一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：NCI-H358 人非小细胞肺癌细胞（STR 鉴定正确）
核心特色：男性细支气管及肺泡癌（非小细胞肺癌亚型）+1981 年建株 + 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 + RPMI-1640+10% FBS+1% PS 培养基 + 38-60 小时倍增 + KRAS p.Thr75Ala 杂合突变 + Clara 细胞特征结构 + SP-A 阳性 / SP-B/SP-C 阴性 + 裸鼠致瘤性 + 10 代以内代数，可与 NCI-H460（男性大细胞肺癌 / RPMI-1640/23-60h 倍增 / 角蛋白阳性）、MRC-5（男胚肺成纤维 / MEM/36-96h 倍增 / 正常二倍体）组成 “细胞类型（非小细胞肺癌 – 大细胞肺癌 – 正常胚肺细胞）+ 肺癌亚型（细支气管肺泡癌 – 大细胞癌 – 无）+ 分子特征（KRAS 突变 – 无明确变异 – 正常核型）+ 功能标志物（SP-A 阳性 – 角蛋白阳性 – 无肿瘤标志物）+ 倍增差异（38-60h-23-60h-36-96h）” 对比体系，用于非小细胞肺癌机制、肺癌亚型差异、KRAS 靶向研究及肿瘤与正常肺细胞对比实验。
- 细胞别称：H358; H-358; NCIH358 ；人非小细胞肺癌细胞
标注 “男性非小细胞肺癌（细支气管肺泡癌）+KRAS 突变 + SP-A 阳性 + RPMI-1640”，区别于 NCI-H460 的 “大细胞肺癌 + 胸腔积液来源 + 角蛋白阳性”、MRC-5 的 “正常胚肺 + 二倍体 + MEM” 标识，凸显非小细胞肺癌亚型及肺泡上皮细胞属性，规避与其他肺癌亚型的功能混淆。
- 种属来源：人（STR 鉴定正确，种属纯净，保障非小细胞肺癌特有的贴壁能力、上皮形态、RPMI-1640 培养基适应能力、KRAS 突变稳定性、肺表面蛋白表达及裸鼠致瘤性稳定，与 NCI-H460、MRC-5 的种属来源一致，无细胞污染问题，适配非小细胞肺癌基础研究、KRAS 靶向药物筛选及肺癌亚型对比实验场景）
- 性别年龄：男；未明确具体年龄（填补男性细支气管肺泡癌模型空白，与 NCI-H460 的 “男性无明确年龄” 形成 “同性别不同肺癌亚型” 对比，与 MRC-5 的 “14 周龄男” 形成 “肿瘤 – 正常” 性别相同、发育阶段差异，适配男性非小细胞肺癌诊疗研究，尤其适合 KRAS 突变相关机制、肺泡上皮功能异常实验，排除性别混杂因素）
- 组织来源：肺（细支气管及肺泡，非小细胞肺癌亚型），原始来源为化疗前肿瘤组织（与 NCI-H460 的 “胸腔积液转移灶”、MRC-5 的 “正常胚肺” 形成组织来源本质差异，保留肺泡上皮细胞特有的 Clara 细胞结构及 SP-A 表达，区别于 NCI-H460 的大细胞肺癌特征或 MRC-5 的正常成纤维功能，核心优势为含 KRAS 热点突变（靶向治疗研究靶点），适配肺癌亚型特异性、肺泡微环境与肿瘤相互作用实验）
- 生长特性：贴壁生长（核心生长特性与 NCI-H460、MRC-5 一致，纯贴壁生长，操作便捷性优于半贴壁细胞）
① 倍增时间～38-60 小时（明确倍增，慢于 NCI-H460 的 23-60 小时下限，与 MRC-5 的 36-96 小时部分重叠，适配非小细胞肺癌（肺泡亚型）相对缓慢的增殖节奏，符合肺泡上皮细胞代谢特征）；② 需胰酶消化（0.25% 胰酶，37℃孵育 4-6 分钟，时间长于 NCI-H460 的 3-5 分钟、MRC-5 的 5-8 分钟），细胞汇合度达 75%-85% 时按 1:2 传代（因含 KRAS 突变但增殖速率中等，传代密度介于 NCI-H460 与 MRC-5 之间）；传代后 24-36 小时内贴壁稳定，贴壁均匀度与 NCI-H460 相当，优于 MRC-5 的成纤维细胞聚团生长，适合批量培养及药物筛选实验。
- 细胞形态：上皮细胞样（呈多边形，胞质含肺泡上皮特有的细微颗粒（SP-A 相关），排列呈 “铺路石” 样且具肺泡上皮细胞特有的松散倾向，与 NCI-H460 的 “上皮样（肺癌细胞突起）”、MRC-5 的 “成纤维样（梭形）” 形态相比，更具肺泡上皮细胞的形态特征，可通过 “SP-A 阳性 + KRAS 突变 + 肺泡来源” 快速鉴别，适配肺癌亚型形态学区分实验）
- 细胞代数：10 代以内（避免贴壁能力下降、上皮形态漂移、KRAS 突变丢失、SP-A 表达异常及致瘤性减弱，与 NCI-H460、MRC-5 的代数要求一致；因涉及靶向治疗相关突变，代数控制更严格，需每 4 代通过测序验证 KRAS p.Thr75Ala 突变状态（杂合子比例≥45%），确保分子特征稳定）
- 背景简介：1981 年从化疗前男性非小细胞肺癌（细支气管肺泡癌）患者肿瘤组织中建株，超微结构含 Clara 细胞特征结构（肺泡上皮细胞标志物），表达肺表面蛋白 SP-A（RNA 及蛋白水平），不表达 SP-B/SP-C；软琼脂克隆形成效率 0.83%（体外恶性特征），裸鼠接种可成瘤；无 NCI-H460 的胸腔转移属性或 MRC-5 的正常细胞功能，是研究非小细胞肺癌（肺泡亚型）、KRAS 突变机制、肺泡上皮功能异常及肺癌亚型差异的理想模型；可与 NCI-H460 对比探索肺癌亚型（肺泡癌 – 大细胞癌）的增殖、致瘤及药物敏感性差异，或与 MRC-5 构建 “肿瘤 – 正常” 肺细胞配对模型，评估 KRAS 靶向药物对正常肺细胞的毒性。
- STR 位点信息：Amelogenin:X,Y（确认男性核型，与性别标注一致，区别于 NCI-H460 的 “X,Y”、MRC-5 的 “X,Y”，三者性别一致可排除性别对实验的干扰）；CSF1PO:11，12；D13S317:8，12；D16S539:12，13；D18S51:14；D19S433:13，14；D21S11:28，30；D2S1338:17，23；D3S1358:14，18；D5S818:10,12；D7S820:10，11；D8S1179:13，14；FGA:20,21；TH01:6；TPOX:8，9；vWA:17（含男性非小细胞肺癌特征性 STR 位点，可与 NCI-H460、MRC-5 图谱对比确认身份，验证无其他组织来源细胞污染）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管，复苏后存活率≥85%（与 NCI-H460、MRC-5 的存活率标准一致；纯贴壁细胞复苏适应快，24 小时内贴壁率≥90%，需同步验证 SP-A 表达（免疫荧光阳性率≥85%）及 KRAS 突变状态（测序确认杂合子），确保细胞属性稳定）
- 支原体检测：无（明确排除微生物污染，与 NCI-H460 的 “无”、MRC-5 的 “无” 标准一致；因涉及 KRAS 靶向实验，微生物检测频次需高于普通细胞，建议每 2 代通过 PCR 法复测，避免污染影响突变检测及药物筛选结果）
- 保藏机构：ATCC; CRL-5807，ECACC; 95111733；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际 + 国内多机构保藏，非小细胞肺癌特性、STR 鉴定结果、KRAS 突变及致瘤性经多机构验证，与 NCI-H460 的国际保藏、MRC-5 的国际 + 国内保藏形成互补，可追溯性强，适配靶向治疗实验的细胞来源合规性要求）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+1% PS（核心配方与 NCI-H460 的 “90% RPMI-1640+10% FBS” 基础一致，明确 1% PS（青霉素 + 链霉素）浓度，区别于 MRC-5 的 “MEM+10% FBS”；血清选择低内毒素胎牛血清（≤10EU/mL），避免影响 SP-A 表达及 KRAS 突变相关信号通路，开封后 2 周内用完，RPMI-1640 培养基无需避光，可与 NCI-H460 共用基础培养基降低成本）
- 培养条件：95% 空气 + 5% 二氧化碳，37℃，湿度 70%-80%（与 NCI-H460、MRC-5 培养环境参数一致，无需额外调整；肺泡上皮来源细胞对湿度敏感，培养箱湿度需稳定在 75%±5%（防止培养基蒸发导致 SP-A 合成异常）；因倍增速率中等，每 48 小时更换 1 次培养基，无需像 NCI-H460 那样频繁镜检密度，操作便捷性介于两者之间）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（2×10⁶cells/mL，与 NCI-H460、MRC-5 的密度一致；4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮储存；冻存前需确保细胞处于对数生长期（KRAS 突变功能稳定期），添加 10% FBS 可提升复苏后 SP-A 表达及突变稳定性，避免冻存平台期细胞导致靶向药物响应异常）
- 分子与功能特征：① 基因变异：KRAS p.Thr75Ala（c.223A>G）杂合突变（可通过 Sanger 测序或数字 PCR 验证，突变频率≥45%，KRAS 靶向药物（如 Sotorasib）筛选核心靶点，区别于 NCI-H460 的无明确变异、MRC-5 的正常基因）；② 细胞结构与蛋白：含 Clara 细胞特征结构（超微镜观察可见），肺表面蛋白 SP-A 阳性（免疫荧光 / Western Blot 验证，阳性率≥85%），SP-B/SP-C 阴性（排除其他肺泡上皮细胞亚型污染），区别于 NCI-H460 的 “角蛋白 / 波形蛋白阳性”、MRC-5 的 “无特异性蛋白”；③ 致瘤性与克隆形成：裸鼠致瘤阳性（成瘤周期 18-25 天，长于 NCI-H460 的 14-21 天），软琼脂克隆形成效率 0.83%（体外恶性程度指标，低于 NCI-H460 的未明确效率，适配肺癌恶性程度亚型差异研究）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，纯贴壁细胞运输脱落风险低，无需特殊防震措施，运输后镜检确认贴壁状态及细胞形态即可）；冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 NCI-H460、MRC-5 限制条款一致；额外需强调：虽为化疗前肿瘤组织来源且含 KRAS 突变，但不可用于临床治疗或人体干预实验，动物实验需符合伦理规范，KRAS 靶向药物实验需标注突变类型以确保结果可追溯）
- 特别说明：① 突变与蛋白验证：首次培养通过 Sanger 测序确认 KRAS p.Thr75Ala 杂合突变（峰图显示 A/G 双峰），免疫荧光检测 SP-A 表达（胞质阳性率≥85%），同时验证 SP-B/SP-C 阴性，排除细胞亚型混淆；② 培养注意：RPMI-1640 培养基需含 L – 谷氨酰胺（保障 Clara 细胞结构稳定），传代时避免过度消化（防止破坏 SP-A 相关分泌颗粒，影响蛋白检测）；因倍增速率中等，传代间隔建议 4-5 天，避免过度稀疏影响 SP-A 表达；③ 实验适配：适合非小细胞肺癌（肺泡亚型）机制研究、KRAS p.Thr75Ala 突变靶向药物（如 MEK 抑制剂）筛选、肺癌亚型（肺泡癌 – 大细胞癌）差异实验、肺泡上皮功能异常研究；可与 NCI-H460 同步开展 “不同肺癌亚型对化疗药（顺铂）及靶向药（KRAS 抑制剂）的敏感性对比”，或与 MRC-5 探索 KRAS 突变对正常肺细胞功能的影响（如共培养实验），也可作为 SP-A 阳性模型用于肺表面蛋白调控机制研究。
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