一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：MET-5A 人膜间皮细胞（与 BEAS-2B（肺支气管上皮、病毒转化）、SK-MES-1（肺鳞癌胸水转移）同属贴壁生长上皮样细胞，区别于 HFL-1（肺成纤维）、PC-9（肺腺癌），核心特色为 “皮肤来源人膜间皮细胞 + 专用培养基 + 上皮细胞样贴壁 + 10 代以内低代数”，是间皮细胞功能研究、跨器官正常细胞对比、肿瘤微环境（如胸膜间皮与肺癌相互作用）的关键模型；可与 BEAS-2B（肺正常上皮）、HFL-1（肺正常成纤维）、SK-MES-1（肺鳞癌转移）组成 “多器官正常细胞（皮肤间皮 / 肺上皮 / 肺成纤维）+ 肺癌细胞” 体系，探索不同器官正常细胞的生物学差异及间皮细胞在肺癌转移（如胸膜侵犯）中的作用，同时因专用培养基需求，适合开展间皮细胞特异性培养条件优化实验）
- 细胞别称：MeT 5A; MeT5A; Met5A; MET5A; Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A; 人膜间皮细胞（别称以 “MET-5A” 为核心，大小写、空格差异为常见书写变体，“Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A” 明确标注 “间皮细胞 + pRSV-T 转染” 属性，与 “BEAS-2B”“SK-MES-1” 等肺来源细胞前缀形成清晰区分；“人膜间皮细胞” 精准定位 “皮肤来源 + 间皮细胞类型”，避免与肺上皮细胞（BEAS-2B）、肺成纤维细胞（HFL-1）混淆，贴合 “正常间皮细胞 + 字母数字 + 细胞类型” 的命名体系）
- 性别年龄：未明确（建议实验前通过后续补充的 STR 位点 Amelogenin 基因（若检测）或 SRY 基因 PCR 验证性别，参考临床间皮细胞研究常用年龄（成人）推测为成人个体，与 BEAS-2B（成人男推测）形成 “成人不同器官正常细胞” 对照，与 SK-MES-1（65 岁男成人肿瘤）形成 “成人正常 – 老年肿瘤” 年龄对照，与 HFL-1（胎儿男正常）形成 “成人 – 胎儿正常细胞” 年龄梯度；成人来源适合模拟临床成人膜间皮的生理状态，用于跨器官正常细胞功能差异研究）
- 组织来源：皮肤；细胞类型：膜间皮细胞；推测转染背景：pRSV-T 质粒转染（明确为皮肤来源膜间皮细胞，保留间皮细胞特有的 “上皮样形态、间皮标志物表达” 特性，结合别称推测经 pRSV-T 质粒转染（可能具备永生化特征，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；区别于 BEAS-2B 的肺支气管上皮、SK-MES-1 的肺鳞癌胸水转移灶，可用于间皮细胞功能研究（如分泌间皮素）、跨器官上皮样细胞对比实验，同时为临床胸膜间皮相关疾病（如间皮瘤）研究提供正常间皮对照依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 BEAS-2B、SK-MES-1 一致，但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 专用培养基依赖”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖节奏未明确标注，结合间皮细胞常规特性及可能的永生化背景，推测倍增时间 30-40 小时（与 BEAS-2B 的 28-36 小时相近，慢于 SK-MES-1 的 50 小时），若为转染永生化细胞则无有限传代限制（区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度预计介于 BEAS-2B（肺上皮，贴壁中等）与 SK-MES-1（鳞癌转移，贴壁较强）之间，细胞呈典型上皮样铺路石样排列（间皮细胞特征，无肿瘤细胞的不规则聚集）；对数生长期需通过实验验证（建议接种后 24-72 小时监测细胞密度），传代需在细胞密度达 70%-80% 时进行，传代比例建议 1:2-1:3，传代时需使用专用培养基同步更换，避免普通培养基影响贴壁与增殖）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，含间皮细胞特有的微绒毛（电镜下可见），无肿瘤细胞特有的角质小体或黏液颗粒，核浆比小于 SK-MES-1（鳞癌），体现正常间皮与肿瘤细胞的形态差异；与 BEAS-2B（肺上皮样、支气管上皮特征）相比，无支气管上皮特异性分泌结构，与 SK-MES-1（鳞癌上皮样、含角质小体）相比，排列更规整且无肿瘤相关形态；可通过 “上皮样 + 间皮标志物（如间皮素）阳性” 快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过间皮特异性标志物（如 WT1、calretinin）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “间皮细胞特性、上皮形态、专用培养基适配性” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如间皮标志物（间皮素）表达下降、贴壁能力减弱、对专用培养基依赖度降低）
- STR 鉴定：未明确具体位点信息（建议参考随货 STR 鉴定报告或通过 PCR 检测核心 STR 位点（如 Amelogenin、CSF1PO、D13S317 等），重点关注 Amelogenin 基因以确认性别，排除细胞交叉污染（如与肺来源细胞混淆）；可将检测结果与 BEAS-2B、SK-MES-1 的 STR 图谱对比，明确 MET-5A 的独特位点，确保实验用细胞身份准确）
- 生物安全等级：1（参考同类正常细胞（BEAS-2B 为 2 级因病毒转化，MET-5A 无病毒转化信息），预计为 1 级，低于 BEAS-2B 的 2 级、HGC-27 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免细胞残留污染）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时间皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，建议复苏后 48 小时内检测存活率（预计≥85%），且上皮样形态、间皮特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%，标注 “皮肤来源膜间皮细胞，需专用培养基，建议检测间皮标志物”，提醒用户适配专用培养条件及身份验证）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞贴壁、增殖及后续实验（如间皮功能检测），保障与 BEAS-2B、SK-MES-1 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：未明确标注（建议实验前咨询供应商获取保藏机构信息（如 ATCC、ECACC 或国内权威机构），通过保藏机构数据库查询细胞详细背景（如性别年龄、转染具体信息），补充完善细胞基础信息，提升实验可追溯性与结果重复性）
- 培养基：MET-5A 人膜间皮细胞专用培养基（核心特色：①专用培养基为细胞生长关键条件，与 BEAS-2B 的 DMEM、SK-MES-1 的 DMEM 显著不同，含适配间皮细胞的营养成分（如特定生长因子、间皮细胞分化维持因子），支持其间皮特性维持及正常增殖；②需严格使用配套专用培养基，避免擅自更换为普通培养基（可能导致细胞增殖停滞、形态改变、间皮标志物表达下降）；③培养基使用前需确认无沉淀、无浑浊，按说明书添加必要补充剂（如抗生素、生长因子），确保无菌及营养充足）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 BEAS-2B、SK-MES-1 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高及营养成分浓缩；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与其他细胞培养条件兼容性高，仅需注意专用培养基的单独存放与使用，便于多细胞株并行开展 “跨器官对比” 实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配贴壁及专用培养基特性：①选择对数生长期中期细胞（密度 70%，活性最佳、间皮特性稳定），用专用培养基配制的胰酶（或说明书推荐消化液）孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（与 BEAS-2B 一致）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的专用培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 及普通培养基对细胞间皮特性的影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过专用培养基适应性培养、支原体检测及细胞形态验证（上皮样、间皮特征），确保核心培养特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，因需专用培养基，建议用户提前确认培养基供应，避免到货后延误培养）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察细胞贴壁状态，48 小时内首次换液（使用专用培养基），确保细胞适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及专用培养基适配性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 BEAS-2B、SK-MES-1 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验过程中需妥善处理含专用培养基的废液，避免环境污染）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①专用培养基管理：严格遵循说明书使用专用培养基，不可用 DMEM、RPMI-1640 等普通培养基替代；培养基需在 2-8℃避光保存，开封后 1 个月内使用完毕，避免反复冻融影响营养成分；更换培养基批次时，需先进行小体积适应性培养（如 6 孔板接种 5×10⁴cells），观察 2-3 代，确认细胞形态、增殖无异常后再批量使用；②间皮特性验证：首次培养时，建议通过免疫荧光或 Western Blot 检测间皮特异性标志物（如间皮素、WT1、calretinin），排除上皮细胞或其他细胞污染；可设置阳性对照（如人胸膜间皮细胞系）、阴性对照（如 BEAS-2B 肺上皮细胞），确保标志物检测特异性；③跨器官对比实验：搭配 BEAS-2B（肺上皮）开展实验时，可：a. 检测间皮标志物（MET-5A 高表达）与上皮标志物（如 CK18，BEAS-2B 高表达）的差异，验证细胞类型特性；b. 对比两株细胞对细胞因子（如 TGF-β）的响应差异（如增殖变化、纤维化相关基因表达），分析器官来源对细胞功能的影响；c. 与 SK-MES-1（肺鳞癌）共培养，检测 MET-5A 对肺癌细胞侵袭的影响（如 Transwell 共培养实验），探索间皮细胞在肺癌转移中的作用；④长期培养监测：每 5 代检测细胞形态（是否维持上皮样、间皮特征）、间皮标志物表达及增殖速度，若发现形态异常或标志物表达下降，需立即更换低代数种子细胞；⑤冻存复苏注意：冻存前需确保细胞处于对数生长期，复苏后 48 小时内不更换培养基，避免细胞因环境波动导致活性下降，48 小时后再用新鲜专用培养基换液，促进细胞恢复生长。
评价
目前还没有评价