一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:Saos-2 人成骨肉瘤细胞
核心特色:11 岁女性骨肉瘤(骨来源)+ 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 + MCCOYS 5A+15% FBS+1% 双抗(高血清培养基,不可替换)+~48 小时倍增 + 多机构保藏(ATCC CRL-7939/HTB-85、DSMZ ACC-243、ECACC 89050205)+ 免疫抑制小鼠不成瘤但半固体培养基成集落 + 表达 EGF/TGF-β(1/2 型)受体,可与 MG-63(成骨肉瘤 / 贴壁 / EMEM/10% FBS / 免疫抑制小鼠致瘤)、U-2OS(成骨肉瘤 / 贴壁 / MEM/10% FBS / 致瘤)组成对比体系,用于骨肉瘤药物耐药研究(患者曾多药治疗)、成骨肉瘤致瘤性差异机制、高血清适应型肿瘤细胞实验及骨肿瘤基础研究。 - 细胞别称:SAOS-2;Saos 2;Saos2;SaOs2;SAOS2;Sarcoma OSteogenic-2;SaOS;SAOS
标注 “成骨肉瘤(骨来源,11 岁女性,多药治疗史)+ 贴壁上皮样 + MCCOYS 5A+15% FBS + 半固体成集落”,区别于致瘤性成骨肉瘤细胞(MG-63/U-2OS),规避致瘤性特征及培养基选择混淆。 - 种属来源:人(STR 位点验证,种属纯净无交叉污染,保障成骨肉瘤细胞贴壁能力、上皮形态、MCCOYS 5A 培养基适应及受体表达稳定性,适配骨肉瘤基础研究、药物筛选场景)
- 年龄性别:女,11 岁(明确患者年龄性别及多药治疗史,适配儿童骨肉瘤发病机制、药物耐药相关研究)
- 组织来源:骨(骨肉瘤组织,源于 11 岁女性患者,患者曾接受 RTG、甲氨蝶呤、阿霉素、长春新碱、环磷酰胺、阿霉素 – C 等多种药物治疗),保留骨肉瘤特有的恶性增殖属性及药物暴露背景,核心优势为 “儿童骨肉瘤来源 + 多药治疗史 + 非致瘤但成集落”,适配儿童骨肉瘤研究、药物耐药机制及成骨肉瘤致瘤性调控实验。
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁,高血清依赖)
0.25% 胰酶 37℃孵育 4-6 分钟消化(上皮细胞贴壁中等紧密,高血清培养细胞消化敏感性略低,需避免过度消化),汇合度 80%-90% 时按 1:2-1:3 传代(因倍增~48 小时,传代间隔 2-3 天);细胞密度维持在 1×10⁴-3×10⁴cells/cm²(密度过低易凋亡,过高易出现接触抑制),每 48 小时换液 1 次(高血清营养消耗快,需及时补加),适合开展骨肉瘤药物耐药相关实验(如多药耐药基因检测)。 - 细胞形态:上皮细胞样(呈多边形,胞质均匀,排列较紧密,具成骨肉瘤上皮样形态特征,与 MG-63 的 “上皮样(略梭形,致瘤)”、U-2OS 的 “上皮样(规则排列,致瘤)” 形态相比,可通过 “非致瘤性 + MCCOYS 5A 培养基” 快速鉴别,适配骨肉瘤形态学验证及纯度检测实验)
- 背景简介:人成骨肉瘤细胞系,由 J. Fogh 和 G.Trempe 分离鉴定,贴壁生长呈上皮细胞样,需 MCCOYS 5A+15% FBS+1% 双抗培养基稳定培养;源于 11 岁女性多药治疗后骨肉瘤患者,具特殊致瘤特征:免疫抑制小鼠体内不成瘤,但半固体培养基中可形成集落(体现锚定非依赖性生长能力);表达 EGF 受体及 TGF-β1/2 型受体,血型为 B 型、Rh 阳性,HLA 分型为 A2、A3、Bw16、Bw47;无 MG-63/U-2OS 的致瘤性,是研究儿童骨肉瘤、药物耐药及成骨肉瘤致瘤性差异的理想模型,可与致瘤性骨肉瘤细胞对比探索致瘤关键通路。
- STR 位点信息:Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:12,13;D16S539:12,13;D18S51:15;D19S433:13;D21S11:28,30;D2S1338:18;D3S1358:14,18;D5S818:12;D7S820:8,10;D8S1179:10,12;FGA:22,25;TH01:6,9;TPOX:8;vWA:18(可与 ATCC CRL-7939 标准 STR 图谱比对,确认成骨肉瘤细胞身份,排除其他骨肿瘤或上皮细胞污染)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管,复苏后存活率≥80%,48 小时贴壁率≥90%,需镜检确认上皮细胞样形态占比(≥85%),排除梭形杂细胞污染。
- 支原体检测:无(经 PCR 法或培养法检测,确认无支原体污染,避免影响骨肉瘤细胞增殖及药物耐药实验结果准确性)
- 保藏机构:ATCC; CRL-7939、ATCC; HTB-85、DSMZ; ACC-243、ECACC; 89050205(国内外权威机构保藏,细胞成骨肉瘤属性、非致瘤特征及多药治疗背景经验证,可追溯性强,适配实验细胞来源合规性要求)
- 培养基:MCCOYS 5A 培养基 + 15% FBS+1% 双抗(青霉素 – 链霉素,浓度 100U/mL 青霉素 + 100μg/mL 链霉素);核心注意:不可替换为 EMEM/MEM 等其他培养基(MCCOYS 5A 含特殊氨基酸配比,适配骨肉瘤细胞代谢需求;15% 高血清为必需条件,低于 12% 易导致细胞活力下降、集落形成能力丧失);血清选低内毒素≤10EU/mL,开封后 2 周内用完,保障细胞形态及功能稳定。
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃,湿度 70%-80%;每 48 小时换液 1 次(沿培养瓶壁缓慢加液,避免冲击贴壁细胞);培养箱温度波动需≤±0.5℃,防止影响 EGF/TGF-β 受体表达及集落形成能力。
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮(-196℃)中长期储存;冻存液需额外添加 15% FBS(匹配常规培养血清浓度,提升复苏存活率);细胞浓度 2×10⁶cells/mL,梯度降温流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃ 4 小时→-80℃过夜→转入液氮;复苏时 37℃水浴 1 分钟溶解,离心后用新鲜 MCCOYS 5A 培养基重悬,复苏后 72 小时观察细胞贴壁及活性(高血清细胞复苏恢复时间略长)。
- 倍增时间:~48 小时(成骨肉瘤细胞中等倍增速率,实验设计需预留充足时间,如药物干预实验需延长至 72 小时检测;可通过细胞计数法绘制生长曲线,验证本实验室条件下的实际倍增时间,偏差需≤10%)
- 致瘤性:No(免疫抑制小鼠体内不成瘤);Yes(半固体培养基中可形成集落,体现肿瘤细胞部分恶性特征,适配成骨肉瘤锚定非依赖性生长机制研究)
- 受体表达情况:epidermal growth factor (EGF) receptor(表达 EGF 受体,参与细胞增殖调控);transforming growth factor beta (Type 1 and Type 2) receptor(表达 TGF-β1 型和 2 型受体,参与骨肉瘤细胞分化、迁移调控)
- 抗原表达情况:Blood Type B, Rh+(血型 B 型、Rh 阳性,可用于细胞来源追溯);HLA A2, A3, Bw16, Bw47(HLA 分型明确,适配免疫相关实验如肿瘤免疫逃逸研究)
- 染色体:46~88(异倍体核型,符合骨肉瘤细胞遗传学特征,每 5 代可通过核型分析验证,适配骨肉瘤遗传学研究)
- 运输方式:复苏发货(T25 培养瓶包装,免运输费用,标注 “含 MCCOYS 5A 高血清培养基,运输后 48 小时再镜检”,避免短时间内误判细胞活性);冻存发货(1mL 冻存管包装,需额外支付干冰运输费用),默认顺丰快递(优先冷链运输,确保高血清细胞活性稳定)。
- 供应限制:仅限于科学研究使用(包括儿童骨肉瘤机制、多药耐药研究、成骨肉瘤致瘤性差异、骨肿瘤药物筛选等),绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用,亦不可用于临床诊断或非科研用途。
- 特别说明:① 首次培养需三验证:STR 分型比对(与 ATCC CRL-7939 一致)、镜检上皮形态纯度(≥85%)、半固体培养基集落形成实验(集落形成率≥10%),确认成骨肉瘤细胞属性;② 培养基不可随意替换,MCCOYS 5A 与 EMEM/MEM 成分差异大,替换会导致细胞死亡;③ 适配实验方向:儿童骨肉瘤多药耐药基因(如 MDR1)检测、EGF/TGF-β 通路调控骨肉瘤增殖研究、成骨肉瘤致瘤性关键基因筛选(与 MG-63/U-2OS 对比),也可作为非致瘤性骨肉瘤模型,优化骨肿瘤体外实验参数(如集落形成实验条件)。


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