一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:PC-9 人肺癌细胞(STR 鉴定正确)(与 NCI-H520(肺鳞癌原发、p53 低表达)、NCI-H441(肺腺癌心包转移、33 岁男)同属肺来源肿瘤细胞,区别于 HFL-1(正常肺成纤维)、BEAS-2B(正常支气管上皮),核心特色为 “人肺腺癌 + 仍有分化特性 + DMEM 培养基 + 上皮细胞样贴壁”,是肺腺癌分化机制、肺癌病理亚型(腺癌 vs 鳞癌)差异、常规培养肺癌实验的关键模型;可与 NCI-H520(肺鳞癌原发)、NCI-H441(肺腺癌转移)、HFL-1(正常)组成 “肺细胞 – 病理亚型(腺癌 / 鳞癌)+ 转移状态(未明确 / 转移)+ 分化状态(有分化 / 未提及)+ 正常对照” 体系,探索肺腺癌分化特性对肿瘤恶性程度的影响及不同病理亚型的分子差异,同时因常规培养条件,适合开展肺癌基础实验(如药物筛选、转染))
- 细胞别称:pc-9 ; 人肺癌细胞;pc-9(别称以 “PC-9” 为核心,大小写差异为常见书写变体,统一标注便于实验记录检索;“人肺癌细胞” 需结合背景补充 “腺癌” 病理亚型,明确与 NCI-H520 的 “肺鳞癌” 差异,贴合 “肺癌细胞 + 字母数字 + 病理亚型” 体系,避免与其他器官癌细胞(如结直肠 SW 系列)混淆,精准定位肺腺癌亚型)
- 性别年龄:未明确(建议实验前通过后续补充的 STR 位点 Amelogenin 基因(若检测)或 SRY 基因 PCR 验证性别,参考临床肺腺癌高发年龄(50 岁以上)及细胞分化特性(有分化通常与相对早期肿瘤相关),推测可能为中老年个体;可通过细胞衰老标志物(如 SA-β-gal)与 NCI-H441(33 岁)、NCI-H520(中老年推测)对比,辅助判断年龄背景,避免影响性别相关实验设计(如激素对分化的调控))
- 组织来源:肺;病理亚型:肺腺癌(背景明确来源于人类腺癌肺组织,保留肺腺癌特有的 “上皮分化倾向、腺癌标志物表达、有分化特性” 特性;区别于 NCI-H520 的肺鳞癌原发灶、NCI-H441 的肺腺癌心包转移灶,可用于肺腺癌分化机制研究(如分化相关基因调控)、肺腺癌与鳞癌的病理差异对比,同时为临床肺腺癌分化相关诊疗方案优化提供实验依据)
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁生长模式与 NCI-H520、NCI-H441 一致,核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 有分化特性”:①增殖特性:10 代以内细胞增殖节奏未明确标注,结合肺腺癌常规增殖规律及有分化特性,推测倍增时间 35-50 小时(与 NCI-H441 的 30-40 小时相近,慢于部分低分化腺癌),无有限传代限制(永生化癌细胞,区别于 HFL-1 的有限细胞系);②贴壁特性:贴壁强度预计介于 NCI-H441(腺癌转移,贴壁较弱)与 NCI-H520(鳞癌原发,贴壁较强)之间,细胞呈典型上皮样铺路石样排列,因有分化特性,排列更规整;对数生长期需通过实验验证(建议接种后 24-72 小时监测细胞密度),传代需在细胞密度达 70%-80% 时进行,传代比例建议 1:2-1:3,传代时需避免过度消化,保护细胞分化相关结构)
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形,排列规整呈铺路石样,胞质丰富,因有分化特性,可能含腺癌特有的分泌颗粒(光镜下需进一步观察),核浆比小于 NCI-H520(鳞癌),体现腺癌与鳞癌的形态差异;与 NCI-H520(鳞癌上皮样、含角质小体)相比,无角质小体且排列更规整,与 NCI-H441(腺癌上皮样、含 SP-A 颗粒)相比,分化特性可能更显著(如细胞间隙更规则);可通过 “上皮样 + 有分化特性” 结合肺腺癌特异性标志物(如 TTF-1、Napsin A)快速鉴别,同时与 OS-RC-2 肾癌细胞(上皮样)通过肺腺癌标志物进一步区分)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留 “有分化特性、上皮形态、腺癌属性” 核心属性,建议传代次数不超过 12 代,防止长期传代导致特性漂移,如分化程度降低(排列紊乱)、腺癌标志物(TTF-1)表达下降、增殖速度异常(<30 小时或>55 小时))
- 背景介绍:PC-9 细胞来源于人类肺腺癌组织,核心特性及应用如下:①分化特色:至今仍有分化特性(区别于低分化肺癌细胞),可作为肺腺癌分化机制研究的理想模型,探索分化调控对肿瘤恶性程度(如侵袭、致瘤性)的影响;②应用场景:广泛用于肺腺癌基础生物学研究(如分化相关基因筛选)、肺癌病理亚型对比实验(与鳞癌 NCI-H520)、常规药物筛选(因培养条件常规,适配多数实验体系),同时可与 NCI-H441 搭配开展 “不同分化状态肺腺癌” 对比实验,分析分化与转移的关联)
- STR 鉴定:未明确具体位点信息(建议参考随货 STR 鉴定报告或通过 PCR 检测核心 STR 位点(如 Amelogenin、CSF1PO、D13S317 等),重点关注 Amelogenin 基因以确认性别,排除细胞交叉污染(如与 NCI-H 系列肺癌细胞混淆);可将检测结果与 NCI-H520、NCI-H441 的 STR 图谱对比,明确 PC-9 的独特位点,确保实验用细胞身份准确)
- 生物安全等级:1(参考同类肺肿瘤细胞(NCI-H520、NCI-H441)的安全等级,预计为 1 级,低于 HGC-27(等级 2)、WPMY-1(等级 2);操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范,实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理,避免细胞残留污染)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(计数时需轻柔吹打上皮样细胞,避免细胞团块形成,确保计数准确;冻存管含 10% 二甲基亚砜(DMSO)无血清冻存液,建议复苏后 48 小时内检测存活率(预计≥85%),且有分化特性、上皮形态无显著改变;T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%,标注 “肺腺癌,仍有分化特性,建议检测腺癌标志物”,提醒用户利用分化特性及病理亚型开展实验)
- 支原体检测:无(每批次细胞通过 PCR 法检测支原体(覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体),结果为阴性,避免支原体污染影响细胞分化、增殖及后续实验(如药物筛选、分化调控),保障与 NCI-H520、NCI-H441 平行实验的可靠性)
- 保藏机构:未明确标注(建议实验前咨询供应商获取保藏机构信息(如 ATCC、ECACC 或国内权威机构),通过保藏机构数据库查询细胞详细背景(如性别年龄、是否为原发 / 转移灶),补充完善细胞基础信息,提升实验可追溯性与结果重复性)
- 培养基:90% DMEM+10% FBS+PS(青霉素 – 链霉素)(核心特色:①采用 DMEM 培养基,与 NCI-H520 的 RPMI-1640、NCI-H441 的 RPMI-1640 显著不同;DMEM 含高糖(4.5g/L)及适配有分化肺腺癌细胞的营养配比,支持细胞分化特性维持及腺癌相关蛋白合成;②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清,避免血清中分化抑制因子影响细胞有分化特性;③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染,不影响细胞分化及增殖)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(与 NCI-H520、NCI-H441 的常规 CO₂培养条件一致,湿度维持在 70%-80%,定期更换水盘,防止培养基蒸发导致渗透压升高及血清浓度异常;培养箱内避免剧烈晃动,防止贴壁细胞脱落及影响分化状态;与其他肺肿瘤细胞培养条件兼容性高,仅需注意 DMEM 培养基的单独配置,便于多细胞株并行开展 “病理亚型对比” 实验)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作适配贴壁及分化特性:①选择对数生长期中期细胞(密度 70%,分化状态稳定、活性最佳),用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟,镜下见细胞间隙增大即可终止,轻柔吹打避免细胞破碎及分化结构破坏;②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞,用预冷的无血清冻存液重悬,调整浓度至 2×10⁶cells/mL(与 NCI-H441 一致);③冻存流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时(程序降温盒)→-80℃过夜→液氮保存;复苏时 37℃水浴 1 分钟融化,离心后用预热的 DMEM 培养基重悬,直接接种,避免 DMSO 对细胞分化相关蛋白(如 TTF-1)的影响)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、支原体检测及细胞形态验证(上皮样、有分化倾向),确保核心培养特性稳定;下单后 48 小时内可安排发货,因需 DMEM 培养基,建议用户提前准备对应培养基,避免到货后延误培养)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,采用防震恒温泡沫箱,内置 2-8℃冰袋及温度监测卡,运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动,减少贴壁细胞脱落;到达后立即放入 5% CO₂培养箱,24 小时后观察细胞贴壁状态及分化形态,48 小时内首次换液(使用 90% DMEM+10% FBS+PS 培养基),确保细胞适应环境)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,国内运输一般配备 1kg 干冰,确保到达时干冰剩余量≥60%,维持细胞冻存状态) 顺丰快递(优先选择次晨达服务,最大限度缩短运输时间,降低细胞活性损失及分化特性改变风险)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 NCI-H520、NCI-H441 等细胞限制条款一致,严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途;实验过程中需妥善处理含细胞的培养基,避免环境暴露)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞实验操作需重点关注:①分化特性研究:开展分化机制实验时,可通过免疫荧光或 Western Blot 检测分化相关标志物(如 TTF-1、Napsin A,肺腺癌分化标志物),对比与低分化腺癌细胞(如 A549)的表达差异;可通过诱导分化剂(如维甲酸,浓度梯度 1-10μM)处理细胞,检测分化标志物表达变化及细胞增殖(CCK-8)、侵袭(Transwell)能力改变,探索分化与恶性程度的关联;②病理亚型对比实验:搭配 NCI-H520(肺鳞癌)开展实验时,可:a. 检测腺癌标志物(TTF-1、Napsin A,PC-9 高表达)与鳞癌标志物(CK5/6、p63,NCI-H520 高表达)的差异,验证病理亚型特性;b. 对比两株细胞对化疗药(如培美曲塞对腺癌更敏感,吉西他滨对鳞癌更敏感)的敏感性,计算 IC50 值,为临床亚型特异性治疗提供依据;c. 检测分化相关基因(如 FOXA2,调控肺腺癌分化)的表达差异,分析分化特性的分子基础;③细胞身份验证:首次培养时,建议通过 STR 检测(覆盖至少 16 个核心位点)确认细胞身份,同时检测肺腺癌标志物,排除交叉污染;④长期培养监测:每 5 代检测细胞形态(是否维持上皮样、有分化特征)、分化标志物表达及增殖速度,若发现分化程度降低或形态异常,需立即更换低代数种子细胞;⑤培养基适配性:若实验室无 DMEM 培养基,可尝试用 DMEM/F12(1:1)培养基替代,但需提前进行小体积适应性培养(如 T25 瓶接种 1×10⁵cells),观察 2-3 代,确认细胞分化特性、形态无显著改变后再批量使用。
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