一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：NCI-H1975 人肺腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 NCI-H1703（肺鳞癌、54 岁吸烟男）、Calu-3（肺腺癌、25 岁非吸烟男）同属肺来源肿瘤细胞，区别于 HFL-1（正常肺成纤维）、BEAS-2B（正常支气管上皮），核心特色为 “女性非吸烟肺腺癌 + EGFR 基因检测特色 + 中等倍增 + 明确女性核型”，是女性非吸烟肺腺癌机制、EGFR 靶向治疗、肺癌性别差异研究的关键模型；可与 NCI-H1703（肺鳞癌、吸烟男）、Calu-3（肺腺癌、年轻非吸烟男）、HFL-1（正常肺成纤维）组成 “肺细胞 – 病理亚型（鳞癌 / 腺癌）+ 性别（女 / 男）+ 吸烟 / 非吸烟背景 + 正常对照” 体系，探索性别、吸烟状态对肺癌病理亚型及分子特征的影响，同时因 EGFR 基因检测信息，可作为肺癌 EGFR 靶向药物筛选的专属细胞株）
- 细胞别称：NCI-H1975; H1975; H-1975；人肺腺癌细胞（别称以 “NCI-H1975” 为核心，“NCI” 前缀与 NCI-H1703（NCI-H 系列）形成系列关联，大小写、连接符差异为常见书写变体，“H1975” 简化名称便于实验记录检索；“人肺腺癌细胞” 明确标注器官、病理亚型，贴合 “肺癌细胞 + 机构前缀 + 数字 + 病理亚型” 体系，避免与 NCI-H1703 的 “肺鳞癌”、HFL-1 的 “成纤维细胞” 混淆，精准定位腺癌亚型）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；未明确（Amelogenin：X 明确女性性别，填补肺腺癌细胞模型中 “女性非吸烟患者” 空白，与 NCI-H1703（男性吸烟）形成 “女性非吸烟 – 男性吸烟” 性别吸烟双重对照，与 Calu-3（男性非吸烟）形成 “女性 – 男性” 同吸烟状态性别对照，与 HT-29（44 岁女性非吸烟）形成 “同性别非吸烟不同器官肿瘤” 对照；年龄未标注，结合临床肺腺癌高发年龄（50 岁以上）及细胞特性，推测为中老年个体，可通过细胞衰老相关基因（如 p16）表达与 NCI-H1703（54 岁）间接对比，为女性非吸烟肺腺癌研究提供年龄参考）
- 组织来源：肺（明确为肺组织来源，推测为肺腺癌原发灶（未提及转移），保留女性非吸烟肺腺癌特有的 “EGFR 突变倾向（临床常见）、低侵袭性、腺癌标志物高表达” 特性；区别于 NCI-H1703 的肺鳞癌原发灶、Calu-3 的肺腺癌胸水转移灶，可用于女性非吸烟肺腺癌发病机制（如激素相关通路）、肺腺癌与鳞癌的病理差异对比，同时为临床女性非吸烟肺腺癌 EGFR 靶向治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 NCI-H1703、Calu-3 一致，但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 女性非吸烟腺癌特有的增殖节奏”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖中等（倍增时间 28-45 小时，与 NCI-H1703 的 30-40 小时相近，快于 Calu-3 的 35-45 小时），无有限传代限制（永生化癌细胞，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度低于 NCI-H1703（鳞癌）、高于 Calu-3（腺癌转移），细胞呈松散铺路石样排列（上皮细胞特征，区别于 HFL-1 的放射状分布）；对数生长期为接种后 24-72 小时，传代需每 24 小时镜检 1 次，待密度达 80% 时按 1:2-1:3 传代（与 NCI-H1703 一致），传代时需轻柔消化（避免过度消化影响 EGFR 蛋白表达），适合开展 EGFR 靶向药物筛选、女性非吸烟肺癌相关实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列松散呈铺路石样，胞质丰富，含肺腺癌细胞特有的分泌颗粒（光镜下可见），核浆比略小于 NCI-H1703（鳞癌），体现腺癌与鳞癌的形态差异；与 NCI-H1703（鳞癌上皮样、紧密排列）相比，排列更松散且无角质小体，与 Calu-3（腺癌上皮样、易成团）相比，无成团现象且形态更规整；可通过 “上皮样 + 松散铺路石样” 结合腺癌标志物（如 TTF-1）快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过肺腺癌特异性标志物（如 Napsin A 高表达）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “女性非吸烟特性、EGFR 基因特征、腺癌形态” 核心属性，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如 EGFR 表达异常、腺癌标志物（TTF-1）下降、增殖速度偏离 28-45 小时范围）
- 背景介绍：NCI-H1975 细胞于 1988 年 7 月建株，组织提供者为非吸烟女性，核心特性及应用如下：①性别吸烟背景特色：非吸烟女性来源使其成为女性非吸烟肺腺癌研究的专属模型，可用于探索女性非吸烟群体肺癌发病机制（如激素水平、环境因素）、性别差异对肺癌分子表型（如 EGFR 突变）的影响；②EGFR 特色：具备 EGFR 基因检测信息（临床女性非吸烟肺腺癌 EGFR 突变率高），可用于 EGFR 信号通路研究、EGFR 靶向药物（如吉非替尼）敏感性实验；③应用场景：广泛用于女性非吸烟肺腺癌机制、EGFR 靶向治疗、肺癌性别差异研究，同时可与 NCI-H1703 搭配开展 “鳞癌 / 腺癌 + 吸烟 / 非吸烟 + 男 / 女” 多维度对比实验，探索肺癌多因素影响机制）
- STR 位点信息：Amelogenin：X（明确女性核型，与性别标注一致，无性别矛盾问题，验证细胞身份，排除交叉污染，与 NCI-H1703（X,Y）、Calu-3（XX 矛盾）形成性别核型对照）; CSF1PO：12（纯合子，与 NCI-H1703 的 12 纯合子一致，体现肺肿瘤细胞 STR 共性）；D13S317：10，13（与 NCI-H1703 的 10 纯合子差异，体现腺癌与鳞癌 STR 差异）；D16S539：9，12；D18S51：13（纯合子，与 NCI-H1703 的 17,18 差异显著）；D19S433：15，15.2（罕见等位基因，腺癌特色位点）；D21S11：28（纯合子）；D2S1338：17（纯合子）；D3S1358：14，15（与 NCI-H1703 的 16,17 差异）；D5S818：11，12；D7S820：8（纯合子）；D8S1179：13（纯合子）；FGA：21，24；TH01：7（纯合子）；TPOX：8，11；vWA：18（纯合子）；（STR 位点含罕见等位基因（D19S433：15.2）、多个纯合子，与 NCI-H1703 的 OL 缺失位点、Calu-3 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC CRL-5908 数据比对，确认细胞身份及肺腺癌属性）
- EGFR 基因检测：未明确具体突变位点（建议参考随货检测报告或通过 Sanger 测序验证，临床女性非吸烟肺腺癌常见 EGFR 突变类型为 L858R 点突变或 19 外显子缺失）（核心应用价值：①靶向治疗研究：若含敏感突变（如 L858R），可作为 EGFR-TKI 类药物（吉非替尼、厄洛替尼）筛选的阳性对照；若含耐药突变（如 T790M），可用于耐药机制研究及新一代 EGFR 抑制剂（奥希替尼）筛选；②检测方法：可通过 ARMS-PCR（扩增阻滞突变系统）或数字 PCR 精准检测突变类型及突变频率，确保靶向实验的准确性）
- 生物安全等级：1（与 NCI-H1703、Calu-3、HFL-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因涉及 EGFR 靶向药物实验，需妥善处理含药物的培养基，避免环境暴露）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时上皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（永生化癌细胞复苏活性稳定），且上皮样形态、EGFR 表达特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%（与 Calu-3 相近），标注 “女性非吸烟肺腺癌，建议验证 EGFR 突变状态”，提醒用户利用性别及分子特性开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、EGFR 表达及靶向药物实验结果，保障与 NCI-H1703、Calu-3 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-5908（国际权威机构单一保藏，细胞来源可追溯性强，女性非吸烟肺腺癌特性、EGFR 基因特征经过严格验证，与 NCI-H1703 的双机构保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 DMEM 培养基，与 NCI-H1703 的 RPMI-1640、Calu-3 的 MEM 显著不同；DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配女性肺腺癌细胞的营养配比，支持其增殖及 EGFR 蛋白合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中激素成分（如雌激素）干扰女性肺癌相关通路（如 EGFR-ERK 信号）；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞腺癌表型及 EGFR 活性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 NCI-H1703、Calu-3 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与其他肺细胞培养条件完全一致，无需特殊调整，便于多细胞株并行开展 “多维度对比” 实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配上皮细胞特性与 EGFR 表达需求：①选择对数生长期细胞（密度 80%，EGFR 表达稳定），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（与 NCI-H1703 一致），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（与 NCI-H1703 一致）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对 EGFR 蛋白构象及活性的影响）
- 倍增时间：~28-45 hours（增殖速度中等，与 NCI-H1703 的 30-40 小时相近，快于 Calu-3 的 35-45 小时，对数生长期为接种后 24-72 小时，需每 24 小时镜检 1 次细胞密度，传代间隔 3-5 天；实验设计需适配中周期，如 EGFR 靶向药物处理时间建议 48-72 小时，确保药物充分作用于细胞周期）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、EGFR 表达检测（Western Blot）及 STR 图谱验证，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 NCI-H1703（1 周货期）同步下单，保障 “鳞癌 / 腺癌 + 男 / 女” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察细胞状态，48 小时内首次换液，确保细胞快速适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及 EGFR 特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 NCI-H1703、Calu-3 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，若涉及 EGFR 靶向药物，需按药物废弃物单独分类处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①EGFR 实验设计：开展靶向药物筛选时，首先通过 Sanger 测序验证 EGFR 突变类型（推荐引物：EGFR 外显子 19 正向 5′-GGAATTGAGCAGCGTGATG-3’，反向 5′-CAGATGTTTTCTTGTCTGATG-3’；外显子 21 正向 5′-GCTCACAGCAAATGAGCTGG-3’，反向 5′-TGGATGAGCTGCGTGATG-3’）；若为敏感突变，设置吉非替尼浓度梯度（0.01-10μM），处理 48 小时后用 CCK-8 法检测 IC50 值，同时检测 p-EGFR、p-ERK 表达（Western Blot），验证通路抑制效果；②性别差异实验：搭配 NCI-H1703（男性吸烟）开展实验时，可：a. 检测雌激素受体（ERα，女性细胞可能高表达）、EGFR 突变频率的差异，分析性别对肺癌分子特征的影响；b. 对比两株细胞对化疗药（顺铂）及靶向药（吉非替尼）的敏感性，男性鳞癌可能对顺铂更敏感，女性腺癌可能对吉非替尼更敏感；c. 检测吸烟相关基因（如 CYP1A1，NCI-H1703 高表达）的差异，验证吸烟背景对基因表达的影响；③长期培养监测：每 5 代检测 EGFR 表达（Western Blot）、腺癌标志物（TTF-1、Napsin A）及增殖速度，若发现 EGFR 表达下降或标志物异常，需立即更换低代数种子细胞；④培养基适配性：若实验室无 DMEM 培养基，可尝试用 DMEM/F12（1:1）培养基替代，但需提前适应性培养（传代 2 次），并检测 EGFR 表达、细胞形态，确保腺癌及分子特性无显著改变。
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