一、细胞基本属性
- 细胞名称：PC-3 人前列腺癌细胞（与 NCI-H660、LNCaP、DU145 同属前列腺癌细胞，但转移部位为骨（前列腺癌最常见转移部位，占比约 70%），区别于 NCI-H660（淋巴结转移、神经内分泌亚型）、LNCaP（淋巴结转移、激素敏感）、DU145（脑部转移、去势抵抗），是前列腺癌骨转移机制、骨微环境适应研究的 “金标准” 模型，可与其他前列腺癌细胞组成 “不同转移部位 / 亚型” 对照体系，探索前列腺癌转移器官特异性机制）
- 细胞别称：PC3; PC.3；PC-3; 人前列腺癌细胞（别称以 “PC” 为核心前缀，简洁易记，与 NCI-H660（“NCI-” 前缀）、LNCaP（无前缀）、DU145（“DU” 前缀）形成前列腺癌细胞株的清晰区分，数字 “3” 便于实验记录及文献检索，贴合前列腺癌细胞 “字母 + 数字” 的经典命名体系，同时 “人前列腺癌细胞” 标注明确病理类型，避免与其他 “PC” 前缀细胞（如胰腺癌细胞）混淆）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；62 岁（明确的老年白人男性背景，与 LNCaP（50 岁白人男）、NCI-H660（63 岁高加索男）形成 “中年 – 老年” 年龄梯度，与 DU145（推测中老年男）年龄相近，为前列腺癌老年高发人群的转移机制、药物耐受性研究提供精准模型，尤其适合骨转移相关的老年临床场景模拟）
- 组织来源：前列腺；骨腺癌转移灶（核心特色为骨转移灶来源，且是 Ⅳ 级前列腺腺癌（晚期），保留骨转移癌特有的 “骨基质黏附、破骨细胞激活、成骨 / 溶骨表型” 特性；区别于其他前列腺癌细胞的淋巴结 / 脑部转移，可用于前列腺癌骨转移关键步骤研究（如肿瘤细胞穿透骨皮质、骨微环境定植），同时为临床骨转移诊断标志物筛选、骨靶向药物研发提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏与骨转移特性匹配（介于神经内分泌癌与激素敏感腺癌之间），细胞间连接紧密但不形成簇状（区别于 LNCaP 的成簇生长），贴壁强度高于 NCI-H660（混合生长）、MDA-PCA-2B（贴壁差），传代操作可参考前列腺癌细胞通用流程，便于与其他转移灶细胞同步开展平行实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整，胞质丰富，核仁清晰，具备晚期前列腺腺癌细胞典型形态特征；因骨转移来源，部分细胞可能呈现适应骨微环境的形态变异（如胞质内含骨基质相关颗粒，需通过电镜观察）；与 NCI-H660（混合生长、成团）、DU145（排列紊乱）相比，形态更接近分化较好的腺癌，可通过形态观察初步判断细胞转移部位特性及纯度，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留骨转移灶的原始生物学特性，如骨黏附能力、低酶活性等，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如酸性磷酸酶活性异常升高、骨基质黏附能力下降）
- 染色体：47~68（染色体数目多于正常人类二倍体（46 条），且波动范围窄于 NCI-H660（未明确）、LNCaP（72~88），体现骨转移癌细胞遗传背景相对稳定；染色体数目异常与骨转移相关基因（如 CXCR4、MMP9）的拷贝数变异相关，实验设计中需注意染色体倍性对药物作用靶点表达的影响）
- 背景介绍：PC-3 细胞源于一位 62 岁白人男性 Ⅳ 级前列腺腺癌患者的骨头转移灶，核心特性及应用如下：①酶活性特色：酸性磷酸酶活性（前列腺上皮细胞标志物）和 5-α- 睾丸激素还原酶活性（雄激素代谢关键酶）均低，体现去势抵抗特性（无需雄激素即可生长），且与前列腺癌晚期激素非依赖性表型一致，是研究去势抵抗性前列腺癌（CRPC）晚期骨转移的理想模型；②成瘤与转移特性：可在半固体培养基中形成集落（体外恶性增殖验证），裸鼠皮下接种 1×10⁷cells 即可 100% 成瘤（21 天内），成瘤效率高于 LNCaP（需更长时间），适合快速构建体内骨转移模型（如胫骨内接种）；③应用场景：广泛用于前列腺癌骨转移机制研究（如骨 – 肿瘤细胞交互作用）、CRPC 晚期药物筛选（如骨靶向化疗药、RANKL 抑制剂）、转移灶与原发灶对比实验，同时可与 NCI-H660（神经内分泌）、DU145（脑部转移）搭配开展 “不同转移部位 / 亚型” 的跨模型研究，覆盖前列腺癌转移的主要临床场景。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（此处需注意：性别标注为男性，但 Amelogenin 位点显示为 X，推测为原文标注误差或位点检测特殊情况（如 Y 染色体部分缺失），建议实验前通过染色体核型分析（如 G 带染色）或 Y 染色体特异性基因（如 SRY）PCR 验证，避免性别误差影响激素相关实验结果）; CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：11；D18S51：14，15；D19S433：14；D21S11：29，31.2；D2S1338：18，20；D3S1358：16；D5S818：13；D7S820：8，11；D8S1179：13；FGA：24；TH01：6，7；TPOX：8，9；vWA：17；（STR 位点含多个纯合子位点（如 CSF1PO：11、D13S317：11），是该细胞 STR 图谱的显著特征，与 NCI-H660、LNCaP 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与保藏机构（ATCC CRL-1435）数据比对，确认细胞身份及骨转移特性）
- 生物安全等级：1（参考人源前列腺癌骨转移细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，与 NCI-H660、LNCaP 安全要求一致，便于实验室统一管理多株前列腺转移灶细胞）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后低酶活性、骨黏附能力无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-80%，确保到达后可直接用于实验或传代）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖肺炎支原体、人型支原体等常见类型，结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染影响细胞生长及骨转移相关实验结果（如破骨细胞共培养））
- 保藏机构：ATCC; CRL-1435，ATCC; CRL-7934，DSMZ; ACC-465，ECACC; 90112714；中国典型培养物保藏中心细胞库（国际权威机构（ATCC、DSMZ、ECACC）与国内机构四重保藏，细胞来源可追溯性极强，骨转移特性及生物学表型经过多重验证，与 NCI-H660（未明确国际保藏）的保藏体系互补，便于跨地域实验协作及文献结果复现）
- 培养基：90% F12K+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 F12K 培养基，区别于 NCI-H660 的 RPMI-1640、LNCaP 的 RPMI-1640、DU145 的 MEM；F12K 培养基含丰富的微量元素（如锌、硒）及生长因子，适配骨转移细胞高代谢需求，尤其适合维持细胞与骨基质相关的黏附分子表达；②10% FBS 建议选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中骨相关因子（如 BMP）干扰骨转移实验；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞酶活性及骨黏附能力）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内托盘需水平放置，避免培养基倾斜导致细胞分布不均；与 NCI-H660、LNCaP、DU145 等前列腺癌细胞培养条件完全一致，仅需在骨转移实验中添加骨微环境模拟成分（如骨基质胶、破骨细胞条件培养基），便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作需适配骨转移细胞特性：①选择对数生长期细胞（确保骨黏附特性稳定），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免损伤细胞表面黏附分子（如整合素 α2β1）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 1×10⁶-2×10⁶cells/mL；③冻存流程与其他前列腺癌细胞一致，复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 F12K 培养基重悬，直接接种，减少对骨转移表型的影响）
- 倍增时间：~25-50 hours（增殖速度范围宽，平均倍增时间快于 LNCaP（慢生长）、慢于 NCI-H660（推测快生长），对数生长期为接种后 1-2 天，需每天镜检细胞密度，待密度达 80% 时传代（避免过度密集影响骨黏附分子表达）；实验设计中可利用该增殖特性，设置不同时间节点检测药物对细胞生长的长期影响）
- 致瘤性：Yes, in semi-solid medium. Yes, tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.（致瘤性明确且高效：①体外半固体培养基集落形成能力，验证其恶性增殖特性，可用于抗骨转移药物体外活性初筛；②裸鼠高成瘤率（100%）、短成瘤周期（21 天内），适合快速构建皮下成瘤模型，若需模拟骨转移，可采用胫骨内接种（接种密度 1×10⁶cells / 只），成瘤周期延长至 3-4 周，观察骨破坏情况）
- 抗原表达情况：HLA A1, A9（明确的 HLA I 类抗原分型，可用于肿瘤免疫研究（如 T 细胞识别、免疫检查点抑制剂筛选），尤其适合骨转移微环境中的免疫逃逸机制研究；与 LNCaP（未明确 HLA）、NCI-H660（未明确 HLA）的抗原表达谱形成补充，为免疫治疗靶点的转移部位特异性研究提供数据）
- 基因表达情况：HLA A1, A9（基因表达与抗原表达一致，可通过 RT-PCR 或 Western Blot 检测验证细胞免疫表型稳定性，同时为骨转移癌的免疫诊断（如 HLA 靶向抗体）提供候选靶点）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 F12K 培养基适应性培养、酸性磷酸酶活性检测及成瘤性预实验，确保骨转移特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 NCI-H660、LNCaP 同步下单，保障 “不同转移部位 / 亚型” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况，无需特殊静置处理）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及骨转移表型漂移风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与其他前列腺癌细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①酶活性检测：开展酸性磷酸酶或 5-α- 睾丸激素还原酶相关实验时，需设置 LNCaP（高酶活性）作为阳性对照、DU145（低酶活性）作为阴性对照，通过比色法或 ELISA 法检测酶活性，验证实验体系有效性；②骨转移相关实验设计：开展骨黏附实验时，用骨基质胶包被培养板，接种 PC-3 细胞后培养 2 小时，检测黏附率，对比 NCI-H660（非骨转移）的黏附差异；构建体内骨转移模型时，选择 6-8 周龄裸鼠，胫骨内接种 1×10⁶cells / 只，接种后通过 Micro-CT 观察骨破坏程度，评估药物对骨转移的抑制效果；③与其他前列腺癌细胞的对比实验：搭配 NCI-H660（神经内分泌）、DU145（脑部转移）开展实验时，可：a. 检测转移相关基因（如 CXCR4（骨转移靶点）、MMP1（脑部转移靶点））的表达差异，分析转移器官特异性分子机制；b. 对比骨靶向药物（如唑来膦酸）对三株细胞的 IC50 值，验证药物对骨转移细胞的特异性杀伤效果；c. 分析 HLA 抗原表达对免疫细胞杀伤效率的影响，探索转移部位与免疫原性的关联；④STR 性别位点差异处理：因 Amelogenin 位点（X）与性别标注（男）存在矛盾，建议复苏后通过 SRY 基因 PCR 或染色体核型分析确认细胞实际性别，避免因性别误差影响激素相关实验（如雄激素受体表达检测）；⑤长期培养监测：每 5 代检测酸性磷酸酶活性、骨黏附能力及 HLA 抗原表达，若发现酶活性升高或黏附能力下降，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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