MDA-kb2人乳腺癌细胞（STR鉴定正确）

一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

• 细胞名称：MDA-kb2 人乳腺癌细胞（STR 鉴定正确）
  核心特色：源自 MDA-MB-453 乳腺癌细胞系（稳定转染小鼠乳腺肿瘤病毒 MMTV，含荧光素酶 – 新霉素报告基因）+ 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 + L15+10% FBS+1% 双抗培养基 + 10 代以内低代数 + STR 鉴定正确，可与 MCF-7（乳腺癌 / 贴壁 / DMEM/ER 阳性）、MDA-MB-231（乳腺癌 / 贴壁 / L15 / 三阴性）组成对比体系，用于乳腺癌报告基因实验（荧光素酶成像、药物筛选）、MMTV 调控机制研究、不同亚型乳腺癌（报告基因修饰 vs 普通型）差异及抗乳腺癌药物敏感性检测。
• 细胞别称：MDA-kb2；人乳腺癌细胞
  标注 “乳腺癌（MDA-MB-453 衍生，MMTV 报告基因）+ 贴壁上皮样 + L15 培养基 + STR 鉴定正确”，区别于 ER 阳性乳腺癌（MCF-7）、三阴性乳腺癌（MDA-MB-231），规避乳腺癌亚型及报告基因功能混淆。
• 种属来源：人（STR 鉴定正确，种属纯净无交叉污染，保障乳腺癌细胞贴壁能力、上皮形态、L15 培养基适应及报告基因表达稳定性，适配乳腺癌报告基因实验、靶向药物研究场景）
• 组织来源：乳腺（乳腺癌组织，源自 MDA-MB-453 细胞系衍生，经 MMTV 转染修饰），保留乳腺癌特有的恶性增殖特征、上皮分化属性，额外携带荧光素酶 – 新霉素报告基因（可通过荧光素酶活性监测细胞活性，新霉素抗性用于细胞筛选），核心优势为 “报告基因修饰 + 明确亲本来源 + L15 培养基适配”，适配乳腺癌活体成像、药物高通量筛选实验。
• 生长特性：贴壁生长（纯贴壁，操作需兼顾报告基因稳定性）
  0.25% 胰酶 37℃孵育 3-5 分钟消化（上皮细胞贴壁中等紧密，消化时间短于成纤维细胞），汇合度 80%-90% 时按 1:2-1:3 传代；传代后 24 小时内稳定贴壁，无需额外添加报告基因筛选压力（新霉素），但需每 5 代检测荧光素酶活性（确保报告基因不丢失），适合开展报告基因关联实验（如药物处理后荧光素酶活性定量）。
• 细胞形态：上皮细胞样（呈多边形，胞质均匀，排列紧密，具乳腺癌上皮细胞典型形态，与 MCF-7 的 “规则上皮样（ER 阳性，排列更致密）”、MDA-MB-231 的 “上皮样（略梭形，三阴性）” 形态相比，可通过 “MMTV 报告基因 + L15 培养基” 快速鉴别，适配乳腺癌形态学验证及报告基因功能关联实验）
• 背景介绍：人乳腺癌细胞系（STR 鉴定正确），源自 MDA-MB-453 乳腺癌细胞，经稳定转染小鼠乳腺肿瘤病毒（MMTV）获得，携带荧光素酶 – 新霉素融合报告基因；纯贴壁生长呈上皮细胞样，L15+10% FBS+1% 双抗培养基可稳定培养；荧光素酶基因可通过底物（如 D – 荧光素）检测活性，用于细胞增殖、药物疗效的实时监测；新霉素抗性基因可在含 G418 的培养基中筛选阳性细胞，避免杂细胞污染；无 MCF-7 的 ER 表达或 MDA-MB-231 的三阴性特征，是研究乳腺癌报告基因调控、MMTV 相关通路及药物高通量筛选的理想模型。
• STR 位点信息：Amelogenin：X；CSF1PO：10,12；D2S1338：23,24；D3S1358：15；D5S818：11；D7S820：10；D8S1179：10,12；D13S317：12；D16S539：9；D18S51：15,20；D19S433：13,14；D21S11：29,31；FGA：18,23；Penta D：9,10；Penta E：11；TH01：6；TPOX：10；vWA：17,18（可与 MDA-MB-453 亲本细胞 STR 图谱比对，确认衍生关系，排除其他乳腺癌细胞污染）
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管，复苏后存活率≥85%，24 小时贴壁率≥90%，需通过荧光素酶活性检测（相对发光值 RLU≥1×10⁴）、镜检上皮形态占比（≥85%），确认报告基因功能及细胞纯度。
• 支原体检测：无（经 PCR 法或培养法检测，确认无支原体污染，避免影响乳腺癌细胞增殖及报告基因活性实验结果）
• 培养基：L15 培养基 + 10% FBS+1% 双抗（青霉素 – 链霉素，浓度 100U/mL 青霉素 + 100μg/mL 链霉素）；不可替换为 DMEM 或 RPMI-1640（L15 培养基无需 CO₂平衡，适配该细胞呼吸代谢特性，替换后易导致细胞活力下降、报告基因表达异常）；血清选低内毒素≤10EU/mL，开封后 2 周内用完，保障细胞形态及报告基因稳定性。
• 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃，湿度 70%-80%；每 48 小时换液 1 次（沿培养瓶壁缓慢加液，避免冲击贴壁细胞）；L15 培养基对 CO₂浓度耐受性强，但需维持培养箱温度波动≤±0.5℃，防止影响报告基因调控通路。
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮（-196℃）中长期储存；冻存液需额外添加 5% FBS（提升复苏存活率），细胞浓度 2×10⁶cells/mL；梯度降温流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→转入液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟溶解，离心后用新鲜 L15 培养基重悬，复苏后 24 小时检测荧光素酶活性（确保报告基因功能正常）。
• 细胞货期：1 周左右（需提前完成报告基因活性质检，确保荧光素酶 RLU 达标后发货）
• 运输方式：复苏发货（T25 培养瓶包装，免运输费用，运输后需静置 24 小时再检测荧光素酶活性，避免运输应激影响报告基因）；冻存发货（1mL 冻存管包装，需额外支付干冰运输费用），默认顺丰快递（优先冷链运输，确保细胞及报告基因活性）。
• 供应限制：仅限于科学研究使用（包括乳腺癌报告基因实验、MMTV 通路机制、抗乳腺癌药物高通量筛选、肿瘤活体成像研究等），绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用，亦不可用于临床诊断或非科研用途。
• 特别说明：① 首次培养需核心验证：STR 分型比对（确认与标准图谱一致）、荧光素酶活性检测（RLU≥1×10⁴，可使用荧光素酶检测试剂盒）、镜检排除杂细胞（上皮形态占比≥85%）；② 报告基因实验建议：使用 D – 荧光素钾盐作为底物，检测波长 560nm，避光操作（荧光素易降解）；③ 适配乳腺癌药物筛选（如检测药物对荧光素酶活性的抑制率，反映细胞杀伤效果）、MMTV 调控的基因表达研究（如通过荧光素酶活性监测 MMTV 启动子活性）、不同亚型乳腺癌报告基因模型对比（与其他修饰报告基因的乳腺癌细胞），也可作为报告基因修饰肿瘤细胞模型，优化活体成像实验参数（如细胞接种量、成像时间）。