一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：NCI-H446-FLUC-puro 人小细胞肺癌细胞 (FLUC 标记)
细胞别称：NCI-H446-FLUC-PURO; 人小细胞肺癌细胞 – FLUC; 人小细胞肺癌细胞 – 荧光素酶标记
种属来源：人
组织来源：肺（源自小细胞肺癌患者胸水，适配肺癌转移相关研究）
生长特性：半贴壁生长（部分细胞贴壁、部分悬浮，需特殊关注培养状态）
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持荧光素酶（FLUC）表达稳定性及小细胞肺癌的生化与形态学特性）
生物安全等级：未明确标注，参考同类人肺癌细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
背景与筛选验证
背景介绍
NCI-H446-FLUC-puro 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，可用作 FLUC 活性检测的阳性对照，也适用于人小细胞肺癌体内成像实验（如裸鼠成瘤、转移模型的荧光追踪）。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 NCI-H446 细胞具备独特特征：源自小细胞肺癌患者胸水，为小细胞肺癌的生化和形态学变种；表达神经元特有的烯醇酶和脑部肌酸激酶同功酶，但左旋多巴脱羧酶、蚕素等因子未达可检测水平，是研究小细胞肺癌异质性、神经元相关标志物功能的专用细胞株。
puro 药筛浓度
- 药筛阶段：puro（嘌呤霉素）浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；
- 常规培养：可无需额外添加 puro；若担心抗性随传代降低，可定期用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持，既保障 FLUC 基因稳定，又避免长期高浓度药物对细胞半贴壁生长状态的影响。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、FLUC 活性及小细胞肺癌相关实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与小细胞肺癌属性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方
RPMI-1640 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+0.5μg/ml puro（仅定期维持或药筛时添加，常规培养可省略 puro）；适配细胞半贴壁生长需求，无需额外添加特殊因子。
2. 培养条件
- 气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）；
- 操作注意事项：因细胞为半贴壁生长，换液时需轻柔操作，避免过度冲洗导致贴壁细胞脱落；传代时需同时收集贴壁细胞（胰酶消化）与悬浮细胞，确保细胞回收率，维持细胞群体特性稳定。
3. 冻存条件
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前需同时收集贴壁与悬浮细胞，离心后重悬，确保细胞密度均匀（建议 1×10⁶-2×10⁶cells/ml）；梯度降温后存入液氮，减少复苏损伤；复苏后优先观察贴壁细胞贴壁情况与悬浮细胞活性，及 FLUC 表达状态。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需尽量减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率；接收后立即放入培养箱，24 小时内观察细胞状态。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展实验时，需结合细胞 “半贴壁生长” 与 “小细胞肺癌变种” 特性，如检测神经元相关标志物时，需同步分析贴壁与悬浮细胞的表达差异，确保实验数据全面性。
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