一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:PC-3-LUC-PURO(人前列腺癌细胞 – 荧光素酶标记)
细胞别称:PC-3-LUC-PURO;人前列腺癌细胞株 – 荧光素酶标记;人前列腺癌细胞 – LUC-PURO
种属来源:人
组织来源:前列腺(源于 62 岁白人男性 Ⅳ 级前列腺腺癌患者的骨头转移灶)
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以更好维持萤火虫荧光素酶(Luc)活性及前列腺癌细胞生物学特性
生物安全等级:1 级
puro 药筛浓度:该细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml;培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持,虽背景提及 “培养时不需要添加抗生素维持”,但需维持 Luc 基因稳定表达时可按此浓度添加
保藏机构:ATCC(CRL-1435、CRL-7934)、DSMZ(ACC-465)、ECACC(90112714)
背景与筛选验证
背景介绍
PC-3-LUC-PURO 细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因,稳定表达萤火虫荧光素酶,性状稳定。该细胞酸性磷酸酶活性和 5-α- 睾丸激素还原酶活性均低,可用作萤火虫荧光素酶活性检测的阳性对照,也可用于活体动物成像实验,是研究前列腺癌(尤其骨转移相关机制)、抗肿瘤药物筛选(如抗骨转移、抗增殖药物评估)的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、Luc 活性及前列腺癌相关实验结果,保障数据准确性)。
培养与冻存
- 培养基配方:F12K 培养基 + 10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗);无需额外添加特殊因子,需维持 puro 抗性与 Luc 稳定表达时,按 0.5μg/ml 浓度添加 puro,适配贴壁生长的前列腺癌细胞营养需求。
- 培养条件:
- 气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整,需确保培养箱温度、湿度稳定);
- 操作注意事项:
- 传代时用胰酶温和消化贴壁细胞,待上皮细胞样形态边缘收缩、轻晃可脱落时,立即加培养基终止消化,避免过度消化损伤细胞;
- 定期观察细胞密度,待密度达 70%-80% 时及时传代,防止过度密集导致 Luc 活性下降或细胞凋亡;
- Luc 对光稳定性较好,但仍建议避免长时间强光直射培养瓶,减少潜在荧光信号损耗。
- 冻存条件:
- 冻存液:无血清冻存液;
- 操作要点:冻存前确保细胞处于对数生长期,保留 Luc 活性与前列腺癌细胞特性;胰酶消化收集细胞后,离心重悬于冻存液,调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml;梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存);复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化,离心后用新鲜培养基重悬,避免冻存液残留对细胞的毒性影响,复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 Luc 活性。
货期与运输
细胞货期:现货,1 周左右;
运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输复苏细胞时,需使用防震包装减少颠簸,降低贴壁细胞脱落概率,保障接收后细胞活性与 Luc 表达稳定。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;开展实验时,可结合其 “骨转移灶来源” 的特性设计骨转移模型,参考成瘤验证中的活体成像参数(如底物浓度、检测时间)安排实验,利用 Luc 荧光信号精准监测肿瘤生长与药物干预效果,提升实验数据的临床相关性。


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