一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：MG-63 人骨肉瘤细胞（与 HOS（骨肉瘤、13 岁女）、BxPC-3（胰腺原位腺癌、61 岁女）同属贴壁生长肿瘤细胞，区别于 MET-5A（皮肤间皮）、TPC-1（甲状腺乳头状癌），核心特色为 “14 岁男性白人成骨肉瘤 + 单一成纤维细胞样形态 + MEM (含 NEAA) 培养基 + TGF-β 受体 Ⅰ/Ⅱ 表达 + 干扰素诱导特性 + 28-38 小时倍增”，是青少年男性骨肉瘤机制研究、骨肉瘤细胞亚型差异（MG-63 vs HOS）、TGF-β 通路及干扰素相关功能研究的关键模型；可与 HOS（骨肉瘤 / 混合形态）、BxPC-3（胰腺癌 / 上皮样）、HFL-1（正常肺成纤维）组成 “肿瘤细胞 – 骨肉瘤亚型 / 胰腺癌 + 男性 / 女性青少年 / 老年 + 单一 / 混合形态 + 正常对照” 体系，探索青少年骨肉瘤性别差异、形态异质性的分子机制及 TGF-β/ 干扰素通路对肿瘤的调控作用，同时因明确受体及诱导功能，适合开展骨肉瘤靶向治疗（TGF-β 抑制剂）及免疫相关研究）
- 细胞别称：M-G63; MG63；人成骨肉瘤（别称以 “MG-63” 为核心，连接符、大小写差异为常见书写变体，“人成骨肉瘤” 明确标注 “骨器官 + 成骨肉瘤亚型”，与 HOS 的 “骨肉瘤” 形成 “成骨亚型 – 未明确亚型” 区分，与 BxPC-3 的 “胰腺原位腺癌” 形成器官 – 病理类型双重差异；贴合 “成骨肉瘤细胞 + 字母数字 + 病理亚型” 的命名体系，通过 “成纤维细胞样”“TGF-β 受体阳性” 标签强化与 HOS 的差异，避免与其他骨肉瘤细胞混淆，精准定位青少年男性成骨肉瘤及通路研究场景）
- 种属来源：人；种族背景：白人（明确白人种族背景，与 HOS（白人）、BxPC-3（未明确）形成 “白人 – 未明确” 种族对照，适合开展骨肉瘤种族差异与 TGF-β 受体表达、干扰素诱导能力的关联研究；细胞群体为单一成骨肉瘤细胞系，种属纯净，STR 鉴定排除交叉污染，可稳定表现白人青少年男性成骨肉瘤特有的生物学特性（如成骨分化倾向、对诱导剂敏感），无外源细胞干扰）
- 性别年龄：男；14 岁（明确的青少年男性背景，填补骨肉瘤细胞模型中 “10-15 岁青少年男性成骨肉瘤” 空白，与 HOS（13 岁女）形成 “同龄层不同性别” 骨肉瘤对照，与 BxPC-3（61 岁女）形成 “青少年男 – 老年女” 年龄性别双重梯度，与 CFPAC-1（26 岁男胰腺癌）形成 “青少年男 – 年轻男不同器官肿瘤” 对比；14 岁为成骨肉瘤青少年高发年龄，适合模拟临床青少年男性成骨肉瘤患者的肿瘤特性，开展年龄性别相关的肿瘤分化、药物敏感性及免疫调控机制研究）
- 组织来源：骨；病理亚型：成骨肉瘤（明确为骨来源成骨肉瘤，保留成骨肉瘤特有的 “成骨分化能力、骨基质合成功能”，区别于 HOS 的未明确亚型骨肉瘤、BxPC-3 的胰腺上皮起源；成骨肉瘤是骨肉瘤最常见亚型（占比 70%），该细胞系可用于成骨肉瘤癌变机制研究（如骨母细胞恶性转化）、骨肉瘤亚型差异（成骨肉瘤 vs 未明确亚型）、骨肿瘤与内脏肿瘤（胰腺癌）的分子差异对比，为临床青少年男性成骨肉瘤诊疗方案（如靶向 TGF-β 通路）提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 HOS、BxPC-3 一致，但核心特色为 “成纤维细胞样贴壁 + 干扰素诱导特性”：①增殖特性：10 代以内细胞倍增时间 28-38 小时（快于 HOS 的 30-40 小时下限、BxPC-3 的 48-60 小时），增殖速度均一（无 HOS 的形态异质性），无有限传代限制（永生化肿瘤细胞），可被聚次黄嘌呤核苷 – 聚胞嘧啶核苷酸等诱导产生高水平干扰素（HOS 无此功能）；②贴壁特性：贴壁强度低于 HOS（混合形态）、高于 BxPC-3（紧密上皮样），细胞呈梭形成纤维细胞样均匀排列（无 HOS 的上皮样细胞、BxPC-3 的聚团）；对数生长期为接种后 24-60 小时，传代需每 24 小时镜检，密度达 80% 时按 1:3-1:4 传代（高于 HOS 的 1:3），传代时常规消化（0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟，长于 BxPC-3 的 2-3 分钟），适合开展干扰素诱导、TGF-β 通路相关及快速增殖实验）
- 细胞形态：成纤维细胞样（单一形态核心特征）：细胞呈规整梭形，胞质细长，核浆比略高，排列松散均匀，类似 HFL-1 的正常成纤维细胞但增殖更快，无 HOS 的上皮样细胞、BxPC-3 的多边形上皮样形态；与 HOS 的混合形态相比，形态更均一且无上皮样成分，与 BxPC-3 的上皮样相比，呈典型间充质细胞形态；可通过 “成纤维细胞样 + 成骨肉瘤标志物（如 Runx2、骨钙素）阳性 + TGF-β 受体表达” 快速鉴别，同时与 HOS 通过形态（单一梭形 vs 混合）、与 BxPC-3 通过器官标志物（Runx2 vs CEA）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “成纤维细胞样形态、TGF-β 受体表达、干扰素诱导能力” 核心属性，建议传代次数严格控制在 10 代以内，防止长期传代导致特性漂移，如形态向上皮样转变、TGF-β 受体表达下降（低于初始代次 50%）、干扰素诱导量减少，确保细胞始终贴合青少年成骨肉瘤及通路研究需求）
- 背景简介：MG-63 细胞源自 14 岁白人男性成骨肉瘤，核心特性及应用如下：①诱导功能特色：可被聚次黄嘌呤核苷 – 聚胞嘧啶核苷酸、放线菌酮等诱导产生高水平干扰素，是研究肿瘤细胞免疫调控（如干扰素介导的抗肿瘤免疫）的理想模型；②受体表达价值：TGF-β 受体 Ⅰ/Ⅱ 双阳性，可用于探索 TGF-β 通路在成骨肉瘤增殖、分化中的作用（如通路激活对成骨分化的抑制）；③应用场景：广泛用于青少年成骨肉瘤机制、TGF-β 通路靶向治疗、干扰素相关免疫调控研究，同时可作为 “高恶性度成骨肉瘤” 对照（与 HOS 的低克隆形成率对比），分析骨肉瘤恶性程度差异机制）
- STR 位点信息：Amelogenin：X，Y（确认男性核型，与性别标注一致，区别于 HOS 的 X 核型）; CSF1PO：10，12（与 HOS 的 12 纯合子差异）；D13S317：11（纯合子，与 HOS 的 12 纯合子差异）；D16S539：11，12（与 HOS 的 10,13 差异）；D18S51：12，16（与 HOS 的 14 纯合子差异）；D19S433：13，14（与 HOS 的 13 纯合子差异）；D21S11：30（纯合子，与 HOS 的 31.2,32.2 差异）；D2S1338：17，24（与 HOS 的 24,25 差异）；D3S1358：15，20（与 HOS 的 15 纯合子差异）；D5S818：11，12（与 HOS 的 13 纯合子差异）；D7S820：10，11.1（与 HOS 的 11,12 差异）；D8S1179：13（纯合子，与 HOS 的 14 纯合子一致）；FGA：21，25（与 HOS 的 24 纯合子差异）；TH01：9.3（纯合子，与 HOS 的 6 纯合子差异）；TPOX：8，11（与 HOS 的 8,11 一致）；vWA：16，19（与 HOS 的 18 纯合子差异）；（STR 位点与 HOS、BxPC-3 图谱差异显著，含男性特有的 Y 染色体位点，可通过与 ATCC CRL-1427 数据比对，确认细胞身份及成骨肉瘤属性）
- 生物安全等级：1（与 HOS、BxPC-3 一致，低于 BEAS-2B 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级规范，因需开展干扰素诱导实验，需注意诱导剂（如放线菌酮）的毒性，操作时佩戴手套口罩；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，含诱导剂的培养基需单独灭菌，防止环境暴露）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时因成纤维细胞样形态松散，轻柔吹打即可获得单细胞悬液，计数准确性高（误差＜6%），低于 HOS 的 8%）；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，复苏后 48 小时存活率≥85%（高于 HOS 的 80%、BxPC-3 的 80%），且成纤维细胞样形态、TGF-β 受体表达无改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-75%，标注 “青少年男性成骨肉瘤，成纤维细胞样，TGF-β 受体阳性，干扰素诱导特性”，重点提醒受体表达及诱导功能）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体，结果为阴性，避免污染影响干扰素诱导效率及 TGF-β 通路实验，保障与 HOS、BxPC-3 平行实验的可靠性，尤其适合通路相关精准研究）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1427，ECACC; 86051601；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际 + 国内三机构保藏，细胞来源可追溯性强，成骨肉瘤特性、TGF-β 受体表达经过多机构验证，与 HOS 的四机构保藏、BxPC-3 的六机构保藏形成互补，便于国内外成骨肉瘤研究协作）
- 培养基：MEM (含 NEAA)+10% FBS+1% P/S（青霉素 – 链霉素）（核心特色，与 HOS 对比）：①专用配方差异：采用含非必需氨基酸（NEAA）的 MEM 培养基，区别于 HOS 的 DMEM、BxPC-3 的 1640；NEAA 可支持成纤维细胞样细胞的间充质特性维持及干扰素诱导功能，10% FBS 为常规血清浓度（与 HOS 一致），无特殊添加因子（区别于 PANC 05.04 的胰岛素）；②血清要求：FBS 需选择低内毒素、无干扰素抑制成分的批次（建议南美来源），避免影响诱导实验；③储存与使用：培养基需在 2-8℃避光保存，开封后 1 周内使用完毕（NEAA 易降解），使用前无需预热至 37℃（室温平衡即可），操作便利性高）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 HOS、BxPC-3 一致，湿度 70%-80%；因细胞对干扰素诱导剂敏感，培养箱需稳定控温（波动≤±0.5℃），避免温度变化影响诱导效率；培养环境与其他肿瘤细胞兼容，仅需注意培养基差异，便于多细胞株并行开展 “骨肉瘤亚型对比” 实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配成纤维细胞样特性）：①细胞收集：选择对数生长期细胞（密度 75%，TGF-β 受体活性最佳），0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止；②冻存浓度：1000rpm 离心 5 分钟，无血清冻存液重悬至 2.5×10⁶cells/mL（与 HOS 一致）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟，用含 NEAA 的 MEM 重悬，避免 DMSO 影响 TGF-β 受体活性）
- 倍增时间：~28-38 hours（快速增殖核心特征，适合开展短期实验（如 72 小时药物筛选、干扰素诱导动力学）；实验设计需设置 24/48/72 小时检测点，捕捉快速增殖及诱导响应过程，与 HOS 的 30-40 小时、BxPC-3 的 48-60 小时形成 “快 – 中 – 慢” 增殖梯度）
- 受体表达情况：transforming growth factor beta (TGF-beta) RI, expressed; transforming growth factor beta (TGF-beta) RII, expressed（双受体阳性）：①检测价值：TGF-β 受体双阳性可作为靶向治疗靶点（如使用 LY2109761 抑制），研究通路对成骨肉瘤增殖、分化的调控；②应用延伸：通过 Western Blot 检测受体磷酸化水平（p-TGF-β RI），分析通路活性与细胞增殖的关联，与 HOS（无受体信息）形成受体差异对比）
- 基因表达情况：interferon（干扰素可诱导表达）：①表达特征：基础状态下干扰素表达低，经诱导剂处理后表达显著升高（如聚次黄嘌呤核苷 – 聚胞嘧啶核苷酸处理 48 小时后升高 10-20 倍）；②应用场景：a. 免疫调控研究：检测诱导后干扰素下游基因（如 STAT1）表达，分析肿瘤细胞自分泌免疫调控机制；b. 药物协同实验：联合干扰素诱导剂与化疗药（如顺铂），评估协同抗肿瘤效果）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过含 NEAA 的 MEM 适应性培养、支原体检测及受体表达验证（TGF-β RI 阳性），核心特性稳定；因培养基需含 NEAA，下单后需提前 1 天准备，可与 HOS 同步下单，无需额外等待）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运费，防震包装 + 2-8℃冰袋，附带单独的 NEAA 试剂（冰袋冷藏）；到达后立即将 NEAA 加入基础 MEM 配制完整培养基，接种后 24 小时内不移动；因成纤维细胞样贴壁较弱，运输时需固定培养瓶，避免晃动）/ 冻存发货（加干冰费用，干冰用量 1.5kg，确保剩余量≥60%） 顺丰次晨达，缩短运输时间减少受体活性波动
- 供应限制：仅限于科学研究，严禁临床使用；因干扰素诱导特性，额外限制：①不可用于人体干扰素相关治疗实验；②诱导剂需按危险品规范管理；③实验数据发表需标注培养基配方及保藏信息
- 特别说明：核心建议：①干扰素诱导实验：a. 诱导条件：用含 50μg/mL 聚次黄嘌呤核苷 – 聚胞嘧啶核苷酸的培养基处理细胞 48 小时，ELISA 检测干扰素浓度（预期≥500pg/mL）；b. 对照设置：设未诱导组、诱导剂单独组，排除非特异性影响；②TGF-β 通路实验：a. 通路激活：添加 10ng/mL TGF-β1 处理 24 小时，Western Blot 检测 p-Smad2/3；b. 靶向抑制：使用 10μM LY2109761 预处理 1 小时，再加 TGF-β1，检测增殖抑制率；③骨肉瘤亚型对比：与 HOS 对比时，可：a. 检测成骨分化标志物（Runx2、骨钙素，MG-63 高表达）；b. 对比干扰素诱导能力（HOS 无显著诱导）；c. 分析药物敏感性（MG-63 对 TGF-β 抑制剂更敏感）；④长期监测：每 5 代检测受体表达、诱导能力及形态，特性异常立即更换低代数细胞；⑤培养基注意事项：不可用 DMEM 替代 MEM (含 NEAA)（替换后干扰素诱导量下降 60%），NEAA 不可省略，确保培养体系稳定。
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