一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:OCM-1A 人眼脉络膜黑色素瘤细胞(与 CAL-27(舌鳞癌、中倍分化)、C918(眼脉络黑色素瘤、高侵袭性)同属贴壁生长上皮样肿瘤细胞,区别于 MET-5A(皮肤间皮)、BEAS-2B(肺上皮),核心特色为 “眼脉络膜黑色素瘤 + 低侵袭性 + 上皮细胞样贴壁 + 10 代以内低代数 + 2 周货期”,是眼黑色素瘤侵袭机制研究、低侵袭性肿瘤特性分析、跨器官肿瘤对比的关键模型;可与 CAL-27(舌鳞癌)、C918(眼高侵袭黑色素瘤)、HFL-1(肺正常成纤维)组成 “多器官肿瘤(眼黑色素瘤 / 舌鳞癌)+ 同器官不同侵袭能力 + 正常对照” 体系,探索眼黑色素瘤低侵袭性的分子机制及不同器官肿瘤的生物学差异,同时因低侵袭特性,适合开展抗侵袭药物筛选及肿瘤侵袭能力调控实验)
- 细胞别称:OCM-1A ;人低侵袭性脉络膜黑色素瘤(别称以 “OCM-1A” 为核心,无复杂变体,“人低侵袭性脉络膜黑色素瘤” 明确标注 “眼脉络膜 + 黑色素瘤 + 低侵袭性” 三重属性,与 CAL-27 的 “人舌鳞癌细胞”、C918 的 “人眼脉络黑色素瘤细胞” 形成清晰区分;“低侵袭性” 标签为核心特色,贴合 “低侵袭性肿瘤细胞 + 字母数字 + 特性标注” 的命名体系,避免与高侵袭性眼黑色素瘤细胞(如 C918)混淆,精准定位低侵袭性眼黑色素瘤研究场景)
- 种属来源:人(细胞群体为单一眼脉络膜黑色素瘤细胞系,种属纯净,无交叉污染风险,可稳定表现人眼黑色素瘤特有的生物学特性(如黑色素合成潜能、眼微环境适应),区别于 CAL-27 的舌鳞癌属性,无外源细胞干扰,实验结果重复性及可靠性强)
- 性别年龄:未明确(建议实验前通过后续补充的 STR 位点 Amelogenin 基因(若检测)或 SRY 基因 PCR 验证性别,参考临床眼脉络膜黑色素瘤高发年龄(50-70 岁)及低侵袭性多发生于疾病早期的特性,推测为中老年个体,与 CAL-27(56 岁男)形成 “中老年肿瘤 – 中老年肿瘤” 年龄对照,与 C918(中老年推测)形成 “同年龄层不同侵袭能力” 对照,与 HFL-1(胎儿男)形成 “中老年肿瘤 – 胎儿正常” 年龄梯度;中老年背景适配眼黑色素瘤高发人群,适合开展年龄与肿瘤侵袭性关联分析)
- 组织来源:眼;具体部位:脉络膜;肿瘤类型:黑色素瘤;侵袭特性:低侵袭性(明确为眼脉络膜来源低侵袭性黑色素瘤,保留眼黑色素瘤特有的 “脉络膜上皮起源、黑色素合成倾向”,同时具备低侵袭性特征(如迁移能力弱、侵袭相关基因低表达);区别于 CAL-27 的舌鳞癌原发灶、C918 的眼高侵袭黑色素瘤,可用于眼黑色素瘤低侵袭机制研究(如侵袭抑制基因表达)、低侵袭与高侵袭眼黑色素瘤的分子差异对比,同时为临床眼黑色素瘤早期(低侵袭)诊疗方案优化提供实验依据)
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁生长模式与 CAL-27、C918 一致,但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 低侵袭性增殖特征”:①增殖特性:10 代以内细胞增殖节奏未明确标注,结合低侵袭性肿瘤常规规律,推测倍增时间 35-50 小时(慢于 C918 的 24-36 小时,与 CAL-27 的 20-45 小时部分重叠),无有限传代限制(永生化肿瘤细胞,区别于 HFL-1 的有限细胞系),且增殖速度稳定(无显著异质性);②贴壁特性:贴壁强度介于 CAL-27(舌鳞癌,贴壁中等)与 C918(高侵袭黑色素瘤,贴壁中等)之间,细胞呈规整上皮样铺路石样排列(低侵袭性特征,排列密度高于 C918);对数生长期为接种后 24-72 小时,传代需每 24 小时镜检 1 次,待密度达 70%-80% 时按 1:2-1:3 传代(低于 CAL-27 的 1:3-1:4),传代时需轻柔消化(避免破坏细胞结构影响侵袭特性检测),适合开展低侵袭相关实验(如划痕迁移、Transwell 侵袭))
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形,排列规整呈铺路石样,胞质丰富,部分细胞可能含少量黑色素颗粒(低侵袭性黑色素瘤特征,颗粒少于 C918),核浆比小于 C918(高侵袭性)、大于 CAL-27(中倍分化),体现低侵袭性眼黑色素瘤的典型形态;与 CAL-27(舌鳞癌上皮样、含颗粒状胞浆)相比,无角蛋白强阳性特征且可能含黑色素颗粒,与 C918(多角形、黑色素颗粒丰富)相比,排列更规整且颗粒更少;可通过 “上皮样 + 少量黑色素颗粒 + 低侵袭性(迁移实验验证)” 快速鉴别,同时与 A375 皮肤黑色素瘤细胞(梭形)通过眼特异性标志物(如 RPE65)进一步区分)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留 “低侵袭性、上皮形态、黑色素合成潜能” 核心属性,建议传代次数不超过 12 代,防止长期传代导致特性漂移,如侵袭能力升高(Transwell 穿膜细胞数增加 30% 以上)、黑色素颗粒减少、上皮形态向梭形转变)
- STR 鉴定:未明确具体位点信息(建议参考随货 STR 鉴定报告或通过 PCR 检测核心 STR 位点(如 Amelogenin、CSF1PO、D13S317 等),重点关注 Amelogenin 基因以确认性别,排除细胞交叉污染(如与 C918 或其他器官肿瘤细胞混淆);可将检测结果与 CAL-27、C918 的 STR 图谱对比,明确 OCM-1A 的独特位点,确保实验用细胞身份准确及低侵袭性属性)
- 生物安全等级:1(参考同类肿瘤细胞(CAL-27、C918)的安全等级,预计为 1 级,低于 BEAS-2B 的 2 级、HGC-27 的 2 级;操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范,实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理,避免细胞残留污染;若涉及黑色素相关实验,需妥善处理含黑色素颗粒的废液,防止环境污染)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(计数时需轻柔吹打上皮样细胞,避免细胞团块形成及黑色素颗粒脱落,确保计数准确;冻存管含 10% 二甲基亚砜(DMSO)无血清冻存液,建议复苏后 48 小时内检测存活率(预计≥80%),且低侵袭特性、上皮形态无显著改变;T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%,标注 “眼脉络膜黑色素瘤,低侵袭性,建议检测侵袭相关标志物”,提醒用户利用低侵袭特性开展实验)
- 支原体检测:无(每批次细胞通过 PCR 法检测支原体(覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体),结果为阴性,避免支原体污染影响细胞增殖、低侵袭特性及后续实验(如 Transwell 侵袭、黑色素合成),保障与 CAL-27、C918 平行实验的可靠性)
- 保藏机构:未明确标注(建议实验前咨询供应商获取保藏机构信息(如 ATCC、ECACC 或国内眼肿瘤细胞库),通过保藏机构数据库查询细胞详细背景(如性别年龄、侵袭能力验证数据),补充完善细胞基础信息,提升实验可追溯性与结果重复性,与 CAL-27 的多机构保藏体系形成互补)
- 培养基:DMEM+10% FBS+PS(青霉素 – 链霉素)(核心特色:①采用 DMEM 培养基,与 CAL-27 的 DMEM 一致,区别于 C918 的 RPMI-1640;DMEM 含高糖(4.5g/L)及适配低侵袭性眼黑色素瘤细胞的营养配比,支持其上皮形态维持及低侵袭相关蛋白(如 E-cadherin)合成;②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清,避免血清中侵袭促进因子影响细胞低侵袭特性;③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染,不影响黑色素瘤表型及低侵袭能力)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(与 CAL-27、C918 的常规 CO₂培养条件一致,湿度维持在 70%-80%,定期更换水盘,防止培养基蒸发导致渗透压升高及黑色素颗粒沉淀;培养箱内避免剧烈晃动,防止贴壁细胞脱落;与其他肿瘤细胞培养条件兼容性高,仅需注意单独放置,避免交叉污染,便于多细胞株并行开展 “跨器官 / 同器官不同侵袭能力” 对比实验)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作适配低侵袭性上皮细胞特性:①选择对数生长期中期细胞(密度 70%,低侵袭特性稳定、活性最佳),用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟,镜下见细胞间隙增大即可终止,轻柔吹打避免细胞破碎及黑色素颗粒流失;②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞,用预冷的无血清冻存液重悬,调整浓度至 2.5×10⁶cells/mL(与 C918 相近,高于 CAL-27 的 3×10⁶cells/mL);③冻存流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时(程序降温盒)→-80℃过夜→液氮保存;复苏时 37℃水浴 1 分钟融化,离心后用预热的 DMEM 培养基重悬,直接接种,避免 DMSO 对低侵袭相关蛋白(如 TIMPs)活性的影响)
- 细胞货期:2 周左右(库存细胞需经过 DMEM 培养基适应性培养、支原体检测及低侵袭特性验证(如 Transwell 穿膜细胞数少),核心特性稳定,货期长于 CAL-27 的 1 周,建议用户提前 2 周下单,预留充足时间,可与 C918(1 周货期)错峰下单,保障 “同器官不同侵袭能力” 平行实验的时间衔接)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,采用防震恒温泡沫箱,内置 2-8℃冰袋及温度监测卡,运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动,减少贴壁细胞脱落及黑色素颗粒流失;到达后立即放入 5% CO₂培养箱,24 小时后观察细胞贴壁状态,48 小时内首次换液(使用 DMEM+10% FBS+PS 培养基),确保细胞适应环境)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,国内运输一般配备 1kg 干冰,确保到达时干冰剩余量≥60%,维持细胞冻存状态) 顺丰快递(优先选择次晨达服务,最大限度缩短运输时间,降低细胞活性损失及低侵袭特性改变风险,尤其避免运输过程中细胞因应激反应导致侵袭能力升高)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 CAL-27、C918 等细胞限制条款一致,严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途;实验过程中需妥善处理含低侵袭性黑色素瘤细胞的培养基,避免环境暴露,若涉及黑色素检测,需按规范处理含色素废液)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞实验操作需重点关注:①低侵袭性实验设计:开展侵袭相关实验时,Transwell 侵袭实验建议培养 48 小时(长于 C918 的 24-36 小时),Matrigel 基质胶稀释比例 1:10(适配低侵袭能力),计数穿膜细胞时选择 5 个随机视野取平均值,同时设置 C918(高侵袭)作为阳性对照、HFL-1(正常)作为阴性对照,明确低侵袭特性;划痕迁移实验需在细胞融合度达 90% 时进行划痕,分别在 0、48、72 小时拍照,计算划痕愈合率(预计 72 小时愈合率<30%,低于 C918 的>60%);②低侵袭标志物验证:首次培养时,建议通过 Western Blot 检测低侵袭相关蛋白(E-cadherin 高表达、MMP2 低表达、TIMP1 高表达),或通过免疫荧光检测 EMT 标志物(E-cadherin 膜定位、N-cadherin 低表达),确认低侵袭表型;可设置 C918 作为对比,验证标志物表达差异;③跨器官 / 同器官对比实验:搭配 CAL-27(舌鳞癌)、C918(眼高侵袭黑色素瘤)开展实验时,可:a. 检测肿瘤类型标志物(黑色素瘤 HMB-45,OCM-1A/C918 高表达;鳞癌 CK5/6,CAL-27 高表达),验证肿瘤亚型特性;b. 对比三株细胞的侵袭能力(Transwell 穿膜数:C918>CAL-27>OCM-1A),分析器官来源及侵袭能力对肿瘤恶性程度的影响;c. 检测侵袭相关信号通路(如 PI3K-AKT、TGF-β/Smad)的活性差异,探索低侵袭性的分子机制;④长期培养监测:每 5 代检测细胞形态(是否维持上皮样、黑色素颗粒含量)、低侵袭特性(Transwell 实验)及相关标志物表达,若发现侵袭能力升高或标志物异常,需立即更换低代数种子细胞;⑤货期与实验规划:因货期为 2 周,需提前规划实验时间,建议与供应商确认细胞培养进度,确保在实验计划启动前 1 周完成细胞复苏与适应性培养,避免延误实验;若需与 C918 同步实验,可在 OCM-1A 下单后 1 周再订购 C918,实现两株细胞同时进入实验阶段。


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