一、细胞基本属性
- 细胞名称：NCI-N87 人胃癌细胞（STR 鉴定正确）（与 MKN-45（老年女印戒细胞癌）、MGC-803（中年男低分化腺癌）同属胃来源肿瘤细胞，但为男性来源且具备独特分子表型（表达 CEA/TAG72、缺乏胃泌激素受体），区别于 MKN 系列的女性印戒细胞癌、MGC-803 的低分化腺癌，是胃癌性别差异机制、受体靶向治疗研究的专属模型；可与 GES-1（正常胃黏膜）、MKN-45（女性印戒癌）、MGC-803（男性低分化腺癌）组成 “正常 – 不同性别 / 亚型胃癌” 对照体系，探索胃癌性别特异性发病机制及药物响应差异，同时与具备瘤球形成能力的 HGC-27 构建 “不同亚型 3D 模型” 对比体系）
- 细胞别称：N87；NCIN87；NCI-N87；人胃癌细胞（别称含 “NCI-” 前缀，明确标识由美国国家癌症研究所（NCI）建系，与 MKN-45（“MKN” 前缀）、MGC-803（“MGC” 前缀）形成胃癌细胞株的清晰区分；“N87” 简洁易记，便于实验记录及文献检索，贴合 “研究机构 + 编号” 的精准命名体系，同时 “人胃癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，避免与其他 “NCI-” 前缀细胞（如肺癌 NCI-H1299）混淆）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；未明确（明确男性性别，填补胃癌细胞模型中男性来源的多样化空白，与 MKN-45（62 岁女）、MKN-1（35 岁女）形成 “男性 – 女性” 性别对照，与 MGC-803（53 岁男）形成 “同性别不同亚型” 对照，为胃癌性别差异研究（如男性高发机制、激素相关信号通路差异）提供关键模型；年龄未标注，可通过细胞生长特性、基因表达与 MGC-803（已知年龄）间接对比，或结合临床男性胃癌高发年龄（50 岁以上）推测为中老年个体，确保实验设计的年龄关联性）
- 组织来源：胃（未明确具体病理亚型及转移状态，推测为原发胃癌组织，保留胃癌核心生物学特征，同时因独特分子表型（缺乏胃泌激素受体、表达蕈毒碱胆碱受体），可用于胃癌受体相关机制研究（如受体缺失对细胞增殖的影响）；区别于 MKN-45 的淋巴结转移灶、MGC-803 的原发低分化腺癌，可用于胃癌原发灶分子表型多样性研究，同时为临床受体阴性胃癌患者的治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏缓慢（贴合 48-80 小时长倍增时间特性），贴壁强度高于 MKN-45（混合生长）、低于 MGC-803（低分化腺癌）；细胞间连接紧密，呈单层均匀分布，无悬浮细胞或成簇生长现象（区别于 MKN-45 的混合生长），传代操作可参考常规贴壁细胞流程，但需适配长倍增时间调整传代间隔，适合开展长周期药物处理、受体信号通路研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富且可见空泡（培养过程中正常现象），核浆比适中，具备胃癌上皮细胞典型形态特征；与 MKN-45（印戒样形态、含粘液空泡）相比，空泡非粘液性且核无偏位，与 MGC-803（局部腺管样结构）相比，无明显分化结构；可通过 “胞质空泡 + 规整上皮形态” 快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “独特分子表型（CEA/TAG72 表达、受体缺失）、长倍增时间、瘤球形成能力” 核心特征，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如空泡消失、CEA 表达下降、倍增时间缩短）
- 特别说明（培养特性）：该细胞培养过程中会长空泡，属于正常现象（核心鉴别特征，空泡多分布于胞质中，直径 2-5μm，无毒性且不影响细胞活性；需与支原体污染导致的空泡（多伴随细胞形态异常、生长停滞）区分，可通过支原体检测（结果为无）及细胞活性检测（如台盼蓝染色活率≥90%）验证；空泡数量随培养时间增加，传代后会暂时减少，无需特殊处理，避免因误判空泡为异常而频繁换液或丢弃细胞）
- 背景介绍：NCI-N87 细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原 (CEA) 和 TAG 72，无左旋多巴胺脱羧酶 (DDC) 活性，核心特性及应用如下：①分子表型特色：作为胃癌中 “CEA+、TAG72+、胃泌激素受体 -” 的代表性模型，可用于胃癌标志物（CEA/TAG72）相关研究（如标志物分泌机制、临床诊断靶点验证），同时缺乏胃泌激素受体、VIP 受体活性极低的特性，适合开展受体阴性胃癌的替代治疗策略研究（如靶向蕈毒碱胆碱受体）；②基因与增殖特性：无 N-myc、L-myc 等基因重组，c-myc 和 c-erb-B2 RNA 表达水平适中，可用于胃癌基因表达调控研究；4.3% 的植板率（克隆形成能力）较低，适合评估药物对细胞长期增殖的抑制效果；③应用场景：广泛用于胃癌分子机制研究（如受体信号通路、标志物调控）、靶向药物筛选（如抗 CEA 抗体药物偶联物）、3D 瘤球模型构建（模拟体内肿瘤异质性），同时可与 MKN-45（女性）、MGC-803（男性）搭配开展 “性别 – 亚型” 对比实验，验证药物对不同性别胃癌的特异性效果。
- STR 位点信息：Amelogenin：X，Y（明确男性性别，与性别标注一致，可通过该位点验证细胞身份，排除交叉污染，与 MGC-803（推测男性）的性别特征互补，强化 “男性胃癌细胞” 的身份标识）; CSF1PO：8,12；D13S317：8,11；D16S539：9，13；D18S51：17；D19S433：14,14.2；D21S11：30；D2S1338：23，24；D3S1358：14；D5S818：12,13；D7S820：10,11；D8S1179：14；FGA：20,21；TH01：9；TPOX：9,11；vWA：15，16；（STR 位点含特异性杂合子（如 D2S1338：23,24、vWA：15,16），与 MKN-45（含等位基因缺失）、MGC-803（多纯合子）的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与保藏机构（ATCC CRL-5822）数据比对，确认细胞身份及分子表型）
- 生物安全等级：1（低于 MKN-45（未明确，推测等级 1）、HGC-27（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，便于实验室统一管理不同安全等级的胃癌细胞株，降低实验操作门槛）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥80%（因长倍增时间，复苏后需 72 小时才能完全恢复形态），且胞质空泡、CEA/TAG72 表达特性无显著改变；T25 瓶发货时标注 “含胞质空泡（正常）”，提醒用户无需特殊处理）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染干扰胞质空泡判断及细胞增殖，保障与其他胃癌细胞平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-5822；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际权威机构（ATCC）与国内权威机构双重保藏，细胞来源可追溯性强，分子表型及生物学特性经过严格验证，与 MKN-45（国内单一保藏）、MGC-803（多机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% RPMI-1640+10% FBS（核心特色：①采用 RPMI-1640 培养基，与 MKN-45、MGC-803 的 RPMI-1640 配方一致（无额外添加 PS，按用户提供信息执行），区别于 HGC-27 的 DMEM；RPMI-1640 含有的氨基酸组合适配细胞长倍增时间的代谢需求，维持其分子表型稳定；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中受体激动剂 / 拮抗剂影响细胞受体相关实验；若需预防污染，可补充 1% PS（青霉素 – 链霉素），终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，不影响细胞空泡形成及标志物表达）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（贴壁培养时，培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；开展 3D 瘤球培养时，需使用超低吸附培养板，湿度提升至 80%，减少培养基蒸发导致瘤球干裂；与 GES-1、MKN-45、MGC-803 等所有已梳理细胞的培养条件一致，仅需在 3D 培养时调整耗材，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配长倍增时间与贴壁特性：①选择对数生长期细胞（接种后 72-96 小时，空泡数量适中），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2.5-3.5 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免胞质空泡破裂；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，补偿长倍增时间的复苏损失）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对细胞分子表型的影响）
- 倍增时间：~48-80 hours（增殖速度缓慢，是已梳理胃癌细胞中倍增时间最长的（长于 MGC-803 的中等增殖、MKN-45 的中等增殖），对数生长期为接种后 48-72 小时，需每 3 天镜检细胞密度，待密度达 80% 时传代（避免过度密集导致空泡异常增多）；实验设计需适配长周期，如药物处理时间建议延长至 96 小时，设置 0、24、48、72、96 小时多个时间节点监测细胞响应）
- 致瘤性：Yes, the cells form tumors in athymic nude mice.（明确的裸鼠成瘤能力，成瘤周期长（结合 48-80 小时倍增时间，推测皮下成瘤 3-4 周可见明显肿瘤）；建议接种密度为 1×10⁷cells / 只（高于 MGC-803 的 5×10⁶cells / 只），成瘤后可通过免疫组化检测 CEA/TAG72 表达，验证体内分子表型稳定性，适合开展体内药物 efficacy 长期评估）
- 瘤球形成能力：具备瘤球形成能力（需使用专用 3D 肿瘤球培养基，货号 IMC-314）（核心应用特性：①瘤球形成条件：使用超低吸附 6 孔板，接种密度 1×10⁴cells / 孔，加入 IMC-314 培养基，培养 10-14 天可形成直径 150-200μm 的球形结构，瘤球形成率≥70%；②瘤球特性：瘤球细胞表达肿瘤干细胞标志物（如 CD44、ALDH1），且保留 CEA/TAG72 表达及受体缺失特性，可用于肿瘤干细胞分选、靶向药物渗透实验及耐药机制研究；③操作注意：3D 培养期间无需换液，避免晃动培养板导致瘤球破碎；收集瘤球时用移液枪轻柔吹打，离心转速降至 800rpm，防止结构破坏）
- 受体表达情况：acetylcholine, muscarinic, expressed（明确表达蕈毒碱胆碱受体，是该细胞的关键治疗靶点，可用于胆碱受体拮抗剂 / 激动剂的药物筛选实验；与缺乏的胃泌激素受体、VIP 受体形成对比，为受体靶向治疗研究提供 “有 / 无” 受体的对照体系，同时可通过 Western Blot 或流式细胞术检测受体表达水平，验证实验体系有效性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、胞质空泡验证、CEA/TAG72 表达检测及瘤球形成预实验，确保核心特性稳定；若需同步开展 3D 培养，可提前沟通配备 IMC-314 培养基，下单后 48 小时内安排发货，可与 MKN-45、MGC-803 同步下单，保障 “不同性别 / 亚型” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，48 小时内不换液，待细胞空泡恢复正常形态后再进行后续操作）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态；若同步购买 IMC-314 培养基，需单独常温包装，避免与干冰接触） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及分子表型漂移风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 MKN-45、MGC-803 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①空泡鉴别与管理：培养过程中若发现空泡异常增多（占胞质体积 50% 以上）或伴随细胞漂浮，需排查培养箱温度（波动需＜±0.5℃）及培养基批次，排除环境因素影响；正常空泡无需处理，传代后会自然恢复正常比例；②分子表型实验设计：开展 CEA/TAG72 相关实验时，可通过 ELISA 法检测培养上清中标志物分泌量，设置 MGC-803（低表达）作为对照，验证实验体系；研究受体功能时，可使用蕈毒碱胆碱受体激动剂（如卡巴胆碱）处理细胞，检测细胞增殖变化，分析受体信号通路对细胞生长的调控作用；③3D 瘤球培养优化：使用 IMC-314 培养基开展瘤球实验时，接种前需确保超低吸附板底无气泡；培养第 7 天可通过倒置显微镜观察瘤球完整性，若出现松散结构，需补充 500μL 新鲜 IMC-314 培养基，维持营养供应；④性别差异对比实验：搭配 MKN-45（女性）开展实验时，可：a. 检测性激素受体（如 AR、ER）表达差异，分析性别相关信号通路对胃癌的影响；b. 对比化疗药（如顺铂）对两株细胞的 IC50 值，评估性别对药物敏感性的影响；c. 检测 CEA/TAG72 在两株细胞中的表达差异，探索标志物表达的性别特异性；⑤长期培养监测：每 5 代检测胞质空泡比例、
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