一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:MC38-GFP-puro 小鼠结肠癌细胞 (GFP 标记)
种属来源:小鼠
组织来源:结肠
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以更好维持绿色荧光蛋白(GFP)活性及结肠癌细胞生物学特性
生物安全等级:未明确标注,参考同类小鼠肿瘤细胞标准,建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度:该细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 2.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 1.0μg/ml puro 维持,保障 GFP 基因稳定表达的同时不影响细胞贴壁生长状态
背景与筛选验证
背景介绍
MC38-GFP-puro 细胞稳定表达绿色荧光蛋白(GFP,荧光信号直观易检测,可通过荧光显微镜或流式细胞仪追踪),性状稳定,可用作 GFP 活性检测的阳性对照,也适用于小鼠结肠癌体内成像实验(如皮下成瘤、肝转移或腹腔转移模型的高精准荧光追踪)。该细胞保留 MC38 细胞的核心特性 —— 典型小鼠结肠癌细胞特征,是研究结肠癌发病机制、抗肿瘤药物筛选(如抗转移药物、免疫治疗效果评估)的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、GFP 活性及结肠癌相关实验结果,保障数据准确性);
保藏机构:未明确标注,可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息,确保细胞株稳定性与小鼠结肠癌细胞属性可靠。
培养与冻存
- 培养基配方:DMEM 培养基 + 10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗)+1% NEAA(非必需氨基酸)+1% 丙酮酸钠 + 1% 谷氨酰胺 + 1% HEPES;所有添加成分均为细胞生长必需,需严格按比例配置,不可省略或替换;药筛或常规维持时,需额外添加对应浓度 puro(药筛 2.0μg/ml,维持 1.0μg/ml)。
- 培养条件:
- 气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整);
- 操作注意事项:
- 传代时用胰酶温和消化贴壁细胞,待上皮细胞样形态边缘收缩、间隙增大后,立即加培养基终止消化,避免过度消化损伤细胞;
- 定期观察细胞密度,待密度达 70%-80% 时及时传代,防止过度密集导致 GFP 活性下降或细胞凋亡;
- GFP 对光敏感,避免长时间强光直射培养瓶,减少荧光信号淬灭;
- 培养基需现配现用,或配置后短期冷藏(4℃)保存,避免添加成分活性降低。
- 冻存条件:
- 冻存液:无血清冻存液;
- 操作要点:冻存前确保细胞处于对数生长期,保留 GFP 活性与结肠癌细胞特性;胰酶消化收集细胞后,离心重悬于冻存液,调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml;梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存);复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化,离心后用含完整添加成分与 1.0μg/ml puro 的新鲜培养基重悬,避免冻存液残留对细胞的毒性影响,复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 GFP 荧光强度。
货期与运输
细胞货期:现货,1 周左右;
运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输复苏细胞时,需使用防震包装减少颠簸,降低贴壁细胞脱落概率,保障接收后细胞活性与培养基因分适应能力稳定。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;开展结肠癌相关实验时,可结合其易肝转移的特性设计肝转移模型,利用 GFP 高灵敏度特性,动态监测肿瘤生长与转移过程,精准评估药物干预效果,提升实验数据的临床相关性。


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