一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：HOS 人骨肉瘤细胞（STR 鉴定正确）（与 BxPC-3（胰腺原位腺癌、61 岁女）、PL45（胰腺导管腺癌、推测中年）同属贴壁生长肿瘤细胞，区别于 MET-5A（皮肤间皮）、TPC-1（甲状腺乳头状癌），核心特色为 “13 岁女性白人骨肉瘤 + 上皮样 + 成纤维样混合形态 + 46~50 染色体 + 低软琼脂克隆形成率 + DMEM 常规培养基”，是青少年骨肉瘤机制研究、肿瘤细胞形态异质性、骨肿瘤与其他器官肿瘤差异对比的关键模型；可与 BxPC-3（胰腺癌 / 单一上皮样）、HFL-1（正常肺成纤维）、MG-63（另一种骨肉瘤）组成 “肿瘤细胞 – 骨肉瘤 / 胰腺癌 + 青少年 / 老年 + 混合形态 / 单一形态 + 正常对照” 体系，探索青少年骨肉瘤的独特生物学特性及混合形态对实验结果的影响，同时因低克隆形成率，适合开展肿瘤细胞分化、药物敏感性相关研究）
- 细胞别称：HOS；人骨肉瘤细胞（别称以 “HOS” 为核心，无复杂变体，“人骨肉瘤细胞” 明确标注 “骨器官 + 骨肉瘤亚型”，与 BxPC-3 的 “胰腺原位腺癌”、PL45 的 “胰腺导管腺癌” 形成器官 – 病理类型双重区分；贴合 “骨肉瘤细胞 + 字母缩写 + 病理属性” 的命名体系，通过 “混合细胞形态”“青少年来源” 标签强化与其他肿瘤细胞的差异，避免与胰腺癌细胞混淆，精准定位青少年骨肉瘤研究场景）
- 种属来源：人；种族背景：白人（明确白人种族背景，与 BxPC-3（未明确种族）、PL45（未明确种族）形成 “白人 – 未明确” 种族对照，适合开展骨肉瘤种族差异相关研究（如基因突变频率、药物敏感性的种族关联）；STR 鉴定确认无交叉污染，细胞群体为单一骨肉瘤细胞系，种属纯净，可稳定表现白人青少年骨肉瘤特有的生物学特性（如低分化特征、对药物敏感），无外源细胞干扰）
- 性别年龄：女；13 岁（明确的青少年女性背景，填补肿瘤细胞模型中 “10-15 岁青少年女性骨肉瘤” 空白，与 BxPC-3（61 岁女）形成 “青少年 – 老年” 年龄梯度，与 PL45（推测中年）形成 “青少年 – 中年” 年龄对比，与 CFPAC-1（26 岁男胰腺癌）形成 “青少年女 – 年轻男” 性别年龄双重差异；13 岁为骨肉瘤青少年高发年龄，适合模拟临床青少年骨肉瘤患者的肿瘤特性，开展年龄相关的肿瘤分化、治疗耐药机制研究）
- 组织来源：骨；病理亚型：骨肉瘤（明确为骨来源骨肉瘤组织，保留骨肉瘤特有的 “骨基质合成潜能、间充质分化倾向”，区别于 BxPC-3 的胰腺上皮起源、PL45 的胰腺导管起源；骨肉瘤是青少年最常见的原发性骨恶性肿瘤，该细胞系可用于骨肉瘤癌变机制研究（如骨母细胞恶性转化）、骨肿瘤与内脏肿瘤（胰腺癌）的分子差异对比，为临床青少年骨肉瘤诊疗方案（如化疗方案优化）提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 BxPC-3、PL45 一致，但核心特色为 “混合形态贴壁 + 低克隆形成率”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖节奏未明确标注，结合青少年肿瘤细胞特性及 DMEM 培养基营养，推测倍增时间 30-40 小时（快于 BxPC-3 的 48-60 小时，与 PL45 的 35-45 小时部分重叠），无有限传代限制（永生化肿瘤细胞），软琼脂克隆形成率低（区别于 BxPC-3 的高致瘤性）；②贴壁特性：贴壁强度介于 BxPC-3（紧密贴壁）与 PL45（中等贴壁）之间，上皮样细胞呈多边形紧密排列，成纤维样细胞呈梭形松散分布，两种形态细胞比例约 1:1（传代后比例稳定）；对数生长期为接种后 24-72 小时，传代需每 24 小时镜检，密度达 80% 时按 1:3 传代（与 PL45 一致），传代时需确保两种形态细胞均被消化（成纤维样细胞消化时间略长，约 3-4 分钟，上皮样细胞 2-3 分钟），适合开展肿瘤细胞形态异质性相关实验）
- 细胞形态：上皮样细胞和成纤维样细胞均有（混合形态核心特征）：①上皮样细胞：呈多边形，胞质丰富，核浆比中等，排列紧密，类似 BxPC-3 的上皮形态但无紧密聚团；②成纤维样细胞：呈梭形，胞质细长，核浆比略高，排列松散，类似 HFL-1 的成纤维形态但增殖更快；两种形态细胞无明显界限，随机分布，与 BxPC-3 的单一上皮样、PL45 的单一上皮样形成显著差异；可通过 “混合形态 + 骨肉瘤标志物（如碱性磷酸酶、骨桥蛋白）阳性” 快速鉴别，同时与 BxPC-3 通过器官标志物（骨桥蛋白 vs CEA）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “混合形态比例、低克隆形成率、青少年骨肉瘤特性” 核心属性，建议传代次数严格控制在 10 代以内，防止长期传代导致特性漂移，如成纤维样细胞比例下降（＜30%）、克隆形成率升高（＞20%）、骨肉瘤标志物（如骨桥蛋白）表达减少，确保细胞始终贴合青少年骨肉瘤的实验需求）
- 背景介绍：HOS 细胞源自 13 岁白人女性骨肉瘤组织，核心特性及应用如下：①青少年特色：作为青少年骨肉瘤经典模型，低饱和密度、低克隆形成率体现其低恶性程度特征，适合开展青少年骨肉瘤与老年肿瘤（BxPC-3）的恶性程度差异研究；②形态价值：混合细胞形态模拟骨肉瘤临床病理中的异质性，可用于探索形态差异与细胞功能（如迁移能力、分化状态）的关联；③应用场景：广泛用于青少年骨肉瘤机制（如骨基质合成调控）、混合形态细胞分选、药物敏感性筛选（因对药物敏感，适合高通量药物筛选），同时可作为 “低恶性度骨肉瘤” 对照，与高恶性度骨肉瘤细胞（如 MG-63）对比研究）
- STR 位点信息：Amelogenin：X（确认女性核型，与性别标注一致）; CSF1PO：12（纯合子，与 BxPC-3 的 13 纯合子差异）；D13S317：12（纯合子，与 BxPC-3 的 11 纯合子差异）；D16S539：10，13（与 BxPC-3 的 9,11 差异）；D18S51：14（纯合子，与 BxPC-3 的 12 纯合子差异）；D19S433：13（纯合子，与 BxPC-3 的 13,16.2 差异）；D21S11：31.2，32.2（罕见等位基因，核心鉴别位点，与 BxPC-3 的 29 纯合子差异）；D2S1338：24，25（与 BxPC-3 的 17,19 差异）；D3S1358：15（纯合子，与 BxPC-3 的 14,16 差异）；D5S818：13（纯合子，与 BxPC-3 的 11 纯合子差异）；D7S820：11，12（与 BxPC-3 的 10,13 差异）；D8S1179：14（纯合子，与 BxPC-3 的 13 纯合子差异）；FGA：24（纯合子，与 BxPC-3 的 20,21 差异）；TH01：6（纯合子，与 BxPC-3 的 9 纯合子差异）；TPOX：8，11（与 BxPC-3 的 8 纯合子差异）；vWA：18（纯合子，与 BxPC-3 的 14,18 差异）；（STR 位点含罕见等位基因（D21S11：31.2，32.2），与 BxPC-3、PL45 图谱差异显著，可通过与 ATCC CRL-1543 数据比对，确认细胞身份及骨肉瘤属性）
- 生物安全等级：1（与 BxPC-3、PL45 一致，低于 BEAS-2B 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因含混合形态细胞，传代时需延长消化观察时间，避免成纤维样细胞未消化完全；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，含混合细胞的废液需直接灭菌，无需额外离心）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时因混合形态，需确保两种细胞均被吹打分散，台盼蓝染色计数误差＜8%（高于 BxPC-3 的 6%）；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，复苏后 48 小时存活率≥80%（低于 BxPC-3 的 80% 持平），且混合形态比例（上皮样：成纤维样≈1:1）、低克隆形成率无改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-75%，标注 “青少年女性骨肉瘤，混合细胞形态，低克隆形成率，13 岁女白人”，重点提醒混合形态及青少年来源特性）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体，结果为阴性，避免污染叠加低克隆形成率特性，导致实验周期延长或结论误判，保障与 BxPC-3、PL45 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1543，ECACC; 87070202；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心；中国科学院昆明细胞库（国际 + 国内四机构保藏，细胞来源可追溯性极强，青少年骨肉瘤特性、混合形态经过多机构验证，与 BxPC-3 的六机构保藏、PL45 的未明确保藏形成互补，便于国内外骨肉瘤研究协作）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（与 BxPC-3 的 90%1640+10% FBS 形成培养基类型差异，与 PL45 的 DMEM 一致）：①配方适配性：DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配混合形态细胞的营养配比，支持上皮样细胞的紧密生长及成纤维样细胞的松散生长；10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清（建议选用澳洲来源），无特殊添加因子（区别于 BxPC-3 的无额外因子、PANC 05.04 的胰岛素添加）；②PS 终浓度：100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染；③储存与使用：培养基可在 2-8℃避光保存，开封后 2 周内使用完毕，无需特殊预处理，操作便利性高，可与 PL45 共用培养基，降低多细胞系实验成本）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 BxPC-3、PL45 一致，湿度 70%-80%；因混合形态细胞对温度敏感，培养箱需稳定控温（波动≤±0.5℃），避免温度变化导致形态比例失衡；培养环境与其他肿瘤细胞兼容，仅需注意培养基差异，便于多细胞株并行开展 “骨肿瘤 – 内脏肿瘤” 对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配混合形态特性）：①细胞收集：选择对数生长期中期细胞（密度 75%，两种形态比例最佳），0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟（兼顾成纤维样细胞的长消化时间），期间轻柔拍打培养瓶壁辅助分散，镜下见两种形态细胞均脱落即可终止；②冻存浓度：1000rpm 离心 5 分钟，用预冷无血清冻存液重悬至 3×10⁶cells/mL（高于常规细胞的 2.5×10⁶），补偿混合形态细胞的复苏损失；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时→-80℃过夜→液氮；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟，立即用预热 DMEM 重悬，接种后 24 小时内不换液，帮助两种形态细胞同步恢复生长）
- 染色体：46~50（近二倍体，染色体数目介于 BxPC-3 的未明确核型与 PL45 的未明确核型之间）：①核型特征：染色体数目接近正常人体细胞（46 条），体现青少年骨肉瘤的低异倍体特征（区别于 BxPC-3 的高致瘤性核型），核型稳定性中等；②应用场景：a. 核型分析：通过 G 带技术观察染色体结构异常（如与骨肉瘤相关的 13 号染色体缺失）；b. 对比实验：与 BxPC-3（未明确）对比，分析青少年与老年肿瘤的核型差异；③注意事项：长期培养需每 5 代检测染色体数目，确保特征性核型比例稳定（46~50 条细胞占比≥80%））
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、混合形态验证（上皮样：成纤维样≈1:1）及支原体检测，核心特性稳定；因培养条件常规，下单后 48 小时内可发货，可与 BxPC-3 同步下单，通过调整接种时间（HOS 晚接种 1 天，因增殖略快），实现 “骨肿瘤 – 胰腺癌” 平行实验时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用双层防震泡沫箱，内置 2-8℃冰袋，运输时用固定支架防止培养瓶晃动，减少混合形态细胞脱落；到达后立即放入 CO₂培养箱，24 小时后观察形态比例，48 小时内首次换液（保留 50% 旧培养基），帮助细胞适应新环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输配备 1kg 干冰即可，确保到达时干冰剩余量≥60%） 顺丰次晨达，缩短运输时间减少形态比例波动
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 BxPC-3、PL45 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因青少年来源，额外限制：①不可用于青少年相关的人体实验；②实验数据发表需标注年龄、性别及种族背景，确保研究严谨性）
- 特别说明：核心建议：①混合形态细胞操作：a. 传代技巧：消化时先观察成纤维样细胞（梭形）是否脱落，待其脱落 50% 时，轻轻吹打上皮样细胞区域，避免过度消化导致上皮样细胞损伤；b. 形态维持：传代时确保两种形态细胞均匀接种，避免单一形态细胞富集（如成纤维样细胞过度生长）；若形态比例失衡（某一形态占比＜30%），需重新复苏低代数细胞；②骨肉瘤特性验证：首次培养时，建议通过以下实验确认骨肉瘤属性：a. 碱性磷酸酶染色（骨肉瘤细胞阳性，BxPC-3 阴性）；b. 骨桥蛋白 Western Blot 检测（高表达，区别于胰腺癌的低表达）；c. 软琼脂克隆形成实验（克隆形成率＜10%，验证低克隆特性）；③青少年 vs 老年肿瘤对比：与 BxPC-3（61 岁女胰腺癌）对比时，可：a. 检测衰老相关基因（p16、p21，HOS 低表达）；b. 对比药物敏感性（如顺铂，HOS IC50 更低，更敏感）；c. 分析分化相关基因（Runx2，骨肉瘤分化标志物，HOS 阳性）；④长期监测：每 5 代检测混合形态比例（上皮样：成纤维样 1:1±0.2）、染色体数目（46~50）及骨肉瘤标志物，若发现特性异常，立即更换低代数细胞
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