一、细胞基本属性
- 细胞名称：Hep G2 人肝癌细胞（本质为肝母细胞瘤细胞株，建系初存在细胞类型误判，需注意实验设计中的细胞模型定位）
- 细胞别称：HEP-G2; Hep G2; HEP G2; HepG2; HEPG2
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；15 岁（白人少年，明确的年龄、性别及种族背景，为实验分组及结果解读提供参考）
- 组织来源：肝脏（源自肝癌组织，后续研究证实本质为肝母细胞瘤组织，具备肝母细胞瘤细胞典型的胚胎性分化特征）
- 生长特性：贴壁生长
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞排列紧密，呈多边形，具备上皮细胞典型的铺路石样生长特征）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞可更好保留肝母细胞瘤相关生物学特性，建议传代次数控制在 15 代内，避免长期传代导致分化表型丢失）
- 背景简介：Hep G2 细胞来源于一名 15 岁的白人少年的肝脏肿瘤组织，核心特性如下：①蛋白表达丰富：可表达甲胎蛋白（肝母细胞瘤标志物）、白蛋白、α-2 – 巨球蛋白、α-1 – 抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1 – 抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体 C4、C3 激活物、纤维蛋白原、α-1 酸性糖蛋白、α-2-HS – 糖蛋白、β- 脂蛋白、视黄醇结合蛋白，适用于肝脏合成功能相关研究；②受体表达：表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子 IGFⅡ 的受体，可用于代谢调控、信号通路激活等实验；③酶活性：具有 3 – 羟基 – 3 – 甲酰辅酶 A 还原酶（参与脂质代谢）和肝甘油三酯脂肪酶（参与甘油三酯分解）的活性，是脂质代谢研究的常用模型；④病毒基因组：目前尚未证明该细胞中有 HBV（乙型肝炎病毒）基因组，可排除 HBV 干扰相关实验。需特别注意：该细胞在建系之初被错误认定为肝细胞肝癌细胞株，后续研究证实其本质是肝母细胞瘤细胞株，实验设计中需根据研究目标选择合适的细胞模型。
- 生物安全等级：1（参考人源肝母细胞瘤细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，避免细胞污染及废弃物不当处理）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，确保实验起始细胞活性一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，检测引物覆盖常见支原体类型，结果为阴性，可直接用于实验，无需额外进行除支原体处理）
- 染色体：44~52，XY（男性核型，染色体数目存在一定异质性，符合肿瘤细胞染色体不稳定特征，实验中需注意染色体数目对结果的潜在影响）
- 倍增时间：~50-60 hours（增殖速度相对缓慢，对数生长期为接种后 2-4 天，建议在细胞密度达 60%-70% 时进行传代，避免细胞过度密集导致生长停滞）
- 保藏机构：ATCC; HB-8065，BCRC; 60025，BCRJ; 0103，DSMZ; ACC-180，ECACC; 85011430；中国典型培养物保藏中心细胞库（多机构保藏，细胞身份可追溯，确保来源正规、基因型稳定）
- STR 位点：Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，11；D13S317：9，13；D16S539：12，13；D18S51：13，14；D19S433：15.2；D21S11：29，31；D2S1338：19，20；D3S1358：15，16；D5S818：11，12；D7S820：10；D8S1179：15，16；FGA：22，25；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：17；（Amelogenin 位点含 X、Y，与男性性别一致，STR 图谱可用于细胞身份验证，避免交叉污染）
- 瘤球形成能力：(3D 肿瘤球培养基（通过专用 3D 培养基可诱导形成稳定瘤球，瘤球形态及大小可通过图片直观观察，适用于肿瘤干细胞特性、三维培养药物敏感性及侵袭转移潜能评估等研究）
- 培养基：90% DMEM（高糖型，含 4.5g/L 葡萄糖，满足肝母细胞瘤细胞高能量代谢需求）+10% FBS（胎牛血清，建议选择批次间差异小的优质血清，避免血清质量影响细胞生长及蛋白表达）+PS（青霉素 – 链霉素，终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，预防细菌污染），培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用，避免低温刺激细胞导致应激反应
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换培养箱内水盘，防止培养基蒸发过快导致渗透压升高，影响细胞生长状态）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①细胞消化后离心收集，用预冷冻存液重悬，调整细胞浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；②分装至冻存管，4℃平衡 30 分钟；③-20℃放置 2 小时（可使用程序降温盒，减少低温损伤）；④-80℃过夜；⑤次日转入液氮长期保存。复苏时需 37℃水浴快速融化，1 分钟内完全溶解，避免 DMSO 对细胞产生毒性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存稳定，下单后 48 小时内可安排发货，特殊需求如加急复苏、额外检测等，可提前与供应方沟通协调）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，运输时采用恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保细胞运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入培养箱）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞为肝母细胞瘤细胞株（非肝细胞肝癌细胞），实验操作及结果解读需注意：①传代操作：采用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液，37℃孵育 2-3 分钟，镜下观察细胞间隙增大、形态变圆即可终止消化，用含血清培养基中和胰酶，轻柔吹打瓶壁，避免用力过猛导致细胞破碎；②蛋白表达检测：因细胞表达甲胎蛋白等肝母细胞瘤标志物，可通过 ELISA、Western Blot 等方法检测相关蛋白，验证细胞表型稳定性；③代谢实验：利用其脂质代谢相关酶活性，可开展降脂药物筛选、胆固醇合成调控等研究，但需注意细胞代数对酶活性的影响，建议使用 10 代以内细胞；④污染防控：实验操作需在超净工作台内进行，定期对培养箱、培养基进行无菌检测，避免细胞交叉污染或微生物污染；⑤废弃物处理：使用后的细胞培养废液、冻存管等需经高压蒸汽灭菌（121℃，30 分钟）后再丢弃，符合生物安全废弃物处理要求。
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