一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

核心操作注意事项

1. 运输后若发现细胞脱落，需立即离心收集悬浮细胞（建议低速离心，避免损伤细胞）；
2. 收集后的细胞经常规消化处理后，重新铺入 T25 培养瓶，可适当提高接种密度以促进贴壁。

背景与筛选验证

• 背景介绍：
  1. 细胞稳定表达增强型绿色荧光蛋白（eGFP，原文 “萤光蛋白”），性状稳定，无需抗生素常规维持，可作为荧光蛋白活性检测的阳性对照，也适用于活体动物成像实验（注：原文提及 “Luciferase” 应为表述偏差，核心标记为 eGFP）。
  2. 通过慢病毒转染携带 GFP 基因，亲本 HEK-293 细胞是经剪切的人腺病毒 5（Ad5）转染形成的永生化细胞，基因组含 Ad5 左侧端 DNA（整合于 19 号染色体 19q13.2），可作为人类腺病毒载体扩增的宿主。
  3. 该细胞可表达异常玻连蛋白细胞表面受体（由整合素 β1 亚单位和 α-v 亚单位组成），适用于病毒包装、蛋白表达及受体功能相关研究。
• puro 药筛浓度：HEK293-eGFP 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。通过嘌呤霉素筛选可去除未转染细胞，低浓度维持能保障 GFP 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁能力及腺病毒相关功能。

细胞培养核心信息

• 生物安全等级：2 级，需在符合二级生物安全标准的实验室操作，防范病毒相关潜在风险（如腺病毒载体操作规范）。
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。
• 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、eGFP 荧光信号及病毒包装效率，保障实验数据准确性）。
• 保藏机构：ATCC; CRL-1573、ATCC：PTA-4488、DSMZ：ACC-305、ECACC：85120602（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性与病毒宿主功能可靠性）。
• 培养基：90% DMEM（达尔伯克改良伊格尔培养基）+ 10% FBS（胎牛血清）+ PS（青霉素 – 链霉素双抗）+ 1.0μg/ml puro（专用配方适配细胞生长需求，维持 GFP 基因稳定，若无需筛选可调整 puro 浓度至 0.5μg/ml）。
• 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）。
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞贴壁状态良好，可适当添加促贴壁试剂，保障复苏后细胞活性与荧光表达稳定）。
• 细胞货期：现货，1 周左右。
• 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递。
• 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。