖及瘤球形成能力的影响）
- 倍增时间：~25-48 hours（增殖速度极快，是已梳理结直肠癌细胞中与 COLO205 并列最快的（快于 CW2 的 72-96 小时，与 COLO205 的 25-30 小时相近），对数生长期为接种后 12-24 小时，需每天镜检 2 次细胞密度，待密度达 80% 时立即传代（避免过度密集导致营养耗尽）；实验设计需适配快节奏，如药物处理时间建议 24-48 小时，基因编辑实验可缩短筛选周期）
- 致瘤性：Yes, in nude mice.（明确的裸鼠高成瘤能力，成瘤周期短（结合 25-48 小时倍增时间，推测皮下成瘤 2-3 周可见明显肿瘤），成瘤率接近 100%；建议接种密度为 1×10⁶cells / 只（低于 COLO205 的 1×10⁷cells / 只），成瘤后通过 HE 染色观察上皮样肿瘤形态，验证体内外特性一致性，适合开展体内药物 efficacy 快速评估）
- 瘤球形成能力：具备瘤球形成能力（需使用专用 3D 肿瘤球培养基，货号 IMC-314）（核心应用特性：①瘤球形成条件：使用超低吸附 6 孔板，接种密度 1×10⁴cells / 孔，加入 IMC-314 培养基，培养 7-10 天可形成直径 100-150μm 的球形结构，瘤球形成率≥80%（高于 CW2 的推测值）；②瘤球特性：瘤球细胞表达肿瘤干细胞标志物（如 CD44、ALDH1），且保留 CEA 表达及快速增殖特性，可用于肿瘤干细胞分选、药物渗透实验及耐药机制研究；③操作注意：3D 培养期间无需换液，避免晃动培养板导致瘤球破碎；收集瘤球时用移液枪轻柔吹打，离心转速降至 800rpm，防止结构破坏）
- 基因表达情况：carcinoembryonic antigen (CEA) 1 ng per 1×10⁶ cells per 10 days（结直肠癌标志物，表达量明确且低于 CW2（未明确具体值，但推测更高），可通过 ELISA 法定量检测，与 CW2 对比验证 “增殖速度与 CEA 表达量” 的关联（通常快速增殖细胞 CEA 表达相对较低）；CEA 表达稳定，可作为细胞表型稳定性的判断指标）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 McCoy’s 5a 培养基适应性培养、增殖速度验证（绘制 24-48 小时生长曲线）及瘤球形成预实验，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 CW2（1 周货期）同步下单，保障 “快慢增殖” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，12 小时后观察细胞状态，因增殖快，24 小时内需判断是否传代）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态；若同步购买 IMC-314 培养基，需单独常温包装，避免与干冰接触） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及增殖特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 CW2、COLO 320DM 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基与增殖维护：严格使用 “McCoy’s 5a+10% FBS+PS” 配方，不可与 CW2 的 RPMI-1640、COLO 320DM 的 RPMI-1640 混用，避免因培养基差异导致细胞增殖速度异常；培养过程中保持培养箱温度、CO₂浓度稳定（CO₂浓度波动需＜±0.5℃），防止环境因素影响快速增殖节奏；②3D 瘤球培养优化：使用 IMC-314 培养基开展瘤球实验时，接种前需确保超低吸附板底无气泡；培养第 5 天可通过倒置显微镜观察瘤球完整性，若出现松散结构，需补充 500μL 新鲜 IMC-314 培养基，维持营养供应；③“快慢增殖” 对比实验：搭配 CW2（低增殖）开展实验时，可：a. 检测细胞周期相关基因（如 Cyclin D1，HCT-116 高表达）、凋亡相关基因（如 Bcl-2，HCT-116 高表达）的表达差异，分析增殖速度与分子机制的关联；b. 对比两株细胞的化疗药（如顺铂）IC50 值（HCT-116 因增殖快可能 IC50 更低，对化疗更敏感），为不同增殖速度肿瘤的化疗方案调整提供依据；c. 检测 CEA 表达量与增殖速度的相关性，验证 “快速增殖可能降低 CEA 合成” 的假设；④长期培养监测：每 5 代检测倍增时间（需在 25-48 小时范围）、CEA 表达量（1ng/(1×10⁶cells・10 天) 左右）及瘤球形成率，若发现增殖速度减慢、CEA 表达异常或瘤球形成率下降，需立即更换低代数种子细胞；⑤基因编辑应用：因快速增殖特性，适合作为基因编辑（如 CRISPR/Cas9）的受体细胞，编辑后可在 1-2 周内完成阳性克隆筛选，缩短实验周期，建议编辑后通过 STR 图谱验证细胞身份，确保无交叉污染。
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