一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:HPAC-NLUC-puro 人胰腺腺泡上皮癌 (NLUC 标记)
种属来源:人
组织来源:胰腺
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以更好维持纳米荧光素酶(NLUC)活性及胰腺腺泡上皮癌细胞特有的生物学特征
生物安全等级:未明确标注,参考同类人胰腺癌细胞标准,建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度:该细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持,保障 NLUC 基因稳定表达的同时不影响细胞生长
背景与筛选验证
背景介绍
HPAC-NLUC-puro 细胞稳定表达纳米荧光素酶(NLUC,具有荧光信号强、背景低、检测灵敏度高的优势),性状稳定,可用作 NLUC 活性检测的阳性对照,也适用于人胰腺腺泡上皮癌体内成像实验(如裸鼠皮下成瘤、胰腺原位移植模型的高精准荧光追踪)。
该细胞保留胰腺腺泡上皮癌细胞的核心特性,是研究胰腺腺泡上皮癌发病机制、抗肿瘤药物筛选(如针对胰腺癌细胞增殖或侵袭的药物评估)的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
- 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、NLUC 活性及胰腺癌相关实验结果,保障数据准确性);
- 保藏机构:未明确标注,可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息,确保细胞株稳定性与胰腺腺泡上皮癌属性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方(关键成分不可省略)
DMEM/F12 培养基 + 5% FBS(胎牛血清) + 0.002 mg/ml 胰岛素 + 0.005 mg/ml 转铁蛋白 + 40 ng/ml 氢化可地松 + 10 ng/ml 表皮生长因子;
注:胰岛素、转铁蛋白、氢化可地松、表皮生长因子为细胞生长必需的特殊添加因子,直接影响细胞活性与 NLUC 表达,不可省略;药筛或维持培养时,需额外添加对应浓度 puro(药筛 1.0μg/ml,维持 0.5μg/ml)。
2. 培养条件
- 气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整);
- 操作注意事项:操作时动作轻柔,避免频繁移动培养瓶影响细胞贴壁;定期观察细胞形态,确保上皮细胞样形态稳定(形态异常可能提示细胞特性改变);待细胞密度达 70%-80% 时及时传代,防止过度密集导致 NLUC 活性下降或细胞凋亡。
3. 冻存条件
- 冻存液:无血清冻存液;
- 操作要点:冻存前确保细胞处于对数生长期,保留 NLUC 活性与成瘤能力;按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装,梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存)后存入液氮;复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化,离心后用含完整添加因子的培养基重悬,避免冻存液残留对细胞的毒性影响。
货期与发货
- 细胞货期:现货,1 周左右;
- 发货方式:复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输复苏细胞时,需使用防震包装减少颠簸,降低贴壁细胞脱落概率,保障接收后细胞活性与成瘤特性稳定。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;开展实验时,需重点关注培养基特殊因子的精准配置(建议现配现用,避免因子失活),体内实验可直接参考成瘤验证参数提升成功率;利用 NLUC 高灵敏度特性,可早期监测胰腺原位肿瘤的生长,精准评估药物治疗效果。


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