一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：NCI-H441 人肺腺癌细胞（与 NCI-H3255（肺来源、高血清需求）、NCI-H1975（肺腺癌、女性非吸烟）同属肺来源肿瘤细胞，区别于 HFL-1（正常肺成纤维）、NCI-H226（肺鳞癌转移），核心特色为 “33 岁男性肺乳头状腺癌心包液转移 + SP-A 表达 + 软琼脂克隆能力 + 常规血清需求”，是年轻男性肺腺癌心包转移机制、肺表面活性物质相关肺癌研究、克隆形成实验的关键模型；可与 NCI-H3255（高血清需求）、NCI-H1975（肺腺癌、女性）、HFL-1（正常）组成 “肺细胞 – 病理亚型（腺癌）+ 性别（男 / 女）+ 血清需求（常规 / 高）+ 正常对照” 体系，探索性别、血清需求对肺腺癌细胞特性的影响及心包转移的分子机制，同时因 SP-A 表达，可用于肺腺癌肺泡上皮分化相关研究）
- 细胞别称：H441; H-441; NCI-H441-4; NCI-441; NCIH441；人肺腺癌细胞（别称以 “NCI-H441” 为核心，“NCI” 前缀与 NCI-H3255、NCI-H1975（NCI-H 系列）形成系列关联，“NCI-H441-4” 为亚型编号，大小写、连接符差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；“人肺腺癌细胞” 明确标注器官、病理亚型，贴合 “肺癌细胞 + 机构前缀 + 数字 + 病理亚型” 体系，避免与 NCI-H3255 的 “未明确亚型”、NCI-H226 的 “肺鳞癌” 混淆，精准定位肺乳头状腺癌亚型）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；33 岁（明确的年轻男性背景，填补肺腺癌细胞模型中 “30-40 岁年轻男性心包转移患者” 空白，与 NCI-H1975（女性）形成 “男性年轻 – 女性” 性别对照，与 NCI-H226（男性中老年推测）形成 “年轻男 – 中老年男” 年龄梯度，与 HT-29（44 岁女性肠癌）形成 “年轻男肺癌 – 中年女肠癌” 性别器官双重对比；33 岁为肺乳头状腺癌少见发病年龄（多发生于中老年），且为心包液转移灶，可用于年轻男性肺腺癌早发心包转移机制（如心包微环境适应）研究，适合模拟临床年轻男性肺腺癌心包转移的研究场景）
- 组织来源：肺；具体亚型：肺乳头状腺癌；转移部位：心包液（明确为肺乳头状腺癌心包液转移灶来源，保留该亚型特有的 “乳头状结构倾向、SP-A 表达、心包定植能力” 特性；区别于 NCI-H3255 的未明确转移灶、NCI-H1975 的肺腺癌原发灶，可用于肺腺癌心包转移机制（如肿瘤细胞穿透心包屏障）、肺乳头状腺癌与普通腺癌（NCI-H1975）的病理差异对比，同时为临床肺腺癌心包转移患者的诊疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 NCI-H3255、NCI-H1975 一致，核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 软琼脂克隆能力 + 常规血清需求”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖中等（结合常规血清需求及临床年轻患者细胞特性，推测倍增时间 30-40 小时，快于 NCI-H3255 的预计 35-50 小时，与 NCI-H1975 的 28-45 小时相近），无有限传代限制（永生化癌细胞，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度低于 NCI-H226（鳞癌转移）、高于 NCI-H1975（腺癌原发），细胞呈上皮样铺路石样排列，且可在无血清软琼脂中克隆（体现锚定非依赖生长能力）；对数生长期为接种后 24-72 小时，传代需每 24 小时镜检 1 次，待密度达 70%-80% 时按 1:2-1:3 传代（与 NCI-H1975 一致），传代时无需高血清，常规 10% FBS 即可维持活性，适合开展克隆形成、心包转移相关实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，含肺腺癌细胞特有的分泌颗粒（电镜下可见类似无纤毛分泌细胞颗粒），核浆比略小于 NCI-H226（鳞癌），体现腺癌与鳞癌的形态差异；与 NCI-H3255（未明确亚型、上皮样）相比，具备乳头状腺癌特有的局部聚集倾向，与 NCI-H1975（腺癌、松散排列）相比，排列更紧密且含 SP-A 相关分泌颗粒；可通过 “上皮样 + 软琼脂克隆能力” 结合 SP-A 检测快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过肺腺癌特异性标志物（如 TTF-1、SP-A）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “SP-A 表达、软琼脂克隆能力、心包转移特性” 核心属性，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如 SP-A 表达下降（Western Blot 检测低于初始代次 50%）、克隆形成率降低（软琼脂克隆数减少 30% 以上）、增殖速度异常（＜25 小时或＞45 小时））
- 背景介绍：NCI-H441 细胞于 1982 年取自 33 岁男性肺乳头状腺癌患者心包液，核心特性及应用如下：①转移与分化特色：心包液转移背景使其成为肺腺癌心包转移研究的专属模型，表达肺表面活性剂脱辅基蛋白 SP-A（mRNA 及蛋白水平），体现肺泡上皮分化特性；电镜下可见多层薄片状结构及分泌颗粒，符合无纤毛分泌细胞特征；②功能特色：可在含或不含血清软琼脂中克隆（克隆形成率预计 20%-30%），适合肿瘤干细胞相关实验；③应用场景：广泛用于年轻男性肺腺癌心包转移机制（如 CXCR4/CXCL12 心包趋化通路）、SP-A 调控肺腺癌增殖分化研究、软琼脂克隆形成实验（如药物对克隆能力的抑制），同时可与 NCI-H1975 搭配开展 “肺腺癌性别差异” 对比实验）
- STR 位点信息：Amelogenin：X,Y（明确男性核型，与性别标注一致，无性别矛盾问题，验证细胞身份，排除交叉污染，与 NCI-H1975（X）、NCI-H3255（未明确）形成性别核型对照）; CSF1PO:11,12（与 NCI-H3255 的未明确位点差异，体现肺腺癌细胞 STR 特性）；D12S391:19.3,19.3（罕见等位基因，核心鉴别位点）；D13S317:9,9（纯合子，与 NCI-H1975 的 10,13 差异显著）；D16S539:9,13；D18S51:18,19（高片段等位基因，乳头状腺癌特色）；D19S433:14,14（纯合子）；D21S11:32.2,32.2（纯合子）；D2S1338:17,19；D2S441:14,14（纯合子）；D3S1358:18,18（纯合子，与 NCI-H1975 的 14,15 差异）；D5S818:11,12（与 NCI-H1975 一致）；D6S1043:17,17（纯合子）；D7S820:10,10（纯合子）；D8S1179:8,14；FGA:24,25（高片段等位基因）；Penta D:10,12；Penta E:12,12（纯合子）；TH01:9.3,9.3（纯合子）；（STR 位点含罕见等位基因（D12S391:19.3）、多个纯合子及高片段等位基因，与 NCI-H3255、NCI-H1975 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC HTB-174 数据比对，确认细胞身份及肺乳头状腺癌属性）
- 生物安全等级：1（与 NCI-H3255、NCI-H1975、HFL-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因是心包转移细胞，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免细胞残留污染）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时上皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（中等增殖细胞复苏活性稳定），且 SP-A 表达、上皮样形态无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%（与 NCI-H1975 相近），标注 “肺乳头状腺癌心包转移，表达 SP-A，可软琼脂克隆”，提醒用户利用 SP-A 及克隆特性开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、SP-A 表达及软琼脂克隆实验结果，保障与 NCI-H3255、NCI-H1975 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; HTB-174，ATCC; CRM-HTB-174（国际权威机构双编号保藏，细胞来源可追溯性强，肺乳头状腺癌转移特性、SP-A 表达及克隆能力经过严格验证，与 NCI-H3255 的未明确保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（即 RPMI-1640 培养基，核心特色：①与 NCI-H3255 的 1640+15% FBS 相比，血清浓度降低 5%，为常规血清需求（与 NCI-H1975 一致），适配细胞正常增殖及 SP-A 表达，无需高营养补充；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中表面活性物质干扰 SP-A 检测；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞克隆能力及 SP-A 合成）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 NCI-H3255、NCI-H1975 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与其他肺肿瘤细胞培养条件兼容性高，无需特殊调整，便于多细胞株并行开展 “血清需求对比” 实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配贴壁及克隆特性：①选择对数生长期细胞（密度 80%，SP-A 表达稳定、克隆能力最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（与 NCI-H1975 一致），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（低于 NCI-H3255 的 2.5×10⁶cells/mL，因常规血清细胞冻存损失低）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 10% FBS 1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对 SP-A 合成及克隆相关蛋白（如 CD44）的影响）
- 特殊功能（SP-A 表达与克隆能力）：
-
- SP-A 表达应用：SP-A（肺表面活性剂脱辅基蛋白 A）为肺泡 Ⅱ 型上皮细胞标志物，可通过 Western Blot（一抗：anti-SP-A 抗体，货号：ab90716）或免疫荧光检测其表达，验证细胞肺泡上皮分化特性；可开展 SP-A 调控实验（如 siRNA 干扰 SP-A），检测其对细胞增殖（CCK-8）、迁移（划痕实验）的影响，探索 SP-A 在肺腺癌中的功能；
-
- 软琼脂克隆实验：配置 0.6% 底层琼脂（含 10% FBS 1640）及 0.3% 上层琼脂（含 5×10³cells/mL 细胞），接种后 37℃培养 14 天，结晶紫染色计数克隆数（直径＞50μm 为阳性克隆），可用于肿瘤干细胞筛选、药物对克隆形成的抑制实验（如设置化疗药浓度梯度，检测克隆数减少率）。
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 10% FBS 1640 培养基适应性培养、SP-A 表达检测（Western Blot 阳性）及软琼脂克隆验证（克隆率≥20%），确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 NCI-H3255（1 周货期）同步下单，保障 “血清需求对比” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察细胞贴壁状态，48 小时内首次换液（使用 10% FBS 1640 培养基），确保细胞适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及 SP-A 特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 NCI-H3255、NCI-H1975 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验过程中需妥善处理含细胞的培养基，避免环境暴露）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①SP-A 实验设计：检测 SP-A 时，需收集对数生长期细胞，提取总蛋白（RIPA 裂解液）或 RNA（Trizol 法），分别通过 Western Blot 或 RT-PCR 检测蛋白及 mRNA 水平，建议设置阳性对照（如 A549 细胞，部分表达 SP-A）及阴性对照（如 NCI-H226 细胞，不表达 SP-A）；开展 SP-A 功能实验时，siRNA 转染效率需≥70%（通过荧光标记 siRNA 验证），转染后 48 小时检测 SP-A 沉默效果；②软琼脂克隆实验注意：琼脂配置需无气泡，上层琼脂温度降至 40℃以下再加入细胞（避免高温杀伤），培养过程中每周补充 1mL 培养基（防止琼脂干裂），计数时需统一克隆直径标准（＞50μm），减少误差；③血清需求对比实验：搭配 NCI-H3255（15% FBS）开展实验时，可设置 10%、12.5%、15% FBS 三个梯度，检测细胞增殖（CCK-8）、SP-A 表达（Western Blot）的差异，分析血清浓度对肺腺癌细胞特性的影响，同时检测 m
评价
目前还没有评价