一、细胞基本属性
- 细胞名称：HuH-7 人肝癌细胞
- 细胞别称：HuH-7; HUH-7; HuH7; Huh7; HUH7; JTC-39; Japanese Tissue Culture-39（“JTC-39” 为早期别称，可用于文献追溯及细胞身份交叉验证）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男（未标注具体年龄，参考肝癌细胞常见建系背景，推测为成年男性，具体以保藏机构原始记录为准）
- 组织来源：肝脏（源自肝癌组织，具备肝细胞肝癌典型的生物学特征，区别于肝母细胞瘤衍生株，是肝癌基础研究及药物筛选的常用模型）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力较强，对数生长期细胞贴壁紧密，传代时需注意消化时间控制，避免过度损伤细胞）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列呈铺路石样，胞质丰富，核仁清晰，可通过形态观察初步判断细胞生长状态及纯度）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留肝癌细胞原始表型，如蛋白分泌、药物敏感性等特性，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致生物学特性漂移）
- 背景介绍：HuH-7 细胞是肝细胞肝癌研究领域的经典细胞株，核心特性如下：①蛋白分泌功能：文献报道该细胞可产生甲胎蛋白（AFP，肝癌诊断标志物）、胰酶 α 抗体、血浆铜蓝蛋白（参与铜代谢）、纤维蛋白原（凝血相关蛋白）、纤维粘连蛋白（细胞黏附相关蛋白），适用于肝癌细胞功能分化、蛋白分泌调控及相关机制研究；②应用场景：因具备完整的肝细胞代谢通路及肝癌细胞恶性表型，可用于肝癌发病机制（如信号通路异常激活）、抗肝癌药物筛选（如靶向治疗药物 efficacy 评估）、病毒感染（如 HCV、HBV）相关研究，同时也是肝细胞功能研究的重要模型；③细胞特性：相较于其他肝癌细胞株，HuH-7 细胞对药物的敏感性较高，且易于转染，适合开展基因过表达、干扰等分子生物学实验。
- STR 位点信息：Amelogenin：X,X（此处需注意：性别标注为男性，但 Amelogenin 位点显示为 X,X，推测为原文标注误差或位点检测特殊情况，建议实验前通过染色体核型分析或重新 STR 鉴定确认性别，避免对实验结果产生干扰）；CSF1PO：11,11；D12S391：20,21；D13S317：10,11；D16S539：10,10；D18S51：15,15；D19S433：13,14；D21S11：30,30；D2S1338：19,19；D3S1358：15,15；D5S818：12,12；D6S1043：13,15；D7S820：11,11；D8S1179：14,15；FGA：22,22；Penta E：11,11；TH01：7,7；TPOX：8,11；vWA：16,18；（STR 位点中多个位点呈纯合子（如 CSF1PO：11,11、D16S539：10,10），是该细胞 STR 图谱的显著特征，可用于细胞身份快速识别及交叉污染排除）
- 使用权限：A 类（属于开放获取的科研用细胞株，无需特殊申请即可获取，适合各类科研机构开展基础及应用研究，但需遵守供应限制条款）
- 生物安全等级：1（参考人源肝细胞肝癌细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，避免细胞污染及废弃物不当处理）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，确保实验起始细胞活性一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法或培养法检测支原体，结果为阴性，可直接用于实验，无需额外进行除支原体处理，避免影响细胞生长及实验结果）
- 保藏机构：CCLV; CCLV-RIE 1079，JCRB; JCRB0403，KCB; KCB 200970YJ，KCLB; 60104；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（多国内外机构保藏，细胞来源可追溯，基因型及生物学特性稳定，适合长期实验及结果重复验证）
- 培养基：89% DMEM（高糖型，含 4.5g/L 葡萄糖，满足肝癌细胞高能量代谢需求）+10% FBS（胎牛血清，建议选择批次间差异小的优质血清，避免血清质量影响细胞生长及蛋白分泌）+1% PS（青霉素 – 链霉素，终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，预防细菌污染），培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用，避免低温刺激细胞导致应激反应
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换培养箱内水盘，防止培养基蒸发过快导致渗透压升高，影响细胞生长状态；避免频繁开关培养箱，维持环境稳定以保证细胞生长一致性）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①对数生长期细胞消化后离心收集，用预冷冻存液重悬，调整细胞浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；②分装至冻存管，4℃平衡 30 分钟；③-20℃放置 2 小时（可使用程序降温盒，减少低温损伤）；④-80℃过夜；⑤次日转入液氮长期保存。复苏时需 37℃水浴快速融化，1 分钟内完全溶解，避免 DMSO 对细胞产生毒性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，下单后 48 小时内可安排发货，特殊需求如加急复苏、额外检测甲胎蛋白分泌水平等，可提前与供应方沟通协调）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，运输时采用恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保细胞运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入培养箱）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞为肝细胞肝癌细胞株，实验操作及结果解读需注意：①传代操作：采用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液，37℃孵育 2-3 分钟，镜下观察细胞间隙增大、形态变圆即可终止消化，用含血清培养基中和胰酶，轻柔吹打瓶壁，避免用力过猛导致细胞破碎；②蛋白检测建议：因细胞可分泌甲胎蛋白，可通过 ELISA、Western Blot 等方法定期检测培养上清中 AFP 含量，验证细胞肝癌表型稳定性；③转染实验注意事项：HuH-7 细胞转染效率较高，常规脂质体转染法即可获得较好效果，转染时建议使用无血清培养基稀释转染试剂，转染后 6-8 小时更换为含血清培养基，减少细胞毒性；④STR 性别位点差异处理：若实验对细胞性别有严格要求，建议复苏后通过染色体核型分析（如 G 带染色）或 Amelogenin 基因单独 PCR 验证，确认细胞实际性别，避免因 STR 标注误差影响实验设计；⑤污染防控：实验操作需在超净工作台内进行，定期对培养箱、培养基进行无菌检测，避免细胞交叉污染或微生物污染，确保实验结果可靠。
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