一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：MCF-7-FLUC-eGFP-puro 人乳腺癌细胞 (FLUC/eGFP 双标）（STR 鉴定正确）
细胞别称：MCF-7-FLUC-EGFP；人乳腺癌细胞 – FLUC-EGFP；人乳腺癌细胞株 – 荧光素酶标记 – 绿色荧光蛋白
种属来源：人
组织来源：乳腺，乳房
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：未明确标注，建议优先选择低传代细胞（如 p3-p10），以更好维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及乳腺癌细胞特有的分化与激素敏感性特征
生物安全等级：1 级
特别注意：MCF-7-FLUC-EGFP 细胞贴壁较慢，处理后最好 48h 后再观察，避免过早操作影响细胞贴壁状态
背景与筛选验证
背景介绍
MCF-7-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶（FLUC）与增强型绿色荧光蛋白（eGFP），性状稳定，培养时无需抗生素常规维持。既可作为双荧光活性检测的阳性对照，也适用于人乳腺癌体内成像实验（如裸鼠成瘤、激素干预相关转移模型的双荧光追踪）。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 MCF-7 细胞具备明确生物学特征：源自 69 岁白人女性乳腺癌患者胸腔积液，保留分化乳腺上皮特性（如加工雌二醇、形成隆突结构），表达 WNT7B 癌基因；TNF-α 可抑制其生长，抗雌激素处理能调节胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）分泌，是研究激素敏感性乳腺癌发病机制、抗雌激素药物筛选的经典细胞株。
puro 药筛浓度
MCF-7-FLUC-EGFP 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障双荧光基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长、激素敏感性及乳腺癌相关生物学特性。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、双荧光表达及乳腺癌激素相关实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：ATCC; CRL-12584、ATCC; HTB-22、BCRC; 60436、BCRJ; 0162、DSMZ; ACC-115、ECACC; 86012803（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性、激素敏感性及双荧光标记可靠性）。
培养与冻存
- 培养基：89% DMEM 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+1% PS（青霉素 – 链霉素双抗）+0.01mg/ml insulin（胰岛素）+0.5ug/ml puro（常规培养直接按此浓度添加，胰岛素为细胞生长关键成分，不可省略；药筛时需将 puro 浓度调整为 1.0μg/ml）；
- 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整；避免强光直射，减少 eGFP 光漂白，保障双荧光观测效果；结合 “贴壁慢” 特性，换液、传代间隔可适当延长）；
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞处于对数生长期，保留双荧光特性与激素敏感性；可适当提高冻存密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml，减少复苏损伤；复苏后需遵循 “48h 后观察” 的要求，避免过早操作）。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率，保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展激素干预实验时，需注意培养基中胰岛素对细胞的影响，必要时调整实验设计以排除干扰。
评价
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