一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：PANC-1 人胰腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 MIA-PACA-2（胰腺癌、半贴壁 / 65 岁男）、JF-305（通用胰腺癌细胞、贴壁）同属胰腺来源上皮样肿瘤细胞，区别于 MET-5A（皮肤间皮）、TPC-1（甲状腺乳头状癌），核心特色为 “56 岁男性白人胰管上皮细胞癌 + 易聚团需单细消化 + KRAS p.Gly12Asp 热点突变 + G6PD 低泳动性 B 型 + 60~70 染色体 + DMEM 常规培养基”，是胰管癌机制研究、胰腺癌 KRAS 突变相关通路、聚团生长调控的关键模型；可与 MIA-PACA-2（半贴壁 / 老年）、JF-305（通用型 / 中年）、HFL-1（正常肺成纤维）组成 “胰腺癌细胞 – 胰管癌 / 未明确亚型 + 聚团 / 半贴壁 + 中年 / 老年 + 正常对照” 体系，探索胰管癌的独特生物学特性及 KRAS 突变对肿瘤生长的影响，同时因明确基因变异，适合开展胰腺癌靶向治疗（如 KRAS 抑制剂）研究）
- 细胞别称：Panc-1; PANC.1; Panc 1; PanC1; Panc1; PANC1; Panc-1-P；人胰腺癌细胞（别称以 “PANC-1” 为核心，大小写、标点符号、空格差异为常见书写变体，“人胰腺癌细胞” 需补充 “胰管上皮细胞癌” 病理亚型标注，避免与 MIA-PACA-2 的 “未明确亚型”、JF-305 的 “通用型” 混淆；贴合 “胰管癌细胞 + 字母数字 + 病理类型” 的命名体系，通过 “易聚团”“KRAS 突变” 标签强化与常规胰腺癌细胞的差异，精准定位胰管癌及 KRAS 相关研究场景）
- 种属来源：人；种族背景：白人（明确白人种族背景，与 MIA-PACA-2（白人）、JF-305（未明确）形成 “白人 – 未明确” 种族对照，适合开展胰腺癌种族差异与 KRAS 突变频率的关联研究；STR 鉴定确认无交叉污染，细胞群体为单一胰管上皮细胞癌细胞系，种属纯净，可稳定表现白人中年胰管癌特有的生物学特性（如 KRAS 驱动的增殖信号），无外源细胞干扰）
- 性别年龄：男；56 岁（明确的中年男性背景，填补胰腺癌细胞模型中 “50-60 岁白人男性胰管癌” 空白，与 MIA-PACA-2（65 岁男）形成 “中年男 – 老年男同性别年龄梯度”，与 JF-305（中年至中老年推测）形成 “明确中年 – 推测中年” 对照，与 CFPAC-1（26 岁男胰腺管腺癌）形成 “中年男 – 年轻男同病理亚型” 对比；56 岁为胰管癌高发年龄（中晚期为主），且为原发灶来源，可用于模拟临床中年男性胰管癌中晚期患者的肿瘤特性，开展年龄相关的 KRAS 突变功能研究）
- 组织来源：胰腺；具体部位：胰管；病理亚型：上皮细胞癌（明确为胰管上皮细胞癌，保留胰管癌特有的 “胰管上皮起源、腺管分化特征、胰管特异性标志物表达”，区别于 MIA-PACA-2 的未明确亚型、JF-305 的通用型；胰管癌占胰腺癌比例＞80%，该细胞系为胰管癌研究的经典模型，可用于胰管癌癌变机制（如胰管上皮细胞恶性转化）、胰腺癌不同病理亚型（胰管癌 vs 腺泡癌）的分子差异对比，为临床胰管癌诊疗方案（如 KRAS 靶向治疗）优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 JF-305 一致，与 MIA-PACA-2 的半贴壁差异显著，核心特色为 “上皮样贴壁 + 强聚团生长”：①增殖特性：10 代以内细胞倍增时间～38-56 小时（文献明确 52 小时，慢于 MIA-PACA-2 的 25.7-40 小时，快于 JF-305 的 30-45 小时上限），增殖速度稳定，无有限传代限制（永生化肿瘤细胞）；②聚团特性：细胞生长过程中易形成紧密细胞团（直径 50-100μm，非污染），需通过消化操作分散为单个细胞（否则影响铺板均匀性）；③传代操作：因易聚团，传代时需 “延长消化 + 轻柔吹散”：0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 4-5 分钟（长于 MIA-PACA-2 的 3-4 分钟、JF-305 的 2-3 分钟），期间轻柔拍打培养瓶壁辅助分散，镜下见细胞团松散为单个细胞即可终止；传代比例 1:2-1:3（与 MIA-PACA-2 一致），铺板时需轻轻吹散细胞悬液，避免聚团沉淀，适合开展细胞聚团机制及单细胞实验（如流式分选））
- 细胞形态：上皮细胞样（贴壁细胞呈多边形，因易聚团呈簇状排列（非单层分散），胞质丰富，无 MIA-PACA-2 的悬浮细胞、JF-305 的紧密铺路石排列，核浆比大于 MIA-PACA-2（老年）、小于 JF-305（中年通用型），体现胰管癌细胞聚团生长的形态特征；与 MIA-PACA-2（半贴壁 / 松散聚团）相比，无悬浮细胞且聚团更紧密，与 JF-305（贴壁 / 无聚团）相比，聚团生长特征显著；可通过 “上皮样紧密聚团 + KRAS p.Gly12Asp 突变 + 胰管标志物（如 CK19）阳性” 快速鉴别，同时与 MIA-PACA-2 通过生长特性（纯贴壁 vs 半贴壁）、与 JF-305 通过聚团特性（有 vs 无）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “胰管特性、聚团生长、KRAS 突变状态” 核心属性，建议传代次数严格控制在 10 代以内，防止长期传代导致特性漂移，如聚团能力减弱（聚团直径＜30μm）、KRAS 突变丰度下降（低于初始代次 80%）、倍增时间缩短（＜35 小时），确保细胞始终贴合胰管癌及 KRAS 研究需求）
- 背景介绍：PANC-1 细胞源自 56 岁白人男性胰管上皮细胞癌，核心特性及应用如下：①病理与分子特色：作为胰管癌经典模型，含胰腺癌高频 KRAS p.Gly12Asp 热点突变（约 90% 胰管癌存在该突变），G6PD 低泳动性 B 型（酶活性特征可辅助身份验证），是研究 KRAS 驱动肿瘤的理想工具；②生长特性价值：易聚团生长模拟胰管癌临床病理中的腺管样结构，可用于探索细胞间连接（如 E-cadherin）与聚团的关联；③应用场景：广泛用于胰管癌基础机制（如 KRAS-RAF-MEK 通路）、KRAS 抑制剂筛选、聚团生长调控研究，同时可作为 “胰管癌标准细胞系” 用于多中心实验结果比对）
- 重要提醒（核心操作警示，与 MIA-PACA-2 对比）：①消化操作：因易聚团，需使用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液（可添加 0.01% DNase I 防止细胞团粘连），37℃孵育 4-5 分钟，期间每 2 分钟轻柔拍打培养瓶壁 1 次，镜下观察细胞团分散为单个细胞后立即终止；终止后用含 10% FBS 的 DMEM 培养基中和胰酶，轻轻吹打 3-5 次（避免过度吹打导致细胞损伤），确保单细胞悬液比例≥90%；②铺板操作：细胞计数后，按所需密度稀释为单细胞悬液，铺板时轻轻摇晃培养瓶，使细胞均匀分布，避免聚团沉淀在瓶底局部；铺板后 24 小时内不移动培养瓶，防止细胞聚团位置改变；③聚团监测：传代后 48 小时镜检，若仍出现大量大聚团（直径＞150μm），需重新优化消化时间（延长 1-2 分钟）或添加 DNase I，确保后续实验（如药物筛选、转染）的细胞均一性）
- STR 位点信息：Amelogenin：X（结合性别标注 “男”，存在 Y 染色体缺失可能，建议通过 SRY 基因 PCR 验证性别，避免核型误判）; CSF1PO：10，12（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D13S317：11（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D16S539：11（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D18S51：12（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D19S433：11，16（罕见等位基因，核心鉴别位点）；D21S11：28（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D2S1338：23，24（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D3S1358：17（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D5S818：11，13（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D7S820：8，10（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；D8S1179：14，15（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；FGA：21（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；TH01：7，8（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；TPOX：8，11（与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；vWA：15（纯合子，与 MIA-PACA-2 的未明确位点差异）；（STR 位点含罕见等位基因（D19S433：16），与 MIA-PACA-2、JF-305 的 STR 图谱差异显著，可通过与 ATCC CRL-1469 数据比对，确认细胞身份及胰管癌属性）
- 基因变异信息：p.Gly12Asp (c.35G>A); ClinVar=VCV000012582; Zygosity=Heterozygous（KRAS 热点突变）：①突变特征：KRAS 基因第 12 位甘氨酸（Gly）突变为天冬氨酸（Asp），为胰腺癌高频驱动突变（杂合子，保留野生型 allele），可通过 Sanger 测序或数字 PCR 验证突变丰度（建议每 5 代检测 1 次）；②功能影响：激活 KRAS-RAF-MEK-ERK 信号通路，促进细胞增殖、抗凋亡及聚团生长，是胰管癌恶性进展的关键驱动因素；③应用场景：a. 靶向治疗实验：使用 KRAS G12D 抑制剂（如 MRTX1133）处理细胞，检测增殖抑制率（CCK-8）及通路活性（p-ERK Western Blot），评估药物疗效；b. 机制研究：通过 siRNA 干扰 KRAS 表达，探索突变型 KRAS 对胰管癌聚团生长、致瘤性的调控作用；④注意事项：长期培养需监测突变丰度，避免野生型细胞克隆优势生长导致突变丰度下降）
- 染色体：60~70（异倍体，染色体数目介于 MIA-PACA-2 的未明确核型与 JF-305 的未明确核型之间）：①核型特征：染色体模式数目 63（含 3 个独特标记染色体 + 1 个小环状染色体），核型稳定，体现胰管癌典型染色体异常；②应用场景：a. 核型分析：通过 G 带技术观察标记染色体结构，探索其与 KRAS 突变的关联；b. 对比实验：与 MIA-PACA-2（未明确核型）对比，分析不同胰腺癌细胞的核型差异模式；③注意事项：每 5 代通过染色体计数验证数目范围（60~70），确保核型稳定）
- 生物安全等级：1（与 MIA-PACA-2、JF-305 一致，低于 BEAS-2B 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级规范，因易聚团需延长消化操作时间，需注意无菌操作时长，避免污染；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，含细胞团的废液需先离心收集再灭菌，防止残留）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需确保为单细胞悬液，台盼蓝染色计数误差＜6%（低于 MIA-PACA-2 的 8%）；冻存管含 10% DMSO 无血清冻存液，复苏后 48 小时存活率≥85%（高于 MIA-PACA-2 的 80%），且聚团特性、KRAS 突变状态无改变；T25 瓶发货时细胞密度达 65%-70%（聚团融合状态），标注 “胰管上皮细胞癌，易聚团需单细消化，KRAS G12D 突变”，重点提醒特殊消化操作）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体，结果为阴性，避免污染影响聚团生长及 KRAS 通路活性，保障与 MIA-PACA-2、JF-305 平行实验的可靠性，尤其适合 KRAS 相关精准实验）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1469（国际权威机构保藏，细胞来源可追溯性强，胰管癌特性、KRAS 突变经过严格验证，与 MIA-PACA-2 的多机构保藏、JF-305 的未明确保藏形成互补，便于国内外胰管癌研究协作）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+PS（与 MIA-PACA-2 的双血清 DMEM 一致，区别于 JF-305 的 RPMI-1640；DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配胰管癌细胞的营养配比，支持其聚团生长及 KRAS 通路活性维持；10% FBS 需选择低内毒素、无 KRAS 通路干扰物质的批次；PS 终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响 KRAS 突变功能）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 MIA-PACA-2、JF-305 一致，湿度 70%-80%；因细胞聚团对温度敏感，培养箱需稳定控温（波动≤±0.5℃），避免温度变化导致聚团异常；培养环境与其他胰腺癌细胞兼容，仅需注意消化操作差异，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配聚团特性）：①细胞收集：选择对数生长期细胞（密度 70%，聚团适中），按 “重要提醒” 消化为单细胞悬液，1000rpm 离心 5 分钟，彻底去除胰酶；②冻存浓度：用预冷无血清冻存液重悬至 2.5×10⁶cells/mL（与 JF-305 一致，低于 MIA-PACA-2 的 3×10⁶）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟，用预热 DMEM 重悬，铺板后 24 小时内不换液，帮助细胞恢复聚团生长能力）
- 倍增时间：~38-56 hours（文献明确 52 小时为标准值，慢于 MIA-PACA-2 的 25.7-40 小时，适合开展长期实验（如 7-10 天药物响应）；实验设计需设置 48/72/96 小时检测点，覆盖完整增殖周期，与 MIA-PACA-2 的短期实验形成 “慢 – 快” 周期互补）
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