一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：NCI-H1703 人肺鳞癌细胞（STR 鉴定正确）（与 HFL-1（胎儿正常肺成纤维、男性）、Calu-3（25 岁肺腺癌转移、男性）同属肺来源细胞，区别于 BEAS-2B（成人正常支气管上皮）、SW620（结直肠转移），核心特色为 “54 岁男性吸烟者肺鳞癌 + 上皮细胞样 + 明确 XY 核型 + 鳞癌特异性 STR 缺失”，是吸烟相关肺鳞癌机制、肺癌病理亚型（鳞癌 vs 腺癌）差异、正常 – 肿瘤对比研究的关键模型；可与 HFL-1（正常肺成纤维）、Calu-3（肺腺癌转移）、BEAS-2B（正常支气管）组成 “肺细胞 – 正常 / 肿瘤（成纤维 / 上皮）+ 病理亚型（鳞癌 / 腺癌）+ 吸烟 / 非吸烟背景” 体系，探索吸烟诱导肺鳞癌的分子机制及不同肺癌亚型的恶性差异，同时因明确吸烟背景，可用于烟草相关致癌物（如尼古丁）的细胞实验研究）
- 细胞别称：H1703; H-1703; NCIH1703；人肺鳞癌细胞（别称以 “NCI-H1703” 为核心，“NCI” 前缀与 NCI-H 系列肺癌细胞（如 NCI-H508）形成系列关联，大小写、连接符差异为常见书写变体，“H1703” 简化名称便于实验记录检索；“人肺鳞癌细胞” 明确标注器官、病理亚型，贴合 “肺癌细胞 + 机构前缀 + 数字 + 病理亚型” 体系，避免与 HFL-1 的 “成纤维细胞”、Calu-3 的 “肺腺癌” 混淆，精准定位鳞癌亚型）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；54 岁（明确的中老年男性吸烟者背景，填补肺鳞癌细胞模型中 “吸烟相关中老年患者” 空白，与 HFL-1（胎儿男性）形成 “中老年 – 胎儿” 年龄对照，与 Calu-3（25 岁男性非吸烟）形成 “中老年吸烟 – 年轻非吸烟” 背景梯度，与 HT-29（44 岁女性非吸烟）形成 “中老年男吸烟 – 中年女非吸烟” 性别背景双重对比；54 岁为吸烟相关肺鳞癌高发年龄（吸烟史≥20 年易发病），可用于中老年男性吸烟诱导肺鳞癌机制研究，适合模拟临床吸烟相关肺鳞癌的研究场景）
- 组织来源：肺（明确为肺组织来源，推测为肺鳞癌原发灶（未提及转移），保留吸烟相关肺鳞癌特有的 “角质化倾向、吸烟相关基因突变（如 p53）、鳞癌标志物高表达” 特性；区别于 HFL-1 的正常胎儿肺、Calu-3 的肺腺癌胸水转移灶，可用于吸烟相关肺鳞癌发病机制（如烟草致癌物代谢）、肺鳞癌与腺癌的病理差异对比，同时为临床吸烟相关肺鳞癌诊断标志物（如 CK5/6）验证提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 HFL-1、Calu-3 一致，但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 鳞癌特有的增殖节奏”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖中等（倍增时间推测 30-40 小时，快于 Calu-3 的 35-45 小时，慢于 A549 的 22 小时），无有限传代限制（永生化癌细胞，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度高于 Calu-3（腺癌转移细胞）、低于 HFL-1（成纤维细胞），细胞呈紧密铺路石样排列（上皮细胞特征，区别于 HFL-1 的放射状分布）；对数生长期为接种后 24-72 小时，传代需每 24 小时镜检 1 次，待密度达 80% 时按 1:2-1:3 传代（与 Calu-3 一致），传代时需适度消化（避免过度消化破坏鳞癌特有的细胞连接），适合开展吸烟相关致癌物暴露、鳞癌化疗药敏实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列紧密呈铺路石样，胞质丰富，部分细胞含鳞癌特有的角质小体（光镜下可见），核浆比略大于 Calu-3（鳞癌恶性程度特征）；与 HFL-1（成纤维细胞样、梭形）相比，形态为典型上皮细胞特征，无放射状排列，与 Calu-3（腺癌上皮样、易成团）相比，排列更紧密且无成团现象；可通过 “上皮样 + 紧密铺路石样” 结合鳞癌标志物（如 CK5/6）快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过肺鳞癌特异性标志物（如 p63 高表达）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “吸烟相关特性、鳞癌形态、增殖节奏” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如角质小体减少、鳞癌标志物（CK5/6）表达下降、对烟草致癌物敏感性降低）
- 背景简介：NCI-H1703 细胞 1987 年建系，源自 54 岁白人男性非小细胞肺癌（鳞癌亚型）患者，且患者为吸烟者，核心特性及应用如下：①吸烟背景特色：吸烟者来源使其成为吸烟相关肺鳞癌研究的专属模型，可用于探索烟草致癌物（如苯并芘）对肺细胞的转化机制、吸烟诱导的基因突变（如 p53 热点突变）；②病理亚型特色：作为肺鳞癌细胞，与 Calu-3 的腺癌形成 “同器官不同病理亚型” 对照，可用于研究鳞癌与腺癌的分子差异（如鳞癌高表达 SOX2，腺癌高表达 TTF-1）；③应用场景：广泛用于吸烟相关肺鳞癌机制、肺癌亚型差异、鳞癌化疗药物（如顺铂）筛选研究，同时可与 HFL-1 搭配开展 “正常 – 肿瘤” 对比实验，评估吸烟对正常与肿瘤肺细胞的不同影响）
- STR 位点信息：Amelogenin：X，Y（明确男性核型，与性别年龄栏一致，无 HFL-1 的性别矛盾问题，验证细胞身份，排除交叉污染，与 HFL-1（推测 XY）、Calu-3（XX 矛盾）共同确认男性肺细胞身份）; CSF1PO：12（纯合子）；D13S317：10（纯合子，与 HFL-1 的 8 纯合子差异显著）；D16S539：10，12；D18S51：17，18（高片段等位基因，鳞癌特色位点）；D19S433：13（纯合子）；D21S11：29（纯合子）；D2S1338：19，20；D3S1358：16，17（与 Calu-3 的 15,18 差异）；D5S818：OL（等位基因缺失，鳞癌常见染色体异常）；D7S820：10，12；D8S1179：11，OL（等位基因缺失，与 D5S818 共同构成鳞癌 STR 特征）；FGA：20（纯合子）；TH01：7（纯合子）；TPOX：8，11；vWA：16，17；（STR 位点含 2 个等位基因缺失（OL）、多个纯合子，与 HFL-1 的额外 Penta 位点、Calu-3 的无缺失图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC CRL-5889 数据比对，确认细胞身份及肺鳞癌属性）
- 生物安全等级：1（与 HFL-1、Calu-3、BEAS-2B 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因是吸烟相关癌细胞，实验过程中若开展致癌物暴露实验，需在专用生物安全柜内操作，避免致癌物扩散）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时上皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（永生化癌细胞复苏活性稳定），且上皮样形态、鳞癌特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%（与 Calu-3 相近），标注 “吸烟相关肺鳞癌，建议检测鳞癌标志物”，提醒用户利用病理亚型特性开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、鳞癌标志物表达及烟草致癌物实验结果，保障与 HFL-1、Calu-3 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-5889；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际权威机构（ATCC）与国内权威机构双重保藏，细胞来源可追溯性强，吸烟相关肺鳞癌特性、上皮样形态经过严格验证，与 HFL-1 的多机构保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：89% RPMI-1640+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 RPMI-1640 培养基，与 HFL-1 的 F12K、Calu-3 的 MEM 显著不同；RPMI-1640 含适配鳞癌细胞的氨基酸配比及葡萄糖浓度，支持其增殖及鳞癌特有的角质化过程；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中激素成分干扰吸烟相关通路（如雌激素受体信号）；③1% PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞鳞癌表型及致瘤性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 HFL-1、Calu-3 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与其他肺细胞培养条件完全一致，无需特殊调整，便于多细胞株并行开展 “正常 – 肿瘤 / 不同亚型” 对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配上皮细胞特性与永生化属性：①选择对数生长期细胞（密度 80%，增殖活性最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（与 Calu-3 相近），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（与 HFL-1 一致）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对鳞癌角质化过程的影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、鳞癌标志物检测（CK5/6 阳性）及 STR 图谱验证，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 HFL-1（1 周货期）同步下单，保障 “正常 – 肿瘤” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察细胞状态，48 小时内首次换液，确保细胞快速适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及鳞癌特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 HFL-1、Calu-3 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因是吸烟相关癌细胞，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，若涉及烟草致癌物，需按有害废弃物单独处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①吸烟相关实验设计：开展烟草致癌物暴露实验时，可设置尼古丁浓度梯度（0.1-10μM），处理 48-72 小时后通过 CCK-8 法检测细胞活性，Western Blot 检测 p53（吸烟相关突变基因）、EGFR（鳞癌常见靶点）的表达，分析致癌物对细胞的影响；②病理亚型对比实验：搭配 Calu-3（肺腺癌）开展实验时，可：a. 检测鳞癌标志物（CK5/6、p63，NCI-H1703 高表达）与腺癌标志物（TTF-1、Napsin A，Calu-3 高表达）的差异，验证病理亚型特性；b. 对比两株细胞对化疗药的敏感性（如顺铂对鳞癌更敏感，培美曲塞对腺癌更敏感），计算 IC50 值，为临床亚型特异性治疗提供依据；c. 检测吸烟相关基因（如 CYP1A1，烟草致癌物代谢酶，NCI-H1703 高表达）的差异，分析吸烟背景对基因表达的影响；③正常 – 肿瘤对比实验：与 HFL-1 共培养时，可通过 Transwell 体系观察 NCI-H1703 对正常成纤维细胞的侵袭影响，同时检测 HFL-1 分泌的细胞因子（如 TGF-β1）对鳞癌细胞增殖的调控作用；④长期培养监测：每 5 代检测鳞癌标志物（CK5/6）表达、STR 图谱（重点关注 OL 缺失位点）及增殖速度，若发现标志物表达下降或 STR 异常，需立即更换低代数种子细胞；⑤培养基适配性：若实验室无 RPMI-1640 培养基，可尝试用 DMEM 培养基替代，但需提前适应性培养（传代 2 次），并检测细胞形态、CK5/6 表达，确保鳞癌特性无显著改变。
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