一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

培养核心操作

1. 传代：细胞密度达 70%-80% 时，用胰酶温和消化，加专用培养基终止；操作时避免剧烈吹打，防止长梭状细胞形态被破坏，传代比例参考 1:2-1:4。
2. 换液：每 2-3 天更换新鲜专用培养基，清除代谢废物；若需维持嘌呤霉素抗性，需按随货说明书添加对应浓度的嘌呤霉素，确保细胞永生化特性稳定。
3. 冻存：选取对数期细胞，离心清洗后用冻存液重悬（1×10⁶-2×10⁶cells/ml），梯度降温后存入液氮，保证复苏后细胞仍能稳定表达 SV40 基因与 α-SMA。
4. 复苏：37℃水浴速融冻存管，离心弃冻存液，用预热的专用培养基重悬；接种后静置 24-48h，观察贴壁情况及长梭状细胞形态恢复，后续按需添加嘌呤霉素。