一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：RWPE-1-FLUC-puro 人正常前列腺上皮细胞 (FLUC 标记)
种属来源：人
年龄性别：男；54 岁
组织来源：前列腺正常细胞（非癌细胞，保留正常前列腺上皮细胞生物学特性）
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代，更好维持荧光素酶（FLUC）活性及正常细胞生理功能）
药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 2.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 1.0μg/ml puro 维持，保障 FLUC 基因稳定表达
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞正常增殖、FLUC 活性及实验结果，保障数据准确性）
背景与筛选验证
背景介绍
RWPE-1-FLUC-puro 细胞为人正常前列腺上皮细胞，通过稳定表达荧光素酶（FLUC）实现追踪，性状稳定，无癌细胞恶性增殖特性。该细胞可作为前列腺相关实验的 “正常对照细胞”，用于对比前列腺癌细胞与正常细胞的差异（如药物敏感性、基因表达），也可用于前列腺生理机制研究、毒性评估实验，或作为 FLUC 活性检测的阳性对照。
细胞培养核心信息
基础参数
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株来源可靠、无交叉污染，维持正常前列腺上皮细胞属性。
培养与冻存
培养基配方（需严格遵循，保障正常细胞生长）
- 基础培养基：K-SFM（角质形成细胞无血清培养基，必需专用培养基，不可用普通培养基替代）
- 必需添加因子：0.05mg/ml BPE（牛垂体提取物）+5ng/ml EGF（表皮生长因子），两者为维持正常上皮细胞形态与功能的关键成分，不可省略或调整浓度
- 其他添加：PS（青霉素 – 链霉素双抗），预防污染；需维持 puro 抗性时，额外添加 1.0μg/ml puro
培养条件
气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，需确保培养箱温度、湿度稳定，避免环境波动影响正常细胞生长状态）；
操作注意事项
- 传代操作：正常细胞生长速度慢于癌细胞，待细胞密度达 70%-80% 时传代；用胰酶温和消化，待上皮细胞样形态边缘收缩、轻晃可脱落时，立即加含 BPE/EGF 的培养基终止消化，避免过度消化损伤细胞；
- 因子活性保护：BPE 与 EGF 易失活，培养基需现配现用，或配置后 4℃冷藏（不超过 3 天），避免反复冻融；
- FLUC 防护：FLUC 对光稳定性较好，但仍建议避免长时间强光直射培养瓶，减少潜在荧光信号损耗；
- 避免过度传代：正常细胞体外培养寿命有限，10 代以内细胞状态最佳，超过代次可能出现细胞老化、功能异常，需控制传代次数。
冻存与复苏
- 冻存液：无血清冻存液；
- 冻存要点：选择对数生长期的正常细胞（状态最佳），胰酶消化后用含 BPE/EGF 的培养基清洗 1 次，再用冻存液重悬，调整密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存），避免降温过快损伤正常细胞；
- 复苏要点：从液氮取出后立即放入 37℃水浴融化（约 1-2 分钟），1000rpm 离心 5 分钟弃冻存液，用含 BPE/EGF 与 1.0μg/ml puro 的新鲜培养基重悬；复苏后细胞贴壁较慢，需静置 24-48h 再观察，优先确认细胞贴壁情况、上皮细胞样形态（无老化迹象）及 FLUC 活性。
货期与运输
细胞货期：现货，1 周左右；
运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；
运输注意事项：复苏细胞运输时用防震包装减少颠簸，避免贴壁细胞脱落；同时保障运输温度稳定（避免高温或低温），防止正常细胞因环境应激出现状态异常，接收后需立即放入 37℃ CO₂培养箱。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用；不可用于癌细胞相关的恶性转化实验，需严格维持其正常细胞属性。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；因该细胞为正常前列腺上皮细胞，与前列腺癌细胞培养要求差异较大（如必需 K-SFM 培养基与添加因子），需严格区分操作流程；开展实验时，可利用其正常细胞特性与 FLUC 标记优势，构建 “正常 – 癌变” 对比模型，精准研究前列腺疾病机制。
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