一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：HT-29 人结肠癌细胞（STR 鉴定正确）（与 HCT-15（高 CEA、快增殖、男性）、HCT-8（回盲肠、低 CEA、老年男）同属结直肠癌细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、SNU-216（胃癌），核心特色为 “44 岁女性 + 贴壁展开慢 + 中倍增殖 + 多受体表达”，是结直肠癌女性发病机制、慢贴壁细胞培养优化、受体靶向治疗研究的关键模型；可与 HCT-15（男性、快增殖）、HCT-8（老年男、低 CEA）、GES-1（正常）组成 “结直肠癌细胞 – 性别 / 年龄 / 增殖速度梯度 + 正常对照” 体系，探索性别与年龄对肿瘤特性的双重影响，同时因多受体表达，可用于结直肠癌受体介导的信号通路及靶向药物筛选研究）
- 细胞别称：HT 29; HT29；HT-29；人结肠癌细胞（别称以 “HT” 为核心前缀，与 “HCT” 系列（HCT-15、HCT-8）形成结直肠癌细胞株的清晰前缀区分，数字 “29” 便于实验记录检索；空格与连接符差异为常见书写变体，统一标注避免混淆；“人结肠癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，贴合 “结直肠癌细胞 + 字母 + 数字” 的精准命名体系，防止与其他 “HT” 前缀细胞（如宫颈癌细胞 HT-3）混淆）
- 性别年龄：女；44 岁（明确的中年女性背景，填补结直肠癌细胞模型中中年女性的空白，与 HCT-15（男性）、HCT-8（67 岁男）形成 “中年女 – 男性 / 老年男” 性别年龄双重对照，与 CW2（女性、低增殖）形成 “同性别不同增殖特性” 对照，与 GES-1（9 个月胎儿）形成 “中年 – 胎儿” 极端年龄对照；44 岁接近临床结直肠癌发病年龄（50 岁以上）下限，可用于中年女性结直肠癌早期发病机制研究，适合模拟临床中年女性结肠癌的研究场景）
- 组织来源：结肠（未明确具体病理分期，推测为原发结肠癌细胞，保留结肠癌核心生物学特征；区别于 HCT-8 的回盲肠部位、HCT-15 的未明确部位，可用于结肠原发肿瘤基础生物学特性（如慢贴壁机制）研究，同时为临床结肠原发癌诊断标志物筛选及治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 HCT-15、HCT-8 一致，但核心特色为贴壁及展开慢（24h 后部分细胞未展开属正常）；对数生长期细胞增殖节奏中等（36-60 小时倍增时间，慢于 HCT-15 的 20-25 小时，快于 CW2 的 72-96 小时）；贴壁强度低于 HCT-15、与 HCT-8 相近，细胞间连接紧密，呈单层均匀分布（展开后）；传代后 24-48h 内禁止移动培养瓶，避免影响贴壁展开，适合开展慢贴壁细胞的培养条件优化及贴壁相关信号通路研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞展开后呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，核浆比适中，具备结肠腺癌细胞典型上皮形态特征；未完全展开时呈圆形或短梭形，需 48h 后才能观察到完整上皮形态，与 HCT-15（快速展开、致密排列）、HCT-8（正常展开、较稀疏）的形态差异主要体现在贴壁展开速度；角蛋白免疫染色阳性（隐含上皮属性，可通过实验验证），可通过 “慢展开 + 上皮样” 形态及时间特征快速鉴别，避免与同器官其他细胞混淆，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过结直肠特异性标志物（如 CK20）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “慢贴壁特性、中等倍增时间、多受体表达” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如贴壁展开速度加快、受体表达下降、增殖节奏异常）
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- 贴壁展开管理：传代后 24-48h 内严禁移动培养瓶（包括观察时的晃动），培养箱内托盘需固定，避免轻微震动导致未贴壁细胞脱落；48h 后可镜检观察展开情况，未展开细胞比例≤30% 为正常，若超过 50% 需检查培养基批次（是否含贴壁促进因子）及培养箱温度（波动需＜±0.5℃）；
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- 传代时机把控：因贴壁展开慢，传代需在细胞完全展开且密度达 80% 时进行（通常为传代后 5-7 天），传代比例 1:2（低于常规细胞的 1:3-1:5），避免过度稀释延长贴壁展开时间；
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- 换液频率调整：传代后 48h 内不换液，48h 后按 2-3 天 1 次换液，换液时用移液管沿瓶壁缓慢加入新鲜培养基，避免冲击贴壁细胞。
- 背景介绍：HT-29 细胞系由 J.Fogh 在 1964 年用移植培养方法和含 15% FBS 的 F12 培养液从原发性肿瘤分离，核心特性及应用如下：①培养历史与特性：建系历史超 50 年，早期用 F12 培养液，现用含血清 McCoy’s 5A 培养液，培养体系成熟；裸鼠及类固醇处理地鼠致瘤性强，成瘤病理类型为高分化腺癌（I 级），贴合临床早期结肠癌病理特征；②应用场景：广泛用于结直肠癌慢贴壁机制（如整合素信号通路）、女性肿瘤性别差异、受体靶向治疗（如肾上腺素 α2A 受体抑制剂）研究，同时可与 HCT-15 搭配开展 “快慢增殖” 对比实验，探索贴壁速度与增殖节奏的关联机制。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（明确女性性别，与性别标注一致，验证细胞身份，排除交叉污染，与 CW2（Amelogenin：X,X）共同确认女性结直肠癌细胞身份）; CSF1PO：11，12；D13S317：11，12；D16S539：11，12；D18S51：13；D19S433：14；D21S11：29，30；D2S1338：19，23；D3S1358：15，16.3（特异性等位基因，区别于 HCT-15）；D5S818：11，12；D7S820：10；D8S1179：10，16；FGA：20，22；TH01：6，9；TPOX：8，9；vWA：17，19；（STR 位点含特异性等位基因（如 D3S1358：15，16.3），与 HCT-15、HCT-8 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与保藏机构（ATCC HTB-38）数据比对，确认细胞身份及结肠特性）
- 生物安全等级：1（与 HCT-15、HCT-8、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，便于实验室统一管理不同安全等级的消化道细胞，降低实验操作门槛）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 72 小时存活率≥75%（因慢贴壁，复苏后贴壁展开需 48h 以上，存活率计算需在 72h 后），且慢贴壁特性、上皮样形态无显著改变；T25 瓶发货时细胞已展开 70%，标注 “传代后 48h 内勿移动”，提醒用户遵循特殊培养要求）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞慢贴壁过程、受体表达及增殖节奏，保障与 HCT-15、HCT-8 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; HTB-38，BCRJ; 0111，CCLV; CCLV-RIE 0960，DSMZ; ACC-299，ECACC; 91072201；中国典型培养物保藏中心细胞库（国际权威机构（ATCC、DSMZ、ECACC）、地区性机构（BCRJ、CCLV）与国内机构三重保藏，细胞来源可追溯性极强，慢贴壁特性及多受体表达表型经过多重验证，与 HCT-15（多国际机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90%5A（McCoy’s 5A）+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 McCoy’s 5A 培养基，与 HCT-15 的 RPMI-1640、HCT-8 的 DMEM 显著不同；McCoy’s 5A 含独特的氨基酸配比及维生素，适配慢贴壁结肠癌细胞的代谢需求，支持其贴壁展开及多受体合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中贴壁抑制因子延长展开时间；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞受体表达及致瘤性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 75%-80%（高于常规细胞），减少培养基蒸发导致未贴壁细胞干涸；培养箱内避免任何震动，可在培养瓶下垫防滑垫固定位置；与 HCT-15、HCT-8、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需适配慢贴壁特性调整操作（如禁止早期移动），便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配慢贴壁与贴壁特性：①选择对数生长期后期细胞（完全展开、密度 80%），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟（长于 HCT-15 的 1-2 分钟），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，补偿慢贴壁导致的复苏损失）；③冻存流程：4℃平衡 40 分钟→-20℃放置 3 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟融化，离心后用预热的 McCoy’s 5A 培养基重悬，接种后立即放入培养箱，48h 内不移动，避免 DMSO 对细胞贴壁相关蛋白（如整合素）的影响）
- 染色体：64~69（染色体数目高于正常二倍体（46 条），为中低异倍体，与 HCT-15（未明确，推测高异倍体）、HCT-8（81~90 条高异倍体）形成染色体倍性梯度；染色体数目稳定，实验设计中需注意中低异倍体对药物靶点表达（如肾上腺素 α2A 受体）的影响，适合开展精准的受体信号通路实验）
- 倍增时间：~36-60 hours（增殖速度中等，介于 HCT-15（20-25 小时）与 CW2（72-96 小时）之间，对数生长期为接种后 48-72 小时（需待细胞完全展开），需每 24 小时镜检 1 次细胞密度，待密度达 80% 时传代；实验设计需适配中长周期，如药物处理时间建议 48-72 小时，受体结合实验需在细胞完全展开后进行）
- 致瘤性：Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.（明确的裸鼠及类固醇处理地鼠致瘤能力，成瘤病理类型为高分化腺癌（I 级，分化程度高于 HCT-15 的未明确分级），成瘤周期中等（结合 36-60 小时倍增时间，推测裸鼠皮下成瘤 3-4 周可见明显肿瘤）；建议裸鼠接种密度为 5×10⁶cells / 只（高于 HCT-15 的 1×10⁶cells / 只），成瘤后通过 HE 染色观察高分化腺管样结构，验证与结肠原发癌的病理一致性，适合开展结肠癌高分化亚型的体内药物 efficacy 评估）
- 受体表达情况：human adrenergic alpha2A（肾上腺素 α2A 受体，参与肿瘤细胞增殖调控，可用于 α2A 受体抑制剂靶向治疗研究）; urokinase receptor (u-PAR)（尿激酶受体，与肿瘤侵袭转移相关）; vitamin D (moderate expression)（维生素 D 受体，中等表达，参与肠道细胞分化调控）; human adrenergic alpha2A（重复标注，强调该受体的重要性）（多受体表达为结直肠癌受体靶向治疗提供多个靶点，可通过 Western Blot 检测受体蛋白表达，或通过受体结合实验（如放射性配体结合法）验证受体活性，与 HCT-15（无多受体标注）形成受体表达差异对比）
- 基因表达情况：secretory component of IgA（IgA 分泌成分，肠道黏膜免疫相关，体现结肠细胞的器官特异性功能）; carcinoembryonic antigen (CEA)（结直肠癌标志物，未明确具体表达量，可通过 ELISA 法检测，推测表达量介于 HCT-8（0.5ng）与 HCT-15（5.4ng）之间）; transforming growth factor beta binding protein（转化生长因子 β 结合蛋白，参与 TGF-β 信号通路，调控肿瘤增殖与分化）; mucin（黏蛋白，结肠上皮细胞特异性分泌蛋白，验证器官属性）; myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+（多个癌基因及抑癌基因阳性，体现肿瘤细胞的分子特征）; abl -; ros -; src -（多个癌基因阴性，与阳性基因形成分子表型差异）; Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5（血型及 HLA 分型信息，可用于细胞身份验证及免疫相关实验）; HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV)（CD4 阴性、半乳糖神经酰胺阳性，为 HIV 与结肠癌关联研究提供特殊模型）（基因表达与结肠器官特性、肿瘤分子特征及受体功能高度关联，可通过 RT-PCR 检测受体相关基因（如 ADRA2A 编码肾上腺素 α2A 受体）的表达，分析其与慢贴壁特性的分子关联）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 McCoy’s 5A 培养基适应性培养、贴壁展开速度验证（记录 24-48h 展开比例）及受体表达检测，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，因慢贴壁特性，建议比 HCT-15 提前 1-2 天下单，保障 “性别 / 增殖速度梯度” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中使用固定支架防止培养瓶晃动，减少未贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，48h 内不观察不移动，确保细胞稳定贴壁展开）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%
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