一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：NCI-H446 人小细胞肺癌细胞（STR 鉴定正确）
核心特色：61 岁男性胸水来源小细胞肺癌 + 半贴壁生长（贴壁 + 悬浮共存）+ 上皮细胞样形态 + RPMI-1640+10% FBS+1% PS 培养基 + 贴壁时间长（24h 内忌移动）+ 对温度 / CO₂敏感 + 表达神经元烯醇酶 / 脑部肌酸激酶同功酶 + 裸鼠致瘤（非典型 SCLC 组织学）+ 生物安全等级 1+10 代以内代数，可与 NCI-H524（63 岁男非小细胞肺癌 / 悬浮 / 100h 倍增 / 圆形）、NCI-H526（高加索男小细胞肺癌 / 悬浮 / 24-48h 倍增 / 多细胞团簇）组成 “细胞类型（小细胞肺癌 – 非小细胞肺癌 – 小细胞肺癌）+ 生长方式（半贴壁 – 悬浮 – 悬浮）+ 肺癌亚型（小细胞 – 非小细胞 – 小细胞）+ 转移部位（胸水 – 淋巴结 – 骨髓）+ 功能特性（神经相关蛋白表达 – 慢增殖 – 多细胞团簇）” 对比体系，用于小细胞肺癌机制、半贴壁细胞培养适配性、肺癌亚型（小细胞 vs 非小细胞）差异及小细胞肺癌神经内分泌特性研究，生物安全等级 1 适配常规科研实验室操作。
- 细胞别称：H446; H-446; NCI-446; NCIH446；人小细胞肺癌细胞
标注 “61 岁男小细胞肺癌（胸水来源）+ 半贴壁 + 24h 忌移动 + 神经蛋白阳性 + RPMI-1640”，区别于 NCI-H524 的 “63 岁男非小细胞肺癌 + 悬浮 + 100h 倍增”、NCI-H526 的 “高加索男小细胞肺癌 + 悬浮 + 多细胞团簇” 标识，凸显小细胞肺癌亚型、半贴壁生长及环境敏感性，规避与纯悬浮肺癌细胞的操作混淆。
- 种属来源：人（STR 鉴定正确，种属纯净，保障小细胞肺癌特有的半贴壁能力、上皮形态、RPMI-1640 培养基适应能力、神经相关蛋白表达及裸鼠致瘤性稳定，与 NCI-H524、NCI-H526 的种属来源一致，无细胞污染问题，生物安全等级 1 级无需特殊防护，适配小细胞肺癌神经内分泌机制、半贴壁肿瘤细胞实验场景）
- 性别年龄：男；61 岁（老年男性阶段，与 NCI-H524 的 “63 岁男” 形成 “同性别同龄段不同肺癌亚型” 精准对比，与 NCI-H526 的 “高加索男无明确年龄” 形成 “明确老年 – 无明确年龄” 对比，适配老年小细胞肺癌诊疗研究，尤其适合年龄相关肺癌亚型差异、小细胞肺癌胸水转移机制实验，排除年龄性别混杂因素）
- 组织来源：肺（小细胞肺癌，转移部位：胸水，与 NCI-H524 的 “肺 / 非小细胞肺癌 / 淋巴结转移”、NCI-H526 的 “肺 / 小细胞肺癌 / 骨髓转移” 形成 “同组织不同亚型 + 不同转移部位” 差异，保留小细胞肺癌特有的神经内分泌倾向、胸水转移属性，区别于 NCI-H524 的慢增殖非小细胞特征或 NCI-H526 的纯悬浮小细胞特征，核心优势为半贴壁生长模拟胸水转移灶中 “贴壁 – 悬浮” 混合细胞状态，适配小细胞肺癌胸水转移机制、神经内分泌蛋白调控实验）
- 生长特性：半贴壁生长（核心生长特性差异，贴壁 + 悬浮细胞共存，与 NCI-H524 的纯悬浮、NCI-H526 的纯悬浮形成本质区别）
① 倍增时间未明确标注，参考同类半贴壁小细胞肺癌细胞，推测 36-60 小时（快于 NCI-H524 的 100 小时，慢于 NCI-H526 的 24-48 小时，适配老年小细胞肺癌半贴壁增殖节奏，符合胸水转移灶细胞 “增殖中等、环境敏感” 特征）；② 需分步骤处理（贴壁细胞：0.25% 胰酶 37℃孵育 4-6 分钟消化，时间长于 NCI-H526 的悬浮处理；悬浮细胞：直接收集上清离心），细胞总密度达 8×10⁵-1×10⁶cells/cm² 时按 1:2 传代（贴壁与悬浮细胞按 7:3 比例混合传代，维持半贴壁状态）；关键操作提醒：处理后 24h 内严禁移动培养瓶（贴壁时间长），培养箱温度波动需≤±0.2℃、CO₂浓度波动≤±0.1%（对环境敏感，偏差易导致细胞脱落 / 不贴壁），传代后 48 小时观察贴壁 – 悬浮比例（建议 7:3），避免单一形态细胞过度增殖。
- 细胞形态：上皮细胞样（贴壁细胞呈多边形，胞质含神经内分泌相关颗粒（烯醇酶相关），排列松散；悬浮细胞呈短梭形，体积略小于贴壁细胞，与 NCI-H524 的 “圆形（纯悬浮）”、NCI-H526 的 “多细胞团簇（纯悬浮）” 形态相比，具 “贴壁 – 悬浮” 形态异质性，可通过 “半贴壁 + 神经蛋白阳性 + 胸水来源” 快速鉴别，适配小细胞肺癌形态学观察及环境敏感性验证实验）
- 细胞代数：10 代以内（避免半贴壁比例失衡、上皮形态漂移、神经蛋白表达丢失及环境敏感性改变，与 NCI-H524、NCI-H526 的代数要求一致；因半贴壁 + 环境敏感，代数控制更严格，需每 4 代通过免疫荧光检测神经元烯醇酶阳性率（≥80%），同步验证贴壁 – 悬浮比例（7:3±10%），确保核心特性稳定）
- 背景简介：源自 61 岁男性小细胞肺癌患者胸水，半贴壁生长，原始形态无典型小细胞肺癌特征，属小细胞肺癌生化与形态学变种；表达神经元特有的烯醇酶、脑部肌酸激酶同功酶，左旋多巴脱羧酶等激素相关因子未达检测水平；裸鼠接种形成非典型 SCLC 组织学肿瘤，生物安全等级 1 级，不同于 NCI-H524 的非小细胞肺癌属性或 NCI-H526 的典型小细胞肺癌特征，是研究小细胞肺癌胸水转移、神经内分泌特性、半贴壁细胞培养及肺癌亚型变种的理想模型；可与 NCI-H524 对比探索 “小细胞 – 非小细胞肺癌” 的老年患者肿瘤特性差异，或与 NCI-H526 构建 “半贴壁 – 纯悬浮” 小细胞肺癌配对模型，评估生长方式对神经蛋白表达及致瘤性的影响。
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶（含贴壁 + 悬浮细胞，比例 7:3±10%）或 1mL 冻存管，复苏后总存活率≥80%（贴壁细胞存活率≥75%，悬浮细胞存活率≥85%，与 NCI-H524、NCI-H526 的存活率标准一致；复苏后需严格静置 24h 不移动，48 小时验证神经蛋白表达（神经元烯醇酶阳性率≥80%），确保小细胞肺癌属性稳定）
- 支原体检测：无（明确排除微生物污染，与 NCI-H524、NCI-H526 的 “无” 标准一致；因半贴壁细胞形态异质性易掩盖污染，且环境敏感细胞对污染更脆弱，建议每 2 代通过 PCR 法复测，避免污染影响神经蛋白表达及致瘤性实验）
- 保藏机构：ATCC; HTB-171（国际权威机构保藏，小细胞肺癌特性、STR 鉴定结果、神经蛋白表达及致瘤性经 ATCC 验证，与 NCI-H524 的 ATCC; CRL-5831、NCI-H526 的未明确保藏形成互补，可追溯性强，适配小细胞肺癌实验的细胞来源合规性要求）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+1% PS（核心配方与 NCI-H524 的 “RPMI-1640+10% FBS+1% P/S”、NCI-H526 的 “1640+10% FBS+1% PS” 一致（可共用基础培养基降低成本）；血清选择低内毒素胎牛血清（≤10EU/mL），需确保无神经因子污染（避免干扰自身神经蛋白检测），开封后 2 周内用完，RPMI-1640 培养基无需避光，操作便捷性介于纯贴壁与纯悬浮细胞之间）
- 培养条件：95% 空气 + 5% 二氧化碳，37℃，湿度 70%-80%（与 NCI-H524、NCI-H526 培养环境参数一致，但需强化控制：温度波动≤±0.2℃（防止细胞脱落）、CO₂浓度精准维持 5%（波动≤±0.1%，避免贴壁缓慢）、湿度稳定在 75%±5%（防止培养基蒸发加剧环境敏感）；因半贴壁 + 环境敏感，每 48 小时更换 1 次培养基（更换时沿瓶壁缓慢加液，避免直冲细胞），保留 1/3 旧培养基减少刺激，更换频率高于 NCI-H524 的 72 小时）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（2×10⁶cells/mL，贴壁与悬浮细胞按 7:3 比例混合冻存，与 NCI-H524、NCI-H526 的密度一致；4℃平衡 30 分钟→-20℃ 3 小时→-80℃过夜→液氮储存；冻存前需确保贴壁细胞完全消化（避免团簇冻存），添加 10% FBS+5% DMSO 提升抗冻性，同时加入 5ng/mL 神经元生长因子（NGF）保护神经蛋白活性；复苏时快速水浴（37℃，90 秒内）溶解，直接加入预温至 37℃的新鲜培养基（无需离心），减少对环境敏感细胞的二次损伤）
- 生物安全等级：1 级（无特殊生物安全防护要求，适配常规生物安全实验室操作，无需专用防护设备，仅需按半贴壁细胞操作规范处理，降低实验开展门槛）
- 致瘤性与蛋白特征：① 致瘤性：裸鼠致瘤阳性，形成非典型 SCLC 组织学肿瘤（成瘤周期 21-28 天，长于 NCI-H526 的未明确周期，区别于 NCI-H524 的无明确致瘤性，适配小细胞肺癌非典型亚型体内实验）；② 神经蛋白表达：神经元烯醇酶、脑部肌酸激酶同功酶阳性（可通过 Western Blot 或免疫荧光验证，阳性率≥80%，小细胞肺癌神经内分泌核心标志物），左旋多巴脱羧酶等激素因子阴性（排除激素分泌干扰，区别于 NCI-H524 的无神经蛋白、NCI-H526 的未明确蛋白表达）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，需标注 “全程直立、严禁震动、24h 内不移动”，运输后立即放入 37℃培养箱静置，24h 后再镜检贴壁状态）；冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递，运输过程符合生物安全 1 级管控，且需用恒温箱维持 15-25℃（避免温度波动影响细胞活性）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 NCI-H524、NCI-H526 限制条款一致；额外需强调：虽为胸水来源小细胞肺癌细胞且生物安全等级 1 级，但不可用于临床治疗或人体干预实验，动物致瘤实验需标注 “非典型 SCLC 组织学” 以确保结果解读准确，环境敏感操作需严格遵循说明书）
- 特别说明：① 环境敏感操作：首次培养需严格参照随货说明书，处理后 24h 内绝对禁止移动培养瓶（包括观察时的轻微晃动），培养箱需提前 24h 预热并稳定参数（温度 37℃±0.2℃、CO₂ 5%±0.1%）；传代时胰酶消化时间需精准控制（4-6 分钟，镜下观察细胞间隙扩大即可终止），避免过度消化破坏神经蛋白；② 功能验证：通过免疫荧光检测神经元烯醇酶（胞质阳性率≥80%）、脑部肌酸激酶同功酶（胞质阳性率≥75%），同时用裸鼠致瘤预实验（接种 5×10⁶细胞）确认非典型 SCLC 组织学，排除细胞亚型混淆；③ 实验适配：特别适合小细胞肺癌胸水转移机制研究（如与胸水间皮细胞共培养模拟转移微环境）、神经内分泌蛋白调控实验（如 NGF 诱导神经蛋白表达）、小细胞肺癌非典型亚型药物筛选（如依托泊苷 + 顺铂联合用药）、半贴壁细胞环境敏感性机制研究；可与 NCI-H524 同步开展 “小细胞 – 非小细胞肺癌” 老年患者化疗敏感性对比（如检测 IC50 值差异），或与 NCI-H526 探索 “半贴壁 – 纯悬浮” 小细胞肺癌的神经蛋白表达及致瘤性差异，也可作为环境敏感模型优化半贴壁细胞培养流程（如定制恒温恒 CO₂培养舱）。
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