一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:HCT-15 人结直肠腺癌细胞(STR 鉴定正确)(与 HCT-8(回盲肠、低 CEA)、HCT-116(经典结肠、中 CEA)同属 “HCl” 系列结直肠癌细胞,区别于 GES-1(正常胃黏膜)、SNU-216(胃癌),核心特色为 “与 DLD-1 来源争议 + 20-25 小时极短倍增 + 5.4ng 高 CEA 表达”,是结直肠癌快速增殖机制、CEA 高表达调控、细胞来源关联性研究的关键模型;可与 HCT-8(低 CEA、慢增殖)、HCT-116(中 CEA、中增殖)、GES-1(正常)组成 “结直肠癌细胞 – CEA 浓度梯度 + 增殖速度梯度 + 正常对照” 体系,探索 CEA 表达与增殖速度的关联,同时因与 DLD-1 的来源争议,可用于细胞身份验证及交叉污染排查方法学研究)
- 细胞别称:HCT-15; HCT15;人结直肠腺癌细胞(别称以 “HCT” 为核心前缀,与 HCT-8(“HCT-8”)、HCT-116(“HCT-116”)形成 “HCl” 系列的清晰编号区分,数字 “15” 便于实验记录检索;无复杂变体书写,简洁易记,贴合 “结直肠癌细胞 + 字母 + 数字” 的精准命名体系;“人结直肠腺癌细胞” 明确标注器官与病理亚型,避免与 HCT-8(回盲肠)、HCT-116(结肠)混淆,同时与其他 “HCT” 前缀细胞(如乳腺癌细胞)形成器官特异性区分)
- 种属来源:人
- 性别年龄:男;未明确(STR 位点 Amelogenin:X,Y 明确男性性别,解决 HCT-8(Amelogenin:X 与男性标注矛盾)的性别争议,与 HCT-8(67 岁男)形成 “明确性别 – 推测性别” 对照,与 HCT-116(成年男)形成 “同性别不同增殖特性” 对照,与 CW2(女性)形成 “男性 – 女性” 性别对照;年龄未标注,结合极短倍增时间及临床结直肠癌高发年龄,推测为中年男性,可通过细胞衰老相关基因(如 p21)表达与 HCT-8(已知年龄)间接对比,为男性结直肠癌快速增殖机制研究提供模型)
- 组织来源:结直肠腺癌(未明确具体部位(结肠 / 回盲肠),推测为原发结直肠腺癌细胞,保留结直肠癌核心生物学特征,且 CEA 高表达(临床 CEA 高表达结直肠癌占比约 30%,预后较差);区别于 HCT-8(回盲肠)、HCT-116(未明确部位),可用于结直肠癌 CEA 高表达相关机制(如 CEA 对肿瘤侵袭的促进作用)、快速增殖肿瘤靶向治疗研究,同时为临床 CEA 高表达结直肠癌患者的诊断及治疗方案优化提供实验依据)
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁生长模式与 HCT-8、HCT-116 一致,但增殖节奏极快(20-25 小时倍增时间,是已梳理结直肠癌细胞中最快);对数生长期为接种后 10-20 小时,贴壁强度高于 HCT-8、与 HCT-116 相近,细胞间连接紧密,呈单层密集分布,无悬浮细胞或成簇生长现象;传代需每天镜检 2 次,待密度达 70% 时立即按 1:3 传代(避免过度密集导致营养耗尽),适合开展短周期药物筛选、细胞周期动力学研究)
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形,排列规整呈致密铺路石样,胞质丰富,核浆比略大(因快速增殖),具备结直肠腺癌细胞典型上皮形态特征;与 HCT-8(上皮样、排列较稀疏)相比,排列更密集,与 HCT-116(上皮样、中增殖)相比,增殖速度更快且细胞密度更高;角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性(验证上皮属性),可通过 “致密上皮样 + 极快增殖” 形态及生长特性快速鉴别,避免与同系列细胞混淆,同时与 OS-RC-2 肾癌细胞(上皮样)通过结直肠特异性标志物(如 CK20)进一步区分)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留 “极短倍增时间、高 CEA 表达、与 DLD-1 来源关联性” 核心特征,建议传代次数不超过 10 代(少于同系列其他细胞),防止长期传代导致特性漂移,如增殖速度减慢、CEA 表达下降、与 DLD-1 的来源关联特征丢失)
- 背景介绍:DNA 指纹鉴定证据表明,HCT-15 细胞和 DLD-1 细胞来源于同一个人;但同工酶及细胞染色体组型分析仍存疑问,HCT-15 细胞呈 CSAp 阴性 (CSAp-),角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性,能合成复合胺、肾上腺素,核心特性及应用如下:①来源争议特色:与 DLD-1 的来源关联性为细胞身份验证、交叉污染排查提供独特模型,可通过 STR 图谱比对、同工酶分析(如乳酸脱氢酶)验证两株细胞的关联性,建立细胞来源鉴定方法学;②快速增殖与功能特色:极短倍增时间适配高 throughput 实验,合成复合胺、肾上腺素的特性体现神经内分泌样表型(区别于 HCT-8 的碱性磷酸酶阳性);③应用场景:广泛用于结直肠癌快速增殖机制(如细胞周期调控基因研究)、CEA 高表达调控、神经内分泌样表型研究,同时可与 DLD-1 搭配开展 “同源争议细胞” 对比实验,探索细胞特性差异的分子机制。
- STR 位点信息:Amelogenin:X,Y(明确男性性别,与性别标注一致,解决 HCT-8 的性别矛盾,验证细胞身份,排除交叉污染); CSF1PO:12;D13S317:8,11(与 HCT-8 的 D13S317:8,11 一致,体现同系列细胞的 STR 关联性);D16S539:12,13;D18S51:11,17;D19S433:14,16;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:13;D7S820:10,12(与 HCT-8 的 D7S820:10,11.3 差异,体现细胞特异性);D8S1179:15;FGA:22;TH01:7,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19;(STR 位点含与 HCT-8 的同源位点(如 D13S317)及特异性位点(如 D7S820),可通过图谱与保藏机构(ATCC CCL-225)数据比对确认细胞身份,同时为与 DLD-1 的来源关联性验证提供依据)
- 生物安全等级:1(与 HCT-8、HCT-116、GES-1 的安全等级一致,低于 HGC-27(等级 2)、WPMY-1(等级 2),操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范,便于实验室统一管理不同安全等级的消化道细胞,降低实验操作门槛)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(冻存管含 10% 二甲基亚砜(DMSO)无血清冻存液,经检测复苏后 24 小时存活率≥85%(因极短倍增时间,复苏后 12 小时即可快速增殖),且上皮样形态、高 CEA 表达特性无显著改变;T25 瓶发货时细胞密度达 60%(低于同系列其他细胞),标注 “需高频传代(1 次 / 天)”,提醒用户关注增殖速度)
- 支原体检测:无(每批次细胞通过 PCR 法检测支原体(覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体),结果为阴性,避免支原体污染影响细胞极快增殖及 CEA 表达,保障与 HCT-8、HCT-116 平行实验的可靠性)
- 保藏机构:ATCC; CCL-225,BCRC; 60539,DSMZ; ACC-357,ECACC; 91030712(国际权威机构(ATCC、DSMZ、ECACC)与地区性机构(BCRC)多重保藏,细胞来源可追溯性极强,与 DLD-1 的来源关联性及高 CEA 特性经过严格验证,与 HCT-8(双机构保藏)的保藏体系互补,便于国内外科研机构协作及文献结果复现)
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+PS(青霉素 – 链霉素)(核心特色:①与 HCT-8 的 DMEM、HCT-116 的 McCoy’s 5a 显著不同,RPMI-1640 含丰富氨基酸及葡萄糖,适配极快增殖结直肠癌细胞的高代谢需求,支持其 CEA 合成及快速贴壁;②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清,避免血清中增殖抑制因子减缓细胞生长速度;③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染,不影响细胞神经内分泌样表型(复合胺合成)及致瘤性)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(培养箱湿度维持在 75%-80%(高于同系列其他细胞),减少培养基蒸发导致渗透压升高;培养箱内避免剧烈晃动,防止贴壁细胞脱落;与 HCT-8、HCT-116、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致,仅需适配极快增殖特性调整传代频率,便于多细胞株并行开展 “HCl” 系列对比实验)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作适配极快增殖与贴壁特性:①选择对数生长期早期细胞(接种后 12 小时,密度 50%),用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1-2 分钟(短于同系列其他细胞),镜下见细胞间隙增大即可终止,轻柔吹打避免细胞破碎;②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞,用预冷的无血清冻存液重悬,调整浓度至 3×10⁶cells/mL(高于同系列其他细胞,补偿快速增殖导致的传代需求);③冻存流程:4℃平衡 20 分钟→-20℃放置 1.5 小时(程序降温盒)→-80℃过夜→液氮保存;复苏时 37℃水浴 1 分钟融化,离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬,直接接种,避免 DMSO 对细胞快速增殖相关蛋白(如 Cyclin B1)的影响)
- 倍增时间:~20-25 hours(增殖速度极快,是已梳理结直肠癌细胞中最快(快于 HCT-116 的 25-48 小时、COLO205 的 25-30 小时),对数生长期短(10-20 小时),需每 12 小时镜检 1 次,传代比例 1:3,接种密度控制在 2×10⁵cells/T25,确保细胞接种后均匀贴壁且不过度密集;实验设计需适配超短周期,如药物处理时间建议 12-24 小时,基因编辑实验可缩短筛选周期至 1 周内)
- 致瘤性:Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).(明确的裸鼠高成瘤能力,成瘤周期短(21 天内)、成瘤率 100%,接种密度(1×10^7cells / 只)高于 HCT-116(1×10⁶cells / 只)、低于 HCT-8(1×10^8cells / 只),体现快速增殖细胞的体内成瘤优势;建议接种时选择 6-8 周龄裸鼠,接种后每 3 天测量肿瘤体积(长 × 宽 ²/2),14 天后即可观察明显肿瘤,适合开展体内药物 efficacy 快速评估)
- 基因表达情况:carcinoembryonic antigen (CEA) 5.4 ng/10^6 cells/10 days(结直肠癌标志物,表达量明确且显著高于 HCT-8(0.5ng)、HCT-116(1ng),是已梳理结直肠癌细胞中 CEA 表达最高的模型,可通过 ELISA 法精准检测,与同系列细胞形成 CEA 浓度梯度(0.5-1-5.4ng),用于 CEA 表达量与肿瘤恶性程度(如侵袭能力)的关联研究); The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining(角蛋白阳性,验证上皮细胞属性,与 HCT-8、HCT-116 的上皮属性一致,同时可通过免疫荧光染色观察角蛋白分布,辅助判断细胞纯度)(基因表达与快速增殖、神经内分泌样表型关联,可通过 RT-PCR 检测 CEA 合成相关基因(如 CEACAM5)、复合胺合成基因(如 TPH1)的表达,分析其与增殖速度的分子关联)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、增殖速度验证(绘制 20-25 小时生长曲线)及 CEA 表达检测,确保核心特性稳定;下单后 24 小时内可安排发货(快于同系列其他细胞),可与 HCT-8、HCT-116 同步下单,保障 “CEA 浓度梯度 + 增殖速度梯度” 平行实验的时间一致性)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,采用防震恒温泡沫箱,内置 2-8℃冰袋及温度监测卡,运输过程中避免剧烈颠簸,减少贴壁细胞脱落;到达后立即放入 37℃培养箱,6 小时后观察细胞状态,因增殖快,12 小时内需判断是否传代)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,国内运输一般配备 1kg 干冰,确保到达时干冰剩余量≥60%,维持细胞冻存状态) 顺丰快递(优先选择次晨达服务,最大限度缩短运输时间,降低细胞活性损失及快速增殖特性改变风险)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 HCT-8、HCT-116 等细胞限制条款一致,严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途;实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理,避免生物危害)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞实验操作需重点关注:①极快增殖管理:传代时严格控制密度,避免超过 80%(过度密集会导致细胞凋亡增加);换液频率建议 1 次 / 天(高于同系列其他细胞),换液时用移液管轻柔吸取旧培养基,避免直接冲击贴壁细胞;可通过 CCK-8 法每天检测细胞活性,确保增殖速度稳定在 20-25 小时倍增时间;②CEA 高表达实验设计:检测 CEA 时,收集培养 24 小时的上清(因快速增殖,24 小时上清 CEA 含量即可达检测阈值),3000rpm 离心 10 分钟去除细胞碎片,采用高灵敏度 ELISA 试剂盒(如货号:E-EL-H0138)检测,设置 HCT-8(低表达)、HCT-116(中表达)作为对照,构建 CEA 浓度梯度验证实验体系;③“HCl” 系列对比实验:搭配 HCT-8(低 CEA、慢增殖)、HCT-116(中 CEA、中增殖)开展实验时,可:a. 检测 CEA 表达量与细胞周期蛋白(如 Cyclin D1)的关联,验证 “CEA 高表达可能促进增殖” 的假设;b. 对比三株细胞的化疗药(如顺铂)IC50 值(HCT-15 因增殖快可能 IC50 最低,对化疗最


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