一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：MC38 小鼠结肠癌过表达 – OVA 转染（OVA 为卵清蛋白，细胞稳定过表达该蛋白，可用于免疫相关实验）
种属来源：小鼠
组织来源：结肠
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代，更好维持 OVA 过表达特性及结肠癌细胞生物学功能）
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、OVA 表达及实验结果，保障数据准确性）
puro 药筛浓度（特别注意）：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染 / 过表达 OVA 的细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持，保障 OVA 稳定过表达
背景与筛选验证
背景介绍
MC38 小鼠结肠癌过表达 – OVA 转染细胞，在 MC38 小鼠结肠癌细胞基础上稳定过表达卵清蛋白（OVA）。OVA 作为经典模型抗原，可被免疫系统识别，因此该细胞适用于肿瘤免疫相关实验，如肿瘤疫苗效果评估、T 细胞杀伤实验、免疫检查点抑制剂作用机制研究等，也可用于构建荷瘤小鼠的免疫相关模型，是肿瘤免疫领域的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性、OVA 过表达特性及小鼠结肠癌细胞属性可靠。
培养与冻存
培养基配方（需严格配置，保障细胞生长与 OVA 表达）
DMEM 培养基 + 10% FBS（胎牛血清） + PS（青霉素 – 链霉素双抗） + 1% NEAA（非必需氨基酸） + 1% 丙酮酸钠 + 1% 谷氨酰胺 + 1% HEPES；所有添加成分均为细胞生长必需，不可省略或替换；需药筛或维持 OVA 过表达时，额外添加对应浓度 puro（药筛 1.0μg/ml，维持 0.5μg/ml）。
培养条件
气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整，需确保培养箱温度、湿度稳定，避免环境波动影响 OVA 表达）；
操作注意事项
- 传代操作：用胰酶温和消化贴壁细胞，待上皮细胞样形态边缘收缩、间隙增大后，立即加含 0.5μg/ml puro 的培养基终止消化，避免过度消化损伤细胞；
- 密度控制：定期观察细胞密度，待密度达 70%-80% 时及时传代，防止过度密集导致细胞凋亡或 OVA 表达量下降；
- 培养基管理：培养基需现配现用，或配置后 4℃短期冷藏（不超过 3 天），避免 NEAA、谷氨酰胺等成分活性降低；
- 实验适配：用于免疫实验前，建议通过 qPCR 或 WB 再次检测 OVA 表达情况，确保抗原表达稳定，提升实验重复性。
冻存与复苏
- 冻存液：无血清冻存液；
- 冻存要点：冻存前确保细胞处于对数生长期（OVA 表达稳定），胰酶消化收集细胞后，用含 0.5μg/ml puro 的培养基清洗 1 次，再用冻存液重悬，调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存），避免降温过快损伤细胞；
- 复苏要点：从液氮取出冻存管后，立即放入 37℃水浴融化（约 1-2 分钟），1000rpm 离心 5 分钟弃冻存液，用含 0.5μg/ml puro 的新鲜培养基重悬；复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态，后续可通过 qPCR/WB 确认 OVA 过表达是否正常。
货期与发货
细胞货期：现货，1 周左右；
发货方式：复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；
运输注意事项：复苏细胞运输时用防震包装减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率；冻存发货需确保干冰量充足，维持细胞冻存状态，保障接收后细胞活性与 OVA 过表达特性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用；因涉及抗原过表达，需避免用于非免疫相关的违规实验。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展肿瘤免疫实验时，可利用其 OVA 过表达特性，构建 “抗原 – 免疫细胞” 相互作用模型（如 OVA 特异性 T 细胞与该细胞共培养），或构建荷瘤小鼠模型评估免疫治疗效果，提升实验数据的免疫相关性与临床参考价值。
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