一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:NCI-H524 人非小细胞肺癌细胞
核心特色:63 岁男性淋巴结转移来源非小细胞肺癌 + 1982 年建系 + 悬浮生长 + 圆形形态 + RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 双抗培养基 +~100 小时超长倍增 + 生物安全等级 1+10 代以内代数,可与 NCI-H526(高加索白人男小细胞肺癌 / 悬浮 / 24-48h 倍增 / 多细胞团簇)、NCI-H358(男非小细胞肺癌 / 贴壁 / 38-60h 倍增 / KRAS 突变)组成 “细胞类型(非小细胞肺癌 – 小细胞肺癌 – 非小细胞肺癌)+ 生长方式(悬浮 – 悬浮 – 贴壁)+ 肺癌亚型(非小细胞 – 小细胞 – 非小细胞)+ 转移部位(淋巴结 – 骨髓 – 无明确转移)+ 倍增差异(100h-24-48h-38-60h)” 对比体系,用于非小细胞肺癌机制、肺癌亚型(非小细胞 vs 小细胞)差异、悬浮肺癌细胞增殖异质性及肿瘤转移部位关联研究,生物安全等级 1 适配常规科研实验室操作。
- 细胞别称:NCI-H524;NCIH524;H524;人非小细胞肺癌细胞
标注 “63 岁男非小细胞肺癌(淋巴结转移)+ 悬浮生长 + 圆形 + 100h 倍增 + RPMI-1640 + 生物安全 1 级”,区别于 NCI-H526 的 “高加索男小细胞肺癌 + 多细胞团簇 + 24-48h 倍增”、NCI-H358 的 “男非小细胞肺癌 + 贴壁 + KRAS 突变” 标识,凸显非小细胞肺癌亚型、超长倍增特性及安全操作等级,规避与小细胞肺癌悬浮细胞的增殖节奏及安全管控混淆。
- 种属来源:人(无交叉污染风险,种属纯净,保障非小细胞肺癌特有的悬浮生长能力、圆形形态、RPMI-1640 培养基适应能力及肿瘤恶性特征稳定,与 NCI-H526、NCI-H358 的种属来源一致,无细胞污染问题,生物安全等级 1 级无需特殊防护,适配非小细胞肺癌转移机制、悬浮肿瘤细胞慢增殖特性研究场景)
- 性别年龄:男;63 岁(老年男性阶段,填补 60-65 岁老年男性非小细胞肺癌模型空白,与 NCI-H526 的 “高加索男无明确年龄” 形成 “明确老年 – 无明确年龄” 对比,与 NCI-H358 的 “男无明确年龄” 形成 “63 岁 – 无明确年龄” 同性别年龄梯度,适配老年非小细胞肺癌诊疗研究,尤其适合慢增殖型肿瘤药物干预实验,排除年龄混杂因素)
- 组织来源:肺(非小细胞肺癌,转移部位:淋巴结,与 NCI-H526 的 “肺 / 小细胞肺癌 / 骨髓转移”、NCI-H358 的 “肺 / 非小细胞肺癌 / 无明确转移” 形成 “同组织不同亚型 + 不同转移部位” 差异,保留非小细胞肺癌特有的分化倾向、低增殖活性等特征,区别于 NCI-H526 的小细胞肺癌高转移特性或 NCI-H358 的贴壁生长属性,核心优势为悬浮生长模拟淋巴结转移灶肿瘤细胞状态,适配非小细胞肺癌淋巴结转移机制、慢增殖肿瘤耐药性实验)
- 生长特性:悬浮生长(核心生长特性与 NCI-H526 一致,纯悬浮生长,与 NCI-H358 的贴壁生长形成本质区别)
① 倍增时间~100 小时(明确超长倍增,远慢于 NCI-H526 的 24-48 小时、NCI-H358 的 38-60 小时,适配老年非小细胞肺癌慢增殖节奏,符合淋巴结转移灶肿瘤细胞 “增殖缓慢、耐药性高” 的临床特征);② 无需胰酶消化(悬浮细胞通过离心收集传代),细胞密度达 3×10⁵-5×10⁵cells/mL 时按 1:2 传代(因倍增慢且无贴壁限制,传代密度低于 NCI-H526);传代后无需等待贴壁,24 小时内细胞形态恢复圆形,无需频繁摇匀(每 24 小时 1 次即可),避免过度干扰慢增殖细胞的代谢平衡,操作频率低于 NCI-H526。
- 细胞形态:圆形(核心形态差异,单个细胞呈规则圆形,无明显团簇形成(偶见 2-3 个细胞聚集),直径 15-20μm,与 NCI-H526 的 “多细胞团簇(50-150μm)”、NCI-H358 的 “上皮细胞样(多边形)” 形态完全不同,可通过 “悬浮圆形 + 100h 倍增 + 非小细胞肺癌来源” 快速鉴别,适配慢增殖悬浮肿瘤细胞形态学观察及耐药性评估实验)
- 细胞代数:10 代以内(避免悬浮能力下降、圆形形态异常、慢增殖特性丢失及肿瘤恶性属性改变,与 NCI-H526、NCI-H358 的代数要求一致;因慢增殖细胞易出现细胞老化,代数控制更严格,需每 5 代通过细胞计数验证倍增时间(偏差≤10%),确保核心生长特性稳定)
- 背景简介:1982 年源自 63 岁男性非小细胞肺癌患者的淋巴结转移灶,纯悬浮生长呈单个圆形细胞,RPMI-1640 培养基即可稳定培养,无正常细胞功能,具非小细胞肺癌典型的慢增殖、淋巴结转移特性,生物安全等级 1 级,不同于 NCI-H526 的小细胞肺癌高增殖属性或 NCI-H358 的贴壁非小细胞肺癌特征,是研究非小细胞肺癌淋巴结转移、慢增殖肿瘤耐药机制、悬浮肺癌细胞亚型差异的理想模型;可与 NCI-H526 对比探索 “非小细胞 – 小细胞肺癌” 的悬浮生长及增殖差异,或与 NCI-H358 构建 “悬浮 – 贴壁” 非小细胞肺癌配对模型,评估生长方式对化疗药(如顺铂)敏感性的影响。
- STR 位点信息:Amelogenin:X(提示检测偏差或男性位点缺失,需结合性别标注 “男” 综合判断,区别于 NCI-H526 的未明确 STR 位点、NCI-H358 的 “X,Y”);CSF1PO:12;D13S317:12;D16S539:12;D18S51:12,13;D19S433:16;D21S11:29,30;D2S1338:16,17;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:11,12;D8S1179:13,15;FGA:21,22,25;TH01:8,9.3;TPOX:8,10;vWA:14,17(含老年男性非小细胞肺癌特征性 STR 位点,可与 NCI-H526、NCI-H358 图谱对比确认身份,验证非小细胞肺癌亚型无小细胞肺癌或其他肿瘤细胞污染,保障细胞身份可靠性)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶(悬浮状态,含培养液)或 1mL 冻存管,复苏后存活率≥75%(低于 NCI-H526、NCI-H358 的 80%,适配慢增殖细胞活性特征;悬浮细胞复苏适应慢,48 小时内可恢复圆形形态,需同步验证倍增时间(偏差≤10%),确保肿瘤细胞属性稳定)
- 支原体检测:无(明确排除微生物污染,与 NCI-H526、NCI-H358 的 “无” 标准一致;因慢增殖细胞培养周期长,微生物检测频次需高于快速增殖细胞,建议每 3 代通过 PCR 法复测,避免污染长期影响细胞增殖及耐药性实验,保障实验数据准确性)
- 保藏机构:ATCC; CRL-5831(国际权威机构保藏,非小细胞肺癌特性、STR 鉴定结果及慢增殖特性经 ATCC 验证,与 NCI-H526 的未明确保藏、NCI-H358 的国际 + 国内保藏形成互补,可追溯性强,适配慢增殖肿瘤实验的细胞来源合规性要求,确保细胞质量可控)
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 双抗(核心配方与 NCI-H526 的 “1640+10% FBS+1% PS”、NCI-H358 的 “10% 血清 1640” 一致(可共用基础培养基降低成本);血清选择低内毒素胎牛血清(≤10EU/mL),需确保血清无促增殖成分(避免改变慢增殖特性),开封后 2 周内用完,RPMI-1640 培养基无需避光,操作便捷,适配常规实验室培养流程)
- 培养条件:95% 空气 + 5% 二氧化碳,37℃,湿度 70%-80%(与 NCI-H526、NCI-H358 培养环境参数一致,无需额外调整;慢增殖细胞对营养消耗慢,每 72 小时更换 1 次培养基(离心收集细胞后重悬于新鲜培养基),更换频率低于 NCI-H526 的 48 小时;培养瓶保留 1/3 空间确保气体流通,无需像 NCI-H526 那样频繁摇匀,降低操作复杂度)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(2×10⁶cells/mL,低于 NCI-H526 的 3×10⁶cells/mL;4℃平衡 30 分钟→-20℃ 4 小时→-80℃过夜→液氮储存;冻存前需确保细胞处于对数生长期(慢增殖细胞对数期持续 7-10 天),添加 10% FBS+5% DMSO 提升复苏后活性,避免冻存老化细胞导致存活率进一步下降;复苏时快速水浴(37℃,1 分钟内)溶解,离心(800rpm,5 分钟)后用新鲜培养基重悬,减少冻存液对慢增殖细胞的毒性,保障复苏后细胞功能稳定)
- 生物安全等级:1 级(无特殊生物安全防护要求,适配常规生物安全实验室操作,无需像高等级安全细胞那样设置专用防护设备,降低实验开展门槛,可在多数科研实验室常规使用)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,悬浮细胞需标注 “直立放置、避免剧烈摇晃”,运输后需静置 24 小时再观察细胞状态,避免频繁移动影响慢增殖细胞恢复);冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递,运输过程符合生物安全 1 级细胞管控要求,确保运输安全合规)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 NCI-H526、NCI-H358 限制条款一致;额外需强调:虽为淋巴结转移来源非小细胞肺癌细胞且生物安全等级 1 级,但不可用于临床治疗或人体干预实验,动物实验需符合伦理规范,慢增殖细胞耐药性实验需延长观察周期(建议 72-96 小时)以确保结果可靠,避免因观察时间不足导致数据偏差)
- 特别说明:① 悬浮操作注意:传代时用无菌吸管轻柔吹打(避免产生气泡损伤细胞),离心转速控制在 800rpm(5 分钟),低于 NCI-H526 的 1000rpm,防止离心力过大破坏慢增殖细胞;培养过程中避免频繁取样计数,减少对细胞的干扰,建议每 72 小时计数 1 次,且取样量不超过总培养体积的 1/10,避免影响细胞群体稳定性;② 形态与功能验证:首次培养需严格参照随货产品说明书操作,通过显微镜观察细胞形态(圆形占比≥90%,无明显团簇),通过 CCK-8 实验验证倍增时间(~100 小时,偏差≤10%),确认非小细胞肺癌慢增殖属性,若发现形态或增殖异常,需及时对照说明书排查操作问题;③ 实验适配:特别适合非小细胞肺癌淋巴结转移机制研究(如与淋巴结成纤维细胞共培养模拟转移微环境)、慢增殖肿瘤耐药性实验(如顺铂、培美曲塞长期低浓度暴露筛选耐药株)、肺癌亚型(非小细胞 vs 小细胞)悬浮生长对比(如 Transwell 实验评估转移能力差异)、老年肺癌药物敏感性研究(如针对老年患者的低剂量药物效果验证);可与 NCI-H526 同步开展 “非小细胞 – 小细胞肺癌” 对化疗药(依托泊苷 vs 顺铂)的敏感性差异对比,或与 NCI-H358 探索 “悬浮 – 贴壁” 非小细胞肺癌的代谢及耐药基因(如 ABCB1)表达差异,也可作为慢增殖悬浮模型优化肿瘤耐药性检测方法(如延长药物作用时间至 72-96 小时,更贴合临床慢增殖肿瘤治疗周期)。


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