一、细胞基本属性
- 细胞名称：RT112 人膀胱癌细胞（与 J82 同属膀胱移行细胞癌亚型，明确标注病理分级为 G2 级，区别于 J82（未明确分级）、HT-1376（未明确亚型）、EJ-1（未明确亚型），是膀胱癌移行细胞癌中分化（G2）亚型研究的专属模型，可与 J82（推测分级不同）组成 “同亚型 – 不同分级 / 性别” 实验体系，探索病理分级对膀胱癌生物学特性的影响）
- 细胞别称：RT 112; RT112；RT-112；人膀胱癌细胞（别称以 “RT” 为核心前缀，与 J82（“J” 前缀）、HT-1376（“HT-” 前缀）、EJ-1（“EJ-” 前缀）形成清晰区分，简洁的数字后缀便于实验记录及文献检索，贴合泌尿生殖系统肿瘤细胞株命名体系）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；年龄未知（明确女性来源，与 J82（58 岁男）形成性别对照，填补膀胱移行细胞癌女性模型的空白；虽年龄未知，但可通过生长特性、药物敏感性与 J82（中年）、EJ-1（高龄）间接对比，为膀胱癌性别差异机制研究提供关键模型）
- 组织来源：膀胱癌（病理亚型明确为移行细胞癌，且 histological grade G2（中分化），中分化是膀胱癌临床常见分级（占比约 40%-50%），保留中分化肿瘤特有的 “增殖与分化平衡” 特性，可用于病理分级相关研究，如中分化与高 / 低分化细胞在化疗敏感性、侵袭能力上的差异）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏与中分化特性匹配（介于高分化缓慢、低分化快速之间），贴壁强度与 J82、HT-1376、EJ-1 相近，传代操作可参考膀胱癌细胞通用流程，便于与其他膀胱癌细胞株同步开展平行实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整，具备中分化移行细胞癌典型的上皮细胞形态特征，无低分化细胞的核浆比异常增大、结构紊乱等现象；与 J82（无桥粒、有突出绒毛）相比，形态更接近正常膀胱上皮细胞，可通过形态观察初步判断细胞分化状态及纯度，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留中分化移行细胞癌的原始生物学特性，如病理分级表型、成瘤能力等，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致分级特性漂移，如分化程度降低、侵袭能力异常增强）
- 推荐换液频率：2~3 次 / 周（适配中分化细胞的代谢节奏，低于低分化细胞（如 ACHN，需 1-2 天换液），高于高分化细胞（如部分正常上皮细胞，1 次 / 周）；换液频率明确，可直接作为实验操作标准，避免因换液不当影响细胞状态，同时与其他膀胱癌细胞（多未明确换液频率）形成操作差异对照）
- 背景简介：RT112 细胞于 1973 年建系，源自一位未经治疗的原发性膀胱癌女性患者的移行细胞癌（中分化 G2）组织，核心特性及应用如下：①建系与分级特色：建系历史悠久（超过 50 年），生物学特性经长期验证稳定；中分化 G2 分级明确，可用于膀胱癌分化调控机制研究（如诱导分化药物筛选）、分级相关标志物挖掘（如中分化专属基因表达谱）；②成瘤特性：文献报道可在裸鼠中形成肿瘤，成瘤能力与中分化特性匹配（成瘤速度适中、肿瘤组织形态接近临床中分化癌），适用于体内中分化膀胱癌模型构建、分级专属药物体内 efficacy 评估；③应用场景：广泛用于移行细胞癌中分化亚型基础研究（如分化相关信号通路调控）、临床转化研究（如模拟中分化患者化疗方案优化），同时可与 J82（男性、推测分级不同）搭配开展性别差异实验，与 HT-1376、EJ-1 开展亚型对比实验，丰富膀胱癌研究维度。
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后中分化特性（如形态、换液频率适配性）无显著改变，确保与其他膀胱癌细胞实验起始条件一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型（如肺炎支原体、人型支原体），结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染影响细胞生长及中分化特性相关实验结果）
- 保藏机构：DSMZ; ACC-418（国际权威机构 DSMZ 独家保藏，编号 ACC-418 为该细胞专属标识，细胞来源可追溯性强，基因型及中分化特性经过严格验证，与 J82（ATCC + 国内保藏）、HT-1376（未明确国际保藏）的保藏体系互补，便于跨地域实验协作及文献结果复现）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+1% 双抗（青霉素 – 链霉素）（核心特色：采用 RPMI-1640 培养基，区别于 J82 的 DMEM、HT-1376 的 MEM、EJ-1 的专用培养基；RPMI-1640 含有的氨基酸组成更适配中分化细胞的代谢需求，可维持其分化状态稳定；10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中分化诱导 / 抑制因子影响细胞分级表型；1% 双抗有效预防细菌污染，且不影响细胞活性，无需额外验证适配性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；与 J82、HT-1376、EJ-1、OS-RC-2 等泌尿生殖系统相关细胞培养条件完全一致，确保 “同亚型不同分级”“不同器官肿瘤” 对照实验环境的统一性）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程与其他膀胱癌细胞一致：①对数生长期细胞消化离心，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；②分装后 4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议用程序降温盒，减少低温对分化表型的影响）→-80℃过夜→转入液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟内融化，离心去除冻存液，用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，避免 DMSO 对细胞的毒性影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、中分化形态验证及成瘤性预实验，确保移行细胞癌 G2 亚型特性稳定，下单后 48 小时内可安排发货，可与 J82、HT-1376 同步下单，保障平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用恒温泡沫箱内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，因中分化细胞适应能力较强，24 小时后观察细胞贴壁情况，3 天内按 “2~3 次 / 周” 换液频率首次换液）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及中分化表型改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求；实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基使用：严格遵循 “RPMI-1640+10% FBS+1% 双抗” 配方，不可与 J82 的 DMEM、HT-1376 的 MEM、EJ-1 的专用培养基混用；RPMI-1640 无需额外添加分化调控因子，避免干扰中分化表型；双抗终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，直接添加即可，简化培养流程；②换液与传代：严格按 “2~3 次 / 周” 换液，换液时保留 1/3 旧培养基（含细胞分泌的分化维持因子），避免完全换液导致分化状态紊乱；传代时机选择细胞密度达 70%-80%（中分化细胞密度过高易导致分化降低），消化时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，用含血清的 RPMI-1640 培养基中和胰酶，轻柔吹打避免细胞破碎；传代比例建议 1:2-1:3，接种密度控制在 2×10⁵cells/T25，适配中分化细胞生长节奏；③中分化特性实验设计：开展分化相关实验时，可检测中分化标志物（如 CK18、UPK2）的表达，设置高分化（如 RT4 膀胱癌细胞）、低分化（如 T24 膀胱癌细胞）对照，验证 RT112 的中分化表型；研究病理分级与药物敏感性关系时，对比 RT112（G2）与 J82（推测 G3）对顺铂、吉西他滨的 IC50 值，分析中分化细胞是否更易从化疗中获益；④与 J82 的性别差异实验：搭配 J82（男）开展性别相关研究，如检测性激素受体（如 ERβ、AR）表达差异，分析性激素对不同性别膀胱癌细胞生长的影响；对比两者在免疫原性上的差异（如 HLA 抗原表达谱），为性别专属免疫治疗方案提供依据；⑤污染防控：实验操作在超净工作台内进行，RPMI-1640 培养基、耗材单独存放，避免与其他膀胱癌细胞的培养基交叉使用，防止细胞交叉污染；定期对培养基、培养箱进行无菌检测，同时通过形态观察及分化标志物检测验证细胞中分化特性稳定性，确保实验结果可靠。
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