细胞名称：NCI-H1299-FLUC-eGFP-puro 人非小细胞肺癌细胞 (FLUC/eGFP 双标)(STR 鉴定正确)

细胞别称：NCI-H1299-LUC-EGFP；人非小细胞肺癌细胞 – 绿色荧光蛋白 – 荧光素酶标记；NCI-H1299 – 绿色荧光蛋白 – 荧光素酶标记

种属来源：人

年龄性别：男；43 岁

组织来源：肺癌：非小细胞肺癌；转移灶：淋巴结

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及非小细胞肺癌淋巴结转移相关生物学特征）

背景介绍：NCI-H1299-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶（FLUC）与增强型绿色荧光蛋白（eGFP），性状稳定，可用作双荧光活性检测的阳性对照，也适用于非小细胞肺癌淋巴结转移相关活体动物成像实验（如转移模型构建、转移抑制药物筛选的荧光追踪）。该细胞源自非小细胞肺癌淋巴结转移灶，保留转移相关核心特性，是研究肺癌转移机制的专用细胞株。

puro 药筛浓度：NCI-H1299-LUC-EGFP 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；常规培养过程中可无需额外添加 puro，若担心抗性随传代降低，可定期用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持，避免高浓度药物影响细胞转移特性与活性。

生物安全等级：1 级，操作风险低，符合常规实验室生物安全管理要求，无需特殊防护。

细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。

支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、双荧光表达及非小细胞肺癌转移相关实验结果，保障数据准确性）。

保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株非小细胞肺癌属性、淋巴结转移特性及双荧光标记稳定性。

培养基：90% RPMI-1640 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+1% PS（青霉素 – 链霉素双抗）+1.0μg/ml puro（仅药筛阶段按此浓度添加，常规培养可省略 puro 或定期用 0.5μg/ml 维持，适配贴壁生长的非小细胞肺癌细胞营养需求）。

培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整；避免强光直射，减少 eGFP 光漂白，保障双荧光观测效果）。

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞处于对数生长期，冻存液中不添加 puro，保留双荧光特性与转移相关能力；可适当提高冻存密度，减少复苏损伤，复苏后优先观察双荧光表达情况）。

细胞货期：现货，1 周左右。

运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率。

供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主，且需注意 puro 添加的灵活性（常规培养可省略，按需定期维持）。