一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：NCI-H508 人结肠直肠腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 LS174T（直肠原发、纯贴壁、58 岁女）、LOVO（直结肠转移、纯贴壁、56 岁男）同属消化道肿瘤细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、SNU-216（胃癌），核心特色为 “结肠癌来源 + 贴壁 + 少量悬浮混合生长 + A 类使用权限”，是结直肠癌混合生长模式机制、女性结肠癌研究的特色模型；可与 LS174T（纯贴壁、直肠）、LOVO（纯贴壁、直结肠转移）、GES-1（正常）组成 “结直肠癌细胞 – 不同生长模式 / 部位 + 正常对照” 体系，探索生长模式与肿瘤恶性程度的关联，同时因 A 类使用权限，适合规范开展国内科研机构协作实验）
- 细胞别称：NCIH508； NCI-H508；H508；人结肠直肠腺癌细胞（别称以 “NCI-H508” 为核心，“NCI” 前缀（美国国家癌症研究所）与 “LS”“LOVO”“HCT” 等系列形成消化道肿瘤细胞株的清晰区分，“H508” 为简化名称，空格差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；“人结肠直肠腺癌细胞” 明确标注器官与病理亚型，贴合 “结直肠癌细胞 + 机构前缀 + 数字” 的精准命名体系，避免与其他 “NCI” 前缀细胞（如肺癌细胞 NCI-H1299）混淆）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；未明确（STR 位点 Amelogenin：X 明确女性性别，与 LS174T（58 岁女）形成 “同性别不同生长模式” 对照，与 LOVO（56 岁男）形成 “女性 – 男性” 性别对照；年龄未标注，结合临床结肠癌高发年龄（50 岁以上）及细胞特性，推测为中老年个体，可通过细胞衰老相关基因（如 p16）表达与 LS174T（已知年龄）间接对比，为女性结肠癌混合生长机制研究提供模型）
- 组织来源：结肠癌（未明确具体病理分期及是否为转移灶，推测为原发结肠直肠腺癌细胞，保留结肠癌核心生物学特征；区别于 LS174T 的直肠原发、LOVO 的直结肠转移，可用于结肠癌原发灶混合生长模式（贴壁 + 少量悬浮）机制研究（如细胞黏附分子表达差异）、结肠癌与直肠癌的生物学差异对比，同时为临床结肠癌混合生长特性肿瘤的诊断及治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁、少量悬浮（核心特色为混合生长模式，贴壁细胞占比 80%-90%，悬浮细胞呈单个或 2-3 个细胞小团状（占比 10%-20%），与 LS174T、LOVO 的纯贴壁形成显著差异；对数生长期细胞增殖节奏未明确标注，结合同类混合生长细胞特性推测为中等速度（慢于 HCT-15 的 20-25 小时，快于 CW2 的 72-96 小时）；贴壁强度低于 LS174T、高于悬浮细胞占比更高的 COLO 320DM；传代时需同时收集贴壁细胞（胰酶消化）与悬浮细胞（上清离心），悬浮细胞具备活性，适合开展细胞黏附、脱落相关转移机制研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（贴壁细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，核浆比适中；悬浮细胞呈圆形或椭圆形，胞质透亮，折光性弱于 COLO 320DM 的悬浮细胞，均具备结肠直肠腺癌细胞典型上皮形态特征；与 LS174T（纯贴壁上皮样、含粘液素液泡）相比，无粘液素液泡且含少量悬浮细胞，与 LOVO（纯贴壁上皮样、转移特性）相比，悬浮细胞比例更低；可通过 “上皮样 + 少量悬浮” 形态快速鉴别，避免与同器官纯贴壁细胞混淆，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过结直肠特异性标志物（如 CK20）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “混合生长模式、上皮样形态、女性来源特性” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如悬浮细胞比例下降至 5% 以下、贴壁能力异常增强、细胞形态向梭形转变）
- 使用权限：A 类（核心使用规范：①仅限国内科研机构基于科学研究目的申请使用，需提供单位科研资质证明及项目立项依据；②使用过程中需严格遵守中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心的使用协议，禁止二次转让、商业化使用或用于非科研用途；③实验数据发表时需标注细胞来源（中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心），并抄送相关使用报告，确保细胞使用的可追溯性；④因权限限制，建议提前 1-2 周提交申请，避免影响实验进度）
- STR 位点信息：Amelogenin：X（明确女性性别，与性别推测一致，验证细胞身份，排除交叉污染，与 LS174T（X）、CW2（X,X）共同确认女性结直肠癌细胞身份）; CSF1PO：11，12；D13S317：8，12（与 LOVO 的 8,11 形成差异，体现细胞特异性）；D16S539：12（纯合子）；D18S51：18（纯合子，独特位点）；D19S433：14；D21S11：29，32.2；D2S1338：18，19，27（三等位基因，结直肠癌细胞中少见，为核心鉴别位点）；D3S1358：14，17；D5S818：12；D7S820：8，12；D8S1179：12（纯合子）；FGA：24，25（高片段长度等位基因，区别于其他结直肠癌细胞）；TH01：9，9.3；TPOX：8，11；vWA：15，16；（STR 位点含三等位基因（D2S1338）、高片段长度等位基因（FGA）及多个纯合子，与 LS174T、LOVO 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心数据比对，确认细胞身份及结肠癌特性）
- 生物安全等级：1（与 LS174T、LOVO、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，同时结合 A 类使用权限要求，做好实验记录存档，便于实验室统一管理不同权限及安全等级的消化道细胞）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需同时统计贴壁细胞（胰酶消化后）与悬浮细胞（上清吹散后），确保总数达标；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥80%（悬浮细胞复苏存活率略低于贴壁细胞），且混合生长比例、上皮样形态无显著改变；T25 瓶发货时标注 “含少量悬浮细胞（正常）”，提醒用户收集上清细胞）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞混合生长平衡、增殖节奏及后续实验（如黏附实验），保障与 LS174T、LOVO 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国内权威机构专属保藏，细胞来源可追溯性强，混合生长特性及女性来源背景经过严格验证，与 LS174T（多国际机构保藏）的保藏体系形成互补，便于国内科研机构协作及文献结果复现，同时需遵循该机构的 A 类权限使用规范）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 RPMI-1640 培养基，与 LS174T 的 MEM（ATCC 改良）、LOVO 的 Ham’s F-12K 显著不同，与 HCT-15 的 RPMI-1640 配方一致；RPMI-1640 含丰富氨基酸及葡萄糖，适配混合生长结肠直肠癌细胞的代谢需求，支持其贴壁生长及少量悬浮细胞存活；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中黏附因子改变混合生长比例（如减少悬浮细胞）；③1% PS（青霉素 – 链霉素）终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞生长特性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致悬浮细胞团干涸；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落加剧；与 LS174T、LOVO、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需适配混合生长特性调整操作（如换液时保留部分旧培养基），便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配混合生长特性：①选择对数生长期细胞（贴壁 80%、悬浮 10%-20%），贴壁细胞用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，同时收集上清悬浮细胞，合并后轻柔吹打（避免过度单细胞化影响悬浮细胞活性）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2.5×10⁶cells/mL（高于纯贴壁细胞，补偿悬浮细胞冻存损失）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对细胞黏附能力的影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、混合生长比例验证（贴壁 80%-90%、悬浮 10%-20%）及 STR 图谱检测，确保核心特性稳定；因 A 类使用权限，下单时需同步提交科研资质证明，审核通过后 48 小时内可安排发货，可与 LS174T（1 周货期）同步申请，保障 “不同生长模式” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中使用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落及悬浮细胞团破碎；到达后立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察混合生长比例，36 小时内首次换液，换液时保留 1/4 旧培养基（含悬浮细胞生长所需因子））/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及混合生长特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 LS174T、LOVO 等细胞限制条款一致，结合 A 类使用权限，额外禁止二次转让、商业化使用及非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害，同时需按保藏机构要求提交实验使用报告）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①混合生长维护：传代时用移液管沿瓶壁缓慢吸取上清（保留底部 1mL 旧培养基），收集悬浮细胞，1000rpm 离心 5 分钟后与贴壁消化细胞合并传代；若悬浮细胞比例低于 5%，需检查培养基 pH 值（维持 7.2-7.4）及血清批次，排除环境因素导致的表型改变；换液频率建议 2 天 1 次，避免频繁换液影响悬浮细胞存活；②A 类权限合规操作：使用前需签订《A 类细胞使用协议》，实验过程中做好详细记录（如传代次数、使用量、实验目的），发表论文时需标注细胞来源及权限编号，确保合规使用；③“不同生长模式” 对比实验：搭配 LS174T（纯贴壁）开展实验时，可：a. 检测黏附相关基因（如 E-cadherin，LS174T 高表达）、EMT 相关基因（如 vimentin，本细胞高表达）的表达差异，分析生长模式与分子表型的关联；b. 对比两株细胞的 Transwell 侵袭能力（本细胞因含悬浮细胞可能穿膜数略高），验证混合生长与转移潜能的关系；c. 检测化疗药（如氟尿嘧啶）对两株细胞的 IC50 值，探索生长模式对药物敏感性的影响；④长期培养监测：每 5 代观察混合生长比例（贴壁 80%-90%、悬浮 10%-20%）、细胞形态及 STR 图谱，若发现比例异常或形态改变，需立即更换低代数种子细胞；⑤悬浮细胞应用：可单独收集悬浮细胞开展实验（如检测悬浮细胞的转移相关蛋白表达），或通过梯度离心分离贴壁与悬浮细胞，分析两部分细胞的特性差异，丰富实验研究维度。
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