一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：MDA-MB-436-FLUC-puro 人乳腺癌细胞 (FLUC 标记)
细胞别称：MDA-MB-436-luc-puro; 人乳腺癌细胞 – luc; 人乳腺癌细胞 – 荧光素酶标记
种属来源：人
年龄性别：女性，43 岁
组织来源：乳腺腺癌胸水转移灶（适配乳腺癌转移相关机制研究）
生长特性：贴壁生长
细胞形态：多角形细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持荧光素酶（FLUC）表达稳定性及乳腺癌胸水转移细胞特有的生物学特征）
生物安全等级：未明确标注，参考同类人乳腺癌细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
特别注意：该细胞培养不能通入 CO₂；若无 100% 空气气相培养箱，可使用不透气密封盖的 T25 培养瓶，培养过程中每天将细胞拿出培养箱换 1-2 次空气，避免培养基 pH 异常影响细胞生长
背景与筛选验证
背景介绍
MDA-MB-436-FLUC-puro 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，可用作 FLUC 活性检测的阳性对照，也适用于人乳腺腺癌胸水转移相关实验（如体外转移能力检测、裸鼠成瘤及转移模型的荧光追踪）。
该细胞源自乳腺腺癌胸水转移灶，保留乳腺癌转移核心特性，是研究乳腺癌转移机制、抗转移药物筛选的专用细胞株。
puro 药筛浓度
该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障 FLUC 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长、多角形形态及转移相关特性。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、FLUC 活性及乳腺癌转移实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与胸水转移特性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方（关键成分不可省略）
90% L15 培养基 + 15% FBS（胎牛血清） + PS（青霉素 – 链霉素双抗） + 16μg/ml 谷胱甘肽（还原型） + 0.01mg/ml 胰岛素 + 0.5μg/ml puro
注：需使用 L15 专用培养基（可在无 CO₂环境下维持 pH 稳定），不可替换为 DMEM、RPMI-1640 等培养基；谷胱甘肽与胰岛素为细胞生长必需因子，需精准添加。
2. 培养条件
- 气相：100% 空气（严禁通入 CO₂）；温度：37℃；
- 操作注意事项：换液、传代时动作轻柔，避免损伤多角形细胞形态；严格遵循 “每日换 1-2 次空气” 的要求（若用密封盖培养瓶），每次换气时间控制在 1-2 分钟，减少环境温度波动对细胞的影响。
3. 冻存条件
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 FLUC 活性与转移特性；按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装，梯度降温后存入液氮；复苏后优先观察细胞贴壁情况、多角形形态及生长状态，且复苏后仍需遵循无 CO₂培养要求。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需使用密封包装避免 CO₂进入，保障接收后细胞可直接适应无 CO₂培养环境。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展实验时，需重点关注 “无 CO₂培养” 与 “专用 L15 培养基” 的特殊要求，同时结合其胸水转移背景，优化转移实验（如 Transwell 迁移实验）的参数设计。
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