一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:LN229 人大脑神经母瘤细胞
核心特色:右额叶顶枕叶皮质来源 + 1979 年建系 + 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 + DMEM+5% FBS 低血清培养基 + 10 代以内代数 + p53 突变 /p16/p14ARF 缺失 / 野生型 PTEN,可与 U-87 MG(女性星形胶质母细胞瘤 / 10% 血清 / 裸鼠成瘤)、HEB(正常脑胶质细胞 / 10% 血清 / 无突变)组成 “细胞类型(神经母瘤 – 星形胶质母细胞瘤 – 正常胶质细胞)+ 血清需求(5%-10%-10%)+ 分子特征(明确突变 – 无描述 – 无突变)” 对比体系,用于大脑神经母瘤机制、低血清培养适配性、肿瘤相关基因突变研究及脑肿瘤分子亚型差异探索。
- 细胞别称:LN 229; LN229; LNT-229;人脑胶质细胞瘤
标注 “右额叶顶枕叶皮质 + 低血清培养 + p53 突变 + 野生型 PTEN”,区别于 U-87 MG 的 “女性星形胶质母细胞瘤 + 10% 血清 + 裸鼠成瘤”、HEB 的 “正常脑胶质 + 10% 血清 + 无突变” 标识,凸显脑部位特异性及分子特征。
- 种属来源:人(无交叉污染风险,种属纯净,保障神经母瘤特有的贴壁能力、上皮形态、低血清适应能力及基因突变特征稳定,与 U-87 MG、HEB 的种属来源一致,具肿瘤细胞恶性特征及明确分子标记,适配脑肿瘤分子机制研究)
- 性别年龄:未明确(适配无特定性别年龄需求的脑肿瘤分子实验,与 U-87 MG 的 “女性” 形成 “无性别 – 女性” 对比,与 HEB 的 “未明确” 形成 “肿瘤 – 正常” 对照,可聚焦基因突变对实验结果的影响,排除性别年龄干扰)
- 组织来源:大脑 / 右额叶顶枕叶皮质;病理类型:神经母瘤(中枢神经系统肿瘤,与 U-87 MG 的 “星形胶质母细胞瘤” 同属脑肿瘤但亚型 / 部位不同,区别于 HEB 的 “正常脑胶质细胞”,保留神经母细胞瘤特有的皮质来源属性,且具明确的 p53/p16/p14ARF/PTEN 基因状态,无 U-87 MG 的裸鼠成瘤性描述)
- 生长特性:贴壁生长(核心生长特性差异,与 U-87 MG、HEB 一致)
① 倍增时间未明确标注,参考同类低血清培养神经母瘤细胞,推测 48-72 小时(慢于 U-87 MG 的 36-72 小时下限,适配低血清环境下肿瘤细胞增殖节奏);② 需胰酶消化(0.25% 胰酶,37℃孵育 4-6 分钟),细胞汇合度达 75%-85% 时按 1:2 传代,因低血清培养细胞贴壁较脆弱,消化时间需精准控制(避免过度消化),传代后 36 小时内贴壁稳定,低血清环境下需避免频繁传代(间隔 4-5 天)。
- 细胞形态:上皮细胞样(核心形态差异,呈多边形,胞质紧凑,排列较密集,与 U-87 MG 的 “上皮细胞样(胞质均匀)”、HEB 的 “上皮细胞样(规整无突起)” 形态相近,可通过 “低血清需求 + 基因突变特征” 快速鉴别,区别于 HEB 的正常细胞形态舒展性)
- 细胞代数:10 代以内(避免贴壁能力下降、上皮形态漂移、基因突变特征丢失及低血清适应能力改变,与 U-87 MG、HEB 的代数要求一致,因涉及明确分子标记,代数控制更严格,需每 5 代验证基因突变状态)
- 背景简介:1979 年从右额顶枕叶胶质母细胞瘤患者中建立的神经母瘤细胞系,具明确分子特征(p53 突变、p16 及 p14ARF 肿瘤抑制基因缺失、野生型 PTEN),无正常胶质细胞的神经支持功能,低血清培养基即可稳定生长,是研究大脑神经母细胞瘤分子机制、肿瘤抑制基因功能及低血清培养条件的理想模型,可与 U-87 MG 对比探索不同脑肿瘤亚型对血清浓度的适应性差异,或与 HEB 构建 “突变肿瘤 – 正常细胞” 配对模型,评估基因突变对药物敏感性的影响。
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管,复苏后存活率≥80%(与 U-87 MG、HEB 的存活率标准一致,低血清细胞复苏后适应较慢,需 48 小时观察贴壁率(应≥85%)及上皮形态恢复情况,同步确认基因突变稳定性)
- 支原体检测:无(避免污染干扰神经母瘤增殖及基因突变检测,保障 “低血清 – 常规血清”“突变 – 无突变” 平行实验可靠性,与 U-87 MG、HEB 的检测标准统一,无肿瘤细胞分子特征叠加污染风险)
- 保藏机构:ATCC; CRL-2611(国际权威机构保藏,神经母瘤特性及基因突变状态经 ATCC 验证,与 U-87 MG 的多国际 + 国内保藏、HEB 的未明确保藏形成互补,可追溯性强,适配分子实验的细胞身份确认)
- 培养基:DMEM+5% FBS+PS(核心配方差异,5% 低血清为关键特征,区别于 U-87 MG 的 “90% DMEM+10% FBS”、HEB 的 “DMEM+10% FBS”,不可随意提高血清浓度(易导致基因突变表达异常),血清选择低内毒素批次(≤10EU/mL),开封后 2 周内用完,低血清培养基需避光储存)
- 培养条件:95% 空气 + 5% 二氧化碳,37℃,湿度 70%-80%(与 U-87 MG、HEB 培养环境参数一致,无需额外调整,低血清细胞对湿度更敏感,培养箱湿度需稳定在 75%±5%,防止培养基蒸发导致血清浓度异常,影响细胞活性)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(2×10⁶cells/mL,适配贴壁细胞密度需求,4℃平衡 30 分钟→-20℃ 3 小时→-80℃过夜→液氮储存,冻存前需在含 5% FBS 的培养基中培养 24 小时(让细胞适应血清环境),提升复苏存活率,避免直接冻存低血清培养的对数期细胞)
- 分子特征:① p53 突变(肿瘤常见驱动突变,可通过测序或 Western Blot 验证突变型蛋白表达);② p16 及 p14ARF 缺失(肿瘤抑制基因缺失,可通过 PCR 或免疫组化检测基因 / 蛋白表达缺失);③ 野生型 PTEN(磷酸酶基因,可通过测序确认无突变,区别于 U-87 MG 的未明确 PTEN 状态、HEB 的正常 PTEN),这些分子特征是研究肿瘤发生机制及靶向药物筛选的核心靶点
- 细胞货期:现货,1 周左右
- 运输方式:复苏免运费;冻存需加干冰费
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 U-87 MG、HEB 限制条款一致,不可用于神经母细胞瘤临床治疗相关实验,虽无明确体内成瘤性描述但属恶性肿瘤细胞,严禁用于人体相关干预)
- 特别说明:① 血清控制:首次培养需严格维持 5% 血清浓度,不可添加高于 5% 的血清(易诱导细胞形态纤维化及基因突变表达异常),建议使用同一批次血清以保证实验重复性;② 分子验证:每 5 代通过 Sanger 测序验证 p53 突变及 PTEN 野生型状态,通过 Western Blot 检测 p16/p14ARF 蛋白表达(确认缺失),确保分子特征稳定;③ 培养注意:低血清培养基营养有限,需每 48 小时观察培养基颜色(变黄时及时更换),避免营养耗尽导致细胞凋亡;④ 实验适配:适合脑肿瘤基因突变机制研究、低血清环境下肿瘤增殖实验、PTEN/p53 相关靶向药物(如 PI3K 抑制剂)筛选,可与 U-87 MG 同步开展 “低血清 – 常规血清” 脑肿瘤药物敏感性对比,或与 HEB 探索基因突变对正常胶质细胞功能的影响(如共培养实验)。


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