一、细胞基本属性
- 细胞名称:OS-RC-2 人肾癌细胞(STR 鉴定正确)(为肾肿瘤来源细胞,区别于 HK-2 正常肾上皮细胞,是研究东亚人种肾癌发病机制、药物敏感性的重要模型,与 ACHN(白人来源)形成人种差异对照)
- 细胞别称:OS-RC-2;RC-2;人肾癌细胞(别称简洁,“OS-RC-2” 为核心标识,“RC-2” 缩写便于实验记录,可通过 “OS-” 前缀与其他 “RC” 系列肾癌细胞(如 RC-48)快速区分,贴合肾脏肿瘤细胞株命名体系)
- 种属来源:人
- 性别年龄:52 岁(未明确标注性别,结合 STR 位点 Amelogenin:X,Y 可判断为男性;52 岁中年背景,与 HK-2(成年)、ACHN(22 岁男)、A-704(78 岁男)形成年龄梯度,为中年男性肾癌研究、不同年龄段肾癌代谢差异实验提供匹配模型)
- 组织来源:肾(源自肾脏肿瘤组织,虽未明确具体肾癌亚型,但作为经典人肾癌细胞株,可与 ACHN(肾细胞腺癌转移灶)、786-O(肾透明细胞癌)组成跨亚型、跨人种的肾癌研究体系,用于验证实验结果的人种通用性)
- 生长特性:贴壁生长(贴壁能力稳定,对数生长期细胞增殖节奏平缓,贴壁强度与 HK-2、ACHN 相近,传代操作可参考同类肾细胞流程,便于融入现有培养体系)
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形,具备肾癌细胞典型的上皮细胞形态特征,胞质均匀,核仁清晰,与 HK-2(正常近曲小管上皮样)相比,核浆比略高但无显著恶性形态异常,可通过形态观察初步判断细胞纯度及生长状态)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留肾癌细胞的原始生物学特性,如成瘤性、药物敏感性等,建议传代次数不超过 15 代,防止长期传代导致特性漂移,如成瘤能力下降、倍增时间缩短)
- 背景介绍:OS-RC-2 细胞来源于日本人的肾脏肿瘤细胞,核心特性及应用如下:①人种特色:为东亚人种(日本人)来源肾癌细胞,填补现有肾癌细胞株中白人来源占比高的空白,适合开展肾癌发病的人种差异机制研究(如基因多态性、药物代谢酶差异)、东亚人群抗肾癌药物筛选,结果更贴合东亚临床场景;②成瘤特性:可移植到裸鼠成瘤,具备体内成瘤能力,适用于体内肿瘤模型构建、药物体内 efficacy 评估,与 ACHN(高成瘤率、短周期)相比,其长倍增时间特性适合研究慢效药物的体内作用效果;③应用场景:广泛用于肾癌基础机制研究(依托人种特异性)、跨人种药物敏感性对比实验(与 ACHN 等白人来源细胞)、体内外抗肾癌药物筛选,同时可与 HK-2(正常肾细胞)组成 “正常 – 肿瘤”(同成年背景)对照,用于筛选肾脏肿瘤特异性标志物。
- STR 位点信息:Amelogenin:X,Y(明确提示男性性别,补充原文性别标注缺失的信息,可通过该位点验证细胞性别一致性,排除交叉污染);CSF1PO:12,13;D13S317:8,12;D16S539:11;D18S51:14;D19S433:13,14;D21S11:31.2;D2S1338:20;D3S1358:17;D5S818:11,12;D7S820:10,11;D8S1179:14;FGA:24;TH01:6;TPOX:8,11;vWA:16;(STR 位点含特异性位点(如 D21S11:31.2、D2S1338:20),与 ACHN(白人来源)、HK-2(正常肾细胞)的 STR 图谱差异显著,可通过图谱验证细胞身份及人种特异性,确保实验用细胞来源准确)
- 使用权限:A 类(属于开放获取的科研用细胞株,无需特殊申请即可获取,适合各类科研机构开展基础及应用研究,尤其便于东亚地区实验室开展人种相关肾癌研究,需遵守供应限制条款)
- 生物安全等级:1(参考人源肾癌细胞常规安全等级,操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范,与 HK-2(等级 2)、ACHN(等级 1)的安全操作要求互补,便于实验室根据细胞类型统一管理防护等级)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(冻存管建议含 10% 二甲基亚砜(DMSO)的无血清冻存液,经检测复苏存活率稳定在 85% 以上,且复苏后成瘤性、倍增时间无显著改变,确保实验起始条件一致)
- 支原体检测:无(每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体,覆盖常见致病性支原体类型,结果为阴性,可直接用于实验,避免支原体污染影响细胞生长及成瘤性实验结果)
- 保藏机构:中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心(国内权威机构保藏,细胞来源可追溯,适合国内科研机构开展实验,与 ACHN(含 ATCC 保藏)的保藏体系形成国内外互补,便于跨地域实验协作)
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+PS(青霉素 – 链霉素),配方说明:①培养基适配性:采用 RPMI-1640 培养基,与 ACHN(DMEM)、HK-2(专用培养基)形成差异,其营养成分适配该细胞缓慢增殖的代谢需求;②10% FBS 建议选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清,避免血清中杂蛋白影响细胞生长状态及成瘤性;③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染,不影响细胞正常代谢。培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用,避免低温刺激细胞。
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(培养箱湿度维持在 70%-80%,定期更换水盘,防止培养基蒸发导致渗透压升高;与 HK-2、ACHN 等肾细胞培养条件完全一致,确保 “正常 – 肿瘤”“跨人种” 对照实验环境的统一性)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作流程:①对数生长期细胞消化离心,用预冷的无血清冻存液重悬,调整浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL;②分装后 4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时(建议用程序降温盒,减少低温损伤)→-80℃过夜→转入液氮;复苏时 37℃水浴 1 分钟内融化,离心去除冻存液,用预热的 RPMI-1640 培养基重悬,避免 DMSO 对细胞的毒性影响)
- 倍增时间:~60-72 hours(增殖速度显著慢于 ACHN(28-36 小时)、786-O(24-45 小时),与 A498(60 小时)相近,对数生长期为接种后 2-4 天,需根据该特性调整实验时间节点,如药物处理周期建议延长至 72-96 小时,传代间隔建议 5-6 天,避免过早传代导致细胞密度过低)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存充足,所有现货细胞均经过活性检测及成瘤性预实验验证,下单后 48 小时内可安排发货,特殊需求如加急提供倍增时间检测报告,可提前与供应方沟通协调)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,采用恒温泡沫箱内置 2-8℃冰袋及温度监测卡,确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃,到达后建议立即放入 37℃培养箱,因倍增时间长,48 小时后观察细胞贴壁情况)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,国内运输一般配备 500g-1kg 干冰,确保到达时干冰剩余量≥50%,维持细胞冻存状态) 顺丰快递(优先选择次日达服务,缩短运输时间,降低细胞活性损失风险)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途,使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞实验操作需重点关注:①培养与传代:因倍增时间长,需每 2 天镜检细胞密度,待密度达 70%-80% 时再传代;消化时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟(略长于 ACHN),镜下见细胞间隙增大、形态变圆即可终止,轻柔吹打避免细胞破碎,防止影响后续成瘤实验;②人种相关实验设计:与 ACHN(白人男性,22 岁)搭配开展跨人种实验时,需控制年龄、性别以外的变量(如培养条件、药物浓度),通过对比两者对同一药物的 IC50 值、基因表达差异,分析人种因素对药物敏感性的影响;③成瘤性实验建议:开展裸鼠成瘤实验时,因倍增时间长,接种细胞密度建议提高至 2×10⁶cells / 只(高于 ACHN 的 1×10⁷cells / 只),接种部位选择右侧背部皮下,肿瘤生长观察周期延长至 4-6 周,每周测量肿瘤体积(长 × 宽 ²/2),绘制生长曲线;④培养基使用:严格使用 RPMI-1640 培养基,不可与 HK-2 的专用培养基、ACHN 的 DMEM 混用,若需开展 “正常 – 肿瘤” 或跨人种对照实验,需分别配制对应培养基,避免交叉使用导致细胞生长异常;⑤污染防控:实验操作在超净工作台内进行,定期对 RPMI-1640 培养基、培养箱进行无菌检测,避免细胞交叉污染或微生物污染,尤其需防止与 HK-2 正常细胞混淆,确保实验结果可靠。


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