一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：LLC-NLUC-puro 小鼠 Lewis 肺癌细胞 (NLUC 标记)
种属来源：小鼠
组织来源：肺
生长特性：半贴壁生长（部分细胞贴壁、部分悬浮，需同步收集两种状态细胞）
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：未明确标注，建议优先选择低传代细胞（如 p3-p10），以更好维持纳米荧光素酶（NLUC）活性及 Lewis 肺癌细胞特有的生物学特征
生物安全等级：未明确标注，参考同类小鼠肿瘤细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持，保障 NLUC 基因稳定表达的同时不影响细胞生长
背景与筛选验证
背景介绍
LLC-NLUC-puro 细胞稳定表达纳米荧光素酶（NLUC，具有荧光信号强、背景噪声低、检测灵敏度高的优势），性状稳定，可用作 NLUC 活性检测的阳性对照，也适用于小鼠 Lewis 肺癌体内成像实验（如皮下成瘤、肺原位移植或转移模型的高精准荧光追踪）。该细胞保留 LLC 细胞的核心特性 —— 典型小鼠肺癌特征，是研究肺癌发病机制、抗肿瘤药物筛选（如抗增殖、抗转移药物评估）的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、NLUC 活性及肺癌相关实验结果，保障数据准确性）；
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与小鼠 Lewis 肺癌属性可靠。
培养与冻存
- 培养基配方：90% DMEM 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）；药筛或常规维持时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 1.0μg/ml，维持 0.5μg/ml），适配半贴壁生长的肺癌细胞营养需求，无需额外添加特殊因子。
- 培养条件：
- 气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）；
- 操作注意事项：
- 传代时先收集上清中的悬浮细胞，再用胰酶消化贴壁细胞，两者离心后混合重悬，确保细胞群体完整；
- 定期观察细胞密度，待贴壁细胞占瓶底 70%-80% 时及时传代，防止过度密集导致 NLUC 活性下降或细胞凋亡；
- NLUC 对光稳定性较好，但仍建议避免长时间强光直射培养瓶，减少潜在荧光信号损耗。
- 冻存条件：
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前同步收集悬浮细胞与消化后的贴壁细胞，混合离心后用冻存液重悬，调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存）；复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化，离心后用新鲜培养基重悬，避免冻存液残留对细胞的毒性影响，复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 NLUC 活性。
货期与发货
细胞货期：现货，1 周左右；
发货方式：复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需使用防震包装减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率，保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展肺癌相关实验时，可结合其半贴壁特性与 Lewis 肺癌易转移的特点，设计肺转移模型，利用 NLUC 高灵敏度特性，动态监测肿瘤生长与转移过程，精准评估药物干预效果，提升实验数据的临床相关性。
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