一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:RAW264.7-FLUC-PURO(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 – 荧光素酶标记)
细胞别称:RAW264.7-FLUC-PURO;小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株 – 荧光素酶标记;小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 – FLUC-PURO
种属来源:小鼠
组织来源:亚伯森鼠白血病病毒诱发肿瘤;腹水
生长特性:贴壁生长
细胞形态:单核细胞、巨噬细胞(混合形态,培养时需关注两种形态细胞的均衡生长)
细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以维持细胞活性、荧光标记稳定性及巨噬细胞特有的吞噬功能。
背景与筛选验证
- 背景介绍:
- 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶(FLUC),性状稳定,无需抗生素常规维持,可作为荧光素酶活性检测的阳性对照,也适用于活体动物成像实验。
- 通过慢病毒转染携带 Luc 基因,亲本 RAW 264.7 细胞源自 Abelson 鼠科白血病病毒诱导的肿瘤,具备明确免疫细胞特征:sIg-、Ia – 抗原、Thy-1.2 表面抗原阴性,不分泌可检测病毒颗粒(XC 斑点形成试验阴性)。
- 该细胞核心功能突出:可胞饮中性红、吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,能抗体依赖性分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞;经 LPS 或 PPD 处理 2 天可诱导分解红血球,适用于巨噬细胞功能研究、炎症机制及白血病相关实验。
- puro 药筛浓度:RAW264.7-FLUC 细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为4.0μg/ml,培养过程中建议使用2.0μg/ml浓度 puro 维持。需注意该细胞对 puro 耐受度高于人类细胞,需按较高浓度操作,以保障 Luc 基因稳定表达,同时不影响细胞贴壁生长及吞噬功能。
- Luciferase 活性检测:RAW264.7-LUC-PURO Luciferase 检测报告图(确认荧光素酶活性,保障荧光标记功能有效,满足实验对照与成像需求)。
细胞培养核心信息(含二级生物安全重点)
- 生物安全等级:2 级,操作需严格遵守以下要求:
- 所有细胞操作(传代、换液、诱导处理)必须在二级生物安全防护台内进行,防止气溶胶扩散;
- 因细胞源自病毒诱发肿瘤,操作后需用含有效氯的消毒剂擦拭台面,器械及废液需按医疗废弃物规范消毒;
- 操作人员需穿戴防护服、一次性手套、护目镜,避免直接接触细胞及培养液。
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。
- 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、荧光素酶活性及巨噬细胞吞噬功能实验,保障数据准确性)。
- 保藏机构:ATCC; TIB-71、ECACC; 91062702(细胞来源可追溯,确保细胞株稳定性与巨噬细胞功能可靠性)。
- 培养基:DMEM(达尔伯克改良伊格尔培养基)+ 10% FBS(胎牛血清)+ PS(青霉素 – 链霉素双抗)+ 2.0μg/ml puro(专用配方适配小鼠巨噬细胞营养需求,同时维持 Luc 基因稳定)。
- 培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整)。
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存前确保细胞消化充分且分散均匀,避免损伤巨噬细胞形态,冻存管需标注 “病毒诱发肿瘤来源,二级生物安全” 警示)。
- 细胞货期:现货,1 周左右。
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),运输包装需粘贴生物安全警示标识。
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主


评价
目前还没有评价