一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:kyse30 人食道癌细胞(STR 鉴定正确)
核心特色:64 岁女性高分化浸润性食管鳞癌(胸中段食管,术前切除)+ 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 +48%RPMI-1640+48%F12+2%FBS+1%PS+1%GlutaMAX-1(混合培养基 + 低血清 + 必需谷氨酰胺添加剂)+~20-30 小时快倍增 + 携带p53 突变及 cERB B/MYC/CYCLIN D1 扩增(食管癌关键分子特征)+ 经裸鼠异种移植建系 + 多机构保藏(DSMZ ACC-351/ECACC 94072011/JCRB 0188),可与 EC109(食管鳞癌 / 贴壁 / DMEM/10% FBS / 无 GlutaMAX 依赖 / 中分化)、TE-1(食管鳞癌 / 贴壁 / RPMI-1640/10% FBS / 低分化 / 无 MYC 扩增)组成对比体系,用于高分化食管鳞癌机制研究、低血清适应型肿瘤细胞实验、p53/MYC 相关通路及食管癌靶向药物(如 cERB B 抑制剂)筛选。 - 细胞别称:KYSE 30;KYSE30;KYSE0030;人食管鳞癌细胞
标注 “高分化食管鳞癌(64 岁女性,胸中段)+ 贴壁上皮样 + 混合培养基(RPMI-1640/F12=1:1)+2% 低血清 + p53 突变”,区别于中低分化食管癌细胞(EC109/TE-1)、单一培养基培养的肿瘤细胞,规避食管癌分化程度、培养基类型及血清浓度依赖混淆。 - 种属来源:人(STR 鉴定正确,种属纯净无交叉污染,保障食管鳞癌细胞贴壁能力、上皮形态、混合培养基适应及分子特征稳定性,适配食管癌基础研究、靶向实验场景)
- 年龄性别:女性,64 岁(明确患者年龄性别及肿瘤部位,适配老年女性食管鳞癌发病机制、胸中段食管癌临床相关性研究)
- 组织来源:食管鳞状上皮(高分化浸润性食管鳞癌,源于 64 岁女性胸中段食管术前切除组织,经裸鼠异种移植后建立细胞系),保留高分化鳞癌特有的上皮结构特征、低血清适应能力,核心优势为 “高分化属性 + 混合培养基依赖 + 明确分子突变”,适配高分化食管癌恶性进展、低血清肿瘤微环境适应实验。
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁,低血清培养需控制密度与消化强度)
0.25% 胰酶 37℃孵育 3-5 分钟消化(高分化上皮细胞贴壁中等紧密,低血清培养细胞对胰酶更敏感,避免过度消化),汇合度 80%-90% 时按 1:3-1:4 传代(因倍增~20-30 小时,传代间隔 1 天左右,需高频换液);细胞密度维持在 3×10⁴-5×10⁴cells/cm²(低血清环境下密度过低易凋亡),每 24 小时换液 1 次(混合培养基营养消耗快,需及时补加 GlutaMAX-1),适合开展食管癌快增殖相关实验(如药物快速敏感性检测)。 - 细胞形态:上皮细胞样(呈规则多边形,胞质均匀,排列紧密(高分化特征),与 EC109 的 “上皮样(中分化,排列略松散)”、TE-1 的 “上皮样(低分化,形态不规则)” 差异显著,可通过 “高分化紧密排列 + 混合培养基” 快速鉴别,适配食管鳞癌细胞分化程度验证及纯度检测实验)
- 背景简介:人食管鳞癌细胞系(STR 鉴定正确),源于 64 岁女性胸中段高分化浸润性食管鳞癌术前切除组织,经裸鼠异种移植后建系;贴壁生长呈上皮细胞样,需 48% RPMI-1640+48% F12+2% FBS+1% PS+1% GlutaMAX-1 混合培养基培养;关键分子特征:携带 p53 突变,且 cERB B(HER2 同源基因)、MYC、CYCLIN D1 基因扩增(均为食管癌预后相关标志);无 EC109 的中分化属性或 TE-1 的低分化特征,是研究高分化食管鳞癌、低血清适应型肿瘤及 p53/MYC 通路的理想模型,可用于高分化 vs 中低分化食管癌差异机制研究。
- STR 鉴定:kyse30 人食道癌细胞 STR 鉴定图片(微信截图_20250414113617.png,可通过图谱比对验证细胞真实性,排除中低分化食管癌细胞污染)
- 细胞代数:10 代以内(低代数保障高分化特征、混合培养基适应能力及分子突变稳定性,传代超过 15 代需重新验证 p53 突变及基因扩增状态)
- 生物安全等级:1 级(操作无特殊生物安全要求,适配常规细胞实验室研究)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管,复苏后存活率≥85%,24 小时贴壁率≥90%,需镜检确认高分化上皮细胞样形态占比(≥85%),排除低分化杂细胞污染。
- 支原体检测:无(经 PCR 法或培养法检测,确认无支原体污染,避免影响低血清培养细胞的增殖及分子实验结果准确性)
- 保藏机构:DSMZ; ACC-351、ECACC; 94072011、JCRB; JCRB0188(国内外权威机构保藏,细胞高分化食管鳞癌属性、分子突变特征及低血清适应能力经验证,可追溯性强,适配实验细胞来源合规性要求)
- 培养基:48% RPMI-1640 培养基 + 48% F12 培养基 + 2% FBS+1% PS(青霉素 – 链霉素)+1% GlutaMAX-1 谷氨酰胺(核心注意事项:① 必须严格按 1:1 比例混合 RPMI-1640 与 F12,比例偏差会导致细胞活力骤降;② 2% 低血清不可随意提升(高于 5% 易导致分化特征丢失);③ GlutaMAX-1 不可用普通谷氨酰胺替代(稳定性更强,适配低血清营养环境);血清选低内毒素≤5EU/mL,避免低血清下细胞应激反应)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃,湿度 70%-80%;每 24 小时换液 1 次(沿培养瓶壁缓慢加液,避免冲击贴壁细胞);培养箱温度波动需≤±0.3℃,防止低血清环境下温度变化进一步影响细胞增殖(如 MYC 基因表达波动)。
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮(-196℃)中长期储存;冻存液需额外添加 2% FBS+1% GlutaMAX-1(匹配常规培养条件,提升复苏存活率);细胞浓度 2×10⁶cells/mL,梯度降温流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→转入液氮;复苏时 37℃水浴 1 分钟快速溶解,直接加入预温的混合培养基(无需离心),减少对低血清适应细胞的损伤。
- 倍增时间:~20-30 小时(快倍增特性,适配食管癌快速增殖相关实验,如 48 小时药物干预即可检测药效;可通过细胞计数法绘制生长曲线,确认本实验室条件下的实际倍增时间,偏差需≤10%)
- 细胞货期:现货,1 周左右
- 运输方式:复苏发货(T25 培养瓶包装,免运输费用,标注 “混合培养基 + 低血清细胞,运输后 24 小时内换液”,避免低血清环境下营养耗尽);冻存发货(1mL 冻存管包装,需额外支付干冰运输费用),默认顺丰快递(优先冷链运输,确保细胞活性及高分化特征)。
- 供应限制:仅限于科学研究使用(包括高分化食管鳞癌机制、低血清肿瘤微环境适应、p53/MYC/CYCLIN D1 通路调控、食管癌靶向药物筛选等),绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用,亦不可用于临床诊断或非科研用途。
- 特别说明:① 首次培养需双核心验证:STR 分型比对(与 JCRB0188/DSMZ ACC-351 一致)、PCR 检测 p53 突变及 cERB B/MYC/CYCLIN D1 扩增(确认分子特征),镜检高分化上皮形态纯度(≥85%);② 培养基配置提醒:必须使用无菌移液管精确配比 RPMI-1640 与 F12,建议现配现用,避免混合后长期储存导致成分降解;③ 适配实验方向:高分化 vs 中低分化食管鳞癌基因表达差异、低血清肿瘤细胞代谢机制、cERB B/MYC 靶向药物(如曲妥珠单抗、MYC 抑制剂)药效筛选、食管鳞癌裸鼠移植模型构建(因细胞源于裸鼠异种移植,体内成瘤效率高)。


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