一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:NCI-H660-NLUC-puro 人神经内分泌前列腺癌细胞 (NLUC 标记)
种属来源:人
组织来源:前列腺
生长特性:混合生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以更好维持纳米荧光素酶(NLUC)活性及神经内分泌前列腺癌细胞的成团生长特性
生物安全等级:未明确标注,参考同类人前列腺癌细胞标准,建议按 1 级生物安全防护操作
特别注意:该细胞成团生长,如团块过大,需及时吹散,避免影响细胞营养吸收与 NLUC 活性稳定性
puro 药筛浓度:该细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持,保障 NLUC 基因稳定表达
背景与筛选验证
背景介绍
NCI-H660-NLUC-puro 细胞稳定表达纳米荧光素酶(NLUC,具有荧光信号强、背景噪声低的优势),性状稳定,可用作 NLUC 活性检测的阳性对照,也适用于人神经内分泌前列腺癌体内成像实验(如裸鼠成瘤、转移模型的高灵敏度荧光追踪)。
该细胞保留神经内分泌前列腺癌细胞的核心特性,结合混合生长与成团生长模式,是研究该类前列腺癌发病机制、抗肿瘤药物筛选(尤其是靶向神经内分泌标志物的药物)的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
- 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、NLUC 活性及前列腺癌相关实验结果,保障数据准确性);
- 保藏机构:未明确标注,可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息,确保细胞株稳定性与神经内分泌前列腺癌属性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方(关键成分不可省略)
90% RPMI-1640 培养基(简称 “1640”)+10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗)+10nMβ- 雌二醇 + 10nM 氢化可的松 + 1*TS(胰岛素转铁蛋白硒);
注:β- 雌二醇、氢化可的松、TS 为细胞生长必需的特殊添加因子,直接影响细胞成团生长状态与 NLUC 表达,不可省略;药筛或维持培养时,需额外添加对应浓度 puro(药筛 1.0μg/ml,维持 0.5μg/ml)。
2. 培养条件与操作要点
- 气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整);
- 成团处理:每天观察细胞团块大小,当团块直径超过 100μm 时,用移液器轻柔吹散(避免过度吹打损伤细胞),维持细胞分散度;
- 荧光保护:NLUC 对光稳定性较好,但仍建议避免长时间强光直射培养瓶,减少潜在的荧光信号损耗。
3. 冻存条件
- 冻存液:无血清冻存液;
- 操作要点:冻存前需将细胞团块适当吹散,确保细胞分散均匀;按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装,梯度降温后存入液氮;复苏后优先观察细胞贴壁情况、成团生长状态及 NLUC 活性,确认细胞功能正常。
货期与发货
- 细胞货期:现货,1 周左右;
- 发货方式:复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输复苏细胞时,需使用防震包装减少颠簸,降低细胞团块脱落概率,保障接收后细胞可快速适应培养环境。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;开展实验时,需重点关注培养基特殊因子的精准配置与 “及时吹散细胞团块” 的操作要求,利用 NLUC 的高灵敏度特性,可实现对体内微小肿瘤病灶或早期转移的动态监测,提升实验数据的精准度。


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