一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

核心操作注意事项

1. 收到细胞后，切勿立即操作，需直接放入 37℃、5% CO₂培养箱中过夜稳定；
2. 次日观察细胞状态，若出现细胞缩起、脱落或少量死亡，均属于正常现象，无需特殊处理，继续常规培养即可恢复。

背景与筛选验证

• 背景介绍：
  1. 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，无需抗生素常规维持，可作为荧光素酶活性检测的阳性对照，也适用于活体动物成像实验。
  2. 通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 RKO 细胞为低分化结肠癌细胞系，是 RKO-E6 细胞和 RKO-AS45-1 细胞的亲本株，具备典型低分化癌细胞特征。
  3. 该细胞有明确分子与功能特征：含野生型 p53（蛋白水平高于 RKO-E6 细胞），但缺乏人甲状腺受体核受体（h-TRβ1）；可在裸鼠中成瘤，且能在软琼脂中形成集落，适用于结肠癌分化机制、p53 功能及药物筛选相关研究。
• puro 药筛浓度：RKO-LUC 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。通过嘌呤霉素筛选可去除未转染细胞，低浓度维持能保障 Luc 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长、p53 功能及成瘤特性。

细胞培养核心信息

• 生物安全等级：1 级，操作风险低，符合常规实验室生物安全管理要求，无需特殊防护。
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。
• 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、荧光素酶活性及结肠癌 p53 相关实验结果，保障数据准确性）。
• 保藏机构：ATCC; CRL-2577（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性与分子特性可靠性）。
• 培养基：MEM（最小必需培养基）+ 10% FBS（胎牛血清）+ PS（青霉素 – 链霉素双抗）+ 0.5μg/ml puro（专用配方匹配低分化结肠癌细胞营养需求，同时维持 Luc 基因稳定与 p53 功能）。
• 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）。
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞处于对数生长期，保留其野生型 p53 特性与荧光表达稳定性，保障复苏后活性）。
• 细胞货期：现货，1 周左右。
• 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递。
• 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。