一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:NCI-H1975-FLUC-eGFP-puro 人肺腺癌细胞 (FLUC/eGFP 双标)(STR 鉴定正确)
细胞别称:NCI-H1975-FLUC-EGFP;人肺腺癌细胞 – 荧光素酶标记 – 绿色荧光蛋白;NCI-H1975 – 荧光素酶标记 – 绿色荧光蛋白
种属来源:人
年龄性别:女
组织来源:肺
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:10 代以内(低传代范围,可更好维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及人肺腺癌细胞特有的生物学特征)
生物安全等级:1 级
背景与筛选验证
背景介绍
NCI-H1975-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶(FLUC)与增强型绿色荧光蛋白(eGFP),性状稳定,培养时无需抗生素常规维持。既可作为双荧光活性检测的阳性对照,也适用于人肺腺癌体内成像实验(如裸鼠成瘤、转移模型的双荧光追踪)。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因,亲本 NCI-H1975 细胞具备明确背景:1988 年 7 月建株,组织提供者为非吸烟人士,是研究非吸烟人群肺腺癌发病机制、药物筛选的专用细胞株。
puro 药筛浓度
NCI-H1975-Fluc 细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml(原文 “1.0g/ml” 为表述误差,修正为 1.0μg/ml),用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障双荧光基因稳定表达,同时不影响细胞贴壁生长及肺腺癌细胞特性。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
- 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、双荧光表达及肺腺癌相关实验结果,保障数据准确性);
- 保藏机构:ATCC; CRL-5908(细胞来源可追溯,确保细胞株稳定性与肺腺癌特性可靠)。
培养与冻存
- 培养基:90% DMEM 培养基 + 10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗)+0.5μg/ml puro(常规培养直接按此浓度添加,适配贴壁生长的肺腺癌细胞营养需求;药筛时需将 puro 浓度调整为 1.0μg/ml);
- 培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整;避免强光直射,减少 eGFP 光漂白,保障双荧光观测效果;操作时动作轻柔,避免频繁移动影响细胞贴壁状态);
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存前确保细胞处于对数生长期,保留双荧光特性;可适当提高冻存密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml,减少复苏损伤;复苏后优先观察细胞贴壁情况与双荧光表达)。
货期与运输
- 细胞货期:现货,1 周左右;
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输过程需尽量减少颠簸,降低细胞脱落概率,保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;因细胞源自非吸烟人群,开展肺腺癌相关研究时,可结合这一背景设计实验,如重点关注非吸烟相关致癌因素的作用机制。


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