一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：MDA-MB-453-FLUC-puro 人乳腺癌细胞 (FLUC 标记)
细胞别称：MDA-MB-453-Fluc-puro，人乳腺癌细胞 + FLUC
种属来源：人
组织来源：乳房
生长特性：混合生长（贴壁与悬浮细胞同时存在，需同步处理两种状态细胞）
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：p3-p8（极低传代范围，能最大程度维持荧光素酶（FLUC）表达稳定性及乳腺癌细胞特有的混合生长特征）
生物安全等级：1 级
特别注意：该细胞培养不能通入 CO₂；若无 100% 空气气相培养箱，可使用不透气密封盖的 T25 培养瓶，培养过程中每天将细胞拿出培养箱换 1-2 次空气，避免培养基 pH 异常
puro 药筛浓度：puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持，保障 FLUC 基因稳定表达
背景与筛选验证
背景介绍
MDA-MB-453-FLUC-puro 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，可用作 FLUC 活性检测的阳性对照，也适用于人乳腺癌体内成像实验（如裸鼠成瘤、转移模型的荧光追踪）。
该细胞保留乳腺癌细胞核心特性，且为混合生长模式，是研究乳腺癌异质性、转移机制及抗肿瘤药物筛选的专用细胞株。其保藏机构涵盖 ATCC、DSMZ 等权威机构，细胞身份与纯度有可靠保障。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、FLUC 活性及乳腺癌相关实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：ATCC; HTB-38、BCRJ; 0111、CCLV; CCLV-RIE 0960、DSMZ; ACC-299、ECACC; 91072201（多权威机构保藏，细胞株稳定性与乳腺癌属性可追溯）。
培养与冻存
1. 培养基配方（关键成分不可替换）
90% L15 基础培养基 + 10% FBS（胎牛血清） + 1% PS（青霉素 – 链霉素双抗） + 0.5μg/ml puro
注：需使用 L15 专用培养基（可在无 CO₂环境下自主维持 pH 稳定），不可替换为 DMEM、RPMI-1640 等培养基；药筛时需将 puro 浓度调整为 1.0μg/ml。
2. 培养条件与操作要点
- 气相：100% 空气（严禁通入 CO₂）；温度：37℃；
- 混合生长处理：换液或传代时，需同时收集贴壁细胞（胰酶消化）与悬浮细胞（直接收集培养基离心），确保细胞群体完整，避免单一状态细胞富集导致特性改变；
- 换气操作：若用密封盖培养瓶，每天换气 1-2 次，每次换气时间控制在 1-2 分钟，减少环境温度波动对细胞的影响。
3. 冻存条件
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前同步收集贴壁与悬浮细胞，离心后混合重悬，确保细胞密度均匀（建议 1×10⁶-2×10⁶cells/ml）；梯度降温后存入液氮；复苏后优先观察贴壁细胞贴壁情况、悬浮细胞活性及 FLUC 表达状态。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；
- 到货处理：接收复苏细胞后，需收集瓶内全部 70ml 培养基，并用 10ml PBS 润洗瓶底后收集，再以 1000rpm 离心 5 分钟，获取全部细胞（含悬浮与少量脱落贴壁细胞），避免细胞损失。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展实验时，需重点关注 “无 CO₂培养”“混合生长细胞收集” 及 “到货离心处理” 的特殊要求，结合其特性设计实验（如分离贴壁与悬浮细胞分别研究，分析乳腺癌细胞异质性）。
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