一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：LN-229-FLUC-puro 人胶质瘤细胞 (FLUC 标记)
种属来源：人
组织来源：脑（源自胶质母细胞瘤，适配胶质瘤恶性生物学特性研究）
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：未明确标注，建议优先选择低传代细胞（如 p3-p10），以更好维持荧光素酶（FLUC）表达稳定性及胶质瘤细胞特有的基因突变与恶性特征
生物安全等级：未明确标注，参考同类人胶质瘤细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
背景与筛选验证
背景介绍
LN-229-FLUC-puro 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，可用作 FLUC 活性检测的阳性对照，也适用于人胶质母细胞瘤体内成像实验（如裸鼠皮下成瘤、脑原位移植模型的荧光追踪）。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 LN-229 细胞具备明确分子特征：1979 年建系自右额顶枕叶胶质母细胞瘤患者，存在 p53 突变，p16 及 p14ARF 肿瘤抑制基因可能缺失，含野生型 PTEN 基因，是研究胶质母细胞瘤基因突变相关机制、靶向药物筛选的专用细胞株。
puro 药筛浓度
LN-229-Fluc 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障 Luc 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长、基因突变特征及胶质母细胞瘤恶性特性。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、FLUC 活性及胶质瘤分子机制实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株基因突变特征与胶质瘤属性稳定可靠。
培养与冻存
- 培养基：DMEM 培养基 + 5% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+0.5μg/ml puro（常规培养直接按此浓度添加，5% 低血清浓度为关键培养条件，不可随意提高血清比例；药筛时需将 puro 浓度调整为 1.0μg/ml）；
- 培养条件：气相为 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃，培养箱湿度 70%-80%（需严格控制湿度环境，避免培养基过度蒸发影响细胞营养供给；操作时动作轻柔，避免频繁移动影响细胞贴壁状态）；
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存；冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 FLUC 活性与基因突变特征；按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装，梯度降温后冻存，减少复苏损伤；复苏后优先观察细胞贴壁情况与生长状态。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率，保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；需重点关注 “5% 低血清浓度” 与 “70%-80% 培养箱湿度” 的特殊要求，同时开展分子机制研究时，可结合其 p53、p16/p14ARF、PTEN 基因特征设计实验（如靶向 p53 通路的药物干预）。
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