细胞名称：HEK293T-eGFP-puro 人胚肾细胞 (eGFP 标记)（STR 鉴定正确）

细胞别称：HEK293T-EGFP；人胚肾细胞 – 绿色荧光蛋白标记

种属来源：人

组织来源：肾

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持增强型绿色荧光蛋白（eGFP）表达稳定性及细胞高转染特性）

特别注意：293T 细胞贴壁不牢，运输过程中细胞会有脱落；如出现脱落，需离心收集细胞，消化后重新铺瓶培养。

背景介绍：

HEK293T-eGFP-puro 细胞稳定表达增强型绿色荧光蛋白（eGFP），荧光信号更强、更稳定，可作为绿色荧光蛋白活性检测的阳性对照，也适用于活体动物成像实验。

该细胞为 HEK293 细胞的衍生株，通过插入 SV40 T – 抗原的温度敏感基因获得，具备高转染效率，是基因功能研究、重组蛋白表达及荧光追踪实验的常用细胞株。

puro 药筛浓度：

HEK293T-eGFP 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障 eGFP 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长及高转染特性。

生物安全等级：1 级，操作风险低，符合常规实验室生物安全管理要求，无需特殊防护。

细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。

支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、eGFP 表达及转染相关实验结果，保障数据准确性）。

保藏机构：ATCC; CRL-3216、DSMZ; ACC-635；中国典型培养物保藏中心细胞库（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性与高转染特性可靠）。

培养基：90% DMEM（达尔伯克改良伊格尔培养基）+10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+1.0μg/ml puro（按标注浓度添加 puro，适配贴壁生长的人胚肾细胞营养需求，维持 eGFP 基因稳定）。

培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整；操作时动作轻柔，避免剧烈晃动或频繁移动导致细胞脱落）。

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞消化充分且处于对数生长期，保留 eGFP 表达及高转染特性；可适当提高冻存密度，降低复苏后细胞贴壁难度）。

细胞货期：现货，1 周左右。

运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率。

供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主，且需严格遵循细胞贴壁特性的操作要求。