一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞
核心特色:4 岁女性脑神经母细胞瘤(骨髓转移)来源 + 半贴壁生长(贴壁 + 悬浮共存)+ 上皮细胞样形态 + 专用培养基 + 48-72 小时倍增 + 81~92 条染色体 + 多巴胺 -β- 羟基酶活性 + 血型 A/Rh+ +10 代以内代数,可与 hacat(62 岁男皮肤永生化角质细胞 / DMEM / 纯贴壁)、293T(人胚肾工具细胞 / DMEM / 纯贴壁)组成 “细胞类型(神经母细胞瘤 – 皮肤永生化细胞 – 胚肾工具细胞)+ 生长方式(半贴壁 – 纯贴壁 – 纯贴壁)+ 组织来源(脑 / 骨髓转移 – 皮肤 – 肾)+ 年龄性别(4 岁女 – 62 岁男 – 无明确)+ 功能特性(神经酶活性 – 角质形成 – 基因转染)” 对比体系,用于神经母细胞瘤机制、半贴壁细胞培养适配性、儿童神经肿瘤特性及跨组织细胞差异研究。
- 细胞别称:SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y;人神经母细胞瘤细胞
标注 “4 岁女神经母细胞瘤(骨髓转移)+ 半贴壁 + 专用培养基 + 多巴胺酶活性”,区别于 hacat 的 “62 岁男皮肤 + 纯贴壁 + DMEM + 角质蛋白阳性”、293T 的 “胚肾 + 纯贴壁 + DMEM + 高转染效率” 标识,凸显儿童神经肿瘤属性及半贴壁生长特性,规避与纯贴壁细胞的操作混淆。
- 种属来源:人(无交叉污染风险,种属纯净,保障神经母细胞瘤特有的半贴壁能力、上皮形态、专用培养基适应能力、多巴胺 -β- 羟基酶活性及核型稳定,与 hacat、293T 的种属来源一致,无细胞污染问题,适配儿童神经肿瘤研究、神经细胞功能模拟及半贴壁细胞培养实验场景)
- 性别年龄:女;4 岁(幼儿女性阶段,填补 3-5 岁幼儿女性神经母细胞瘤模型空白,与 hacat 的 “62 岁男” 形成 “幼儿 – 老年” 年龄梯度、“女 – 男” 性别差异,与 293T 的 “未明确性别年龄” 形成 “明确幼儿 – 无明确” 对比,适配儿童神经母细胞瘤诊疗研究,尤其适合幼儿肿瘤增殖机制、神经发育关联肿瘤实验,排除年龄性别混杂因素)
- 组织来源:脑神经母细胞瘤(转移部位:骨髓,与 hacat 的 “皮肤”、293T 的 “肾” 形成组织来源本质差异,保留神经母细胞瘤特有的转移属性及神经细胞功能(如多巴胺酶活性),区别于 hacat 的皮肤角质形成功能或 293T 的工具细胞属性,核心优势为可模拟神经肿瘤转移后的细胞特性,适配神经母细胞瘤转移机制、骨髓微环境与肿瘤相互作用实验)
- 生长特性:半贴壁生长(核心生长特性差异,贴壁 + 悬浮细胞共存,与 hacat、293T 的纯贴壁生长形成本质区别)
① 倍增时间~48-72 小时(明确倍增,慢于 hacat 推测的 36-48 小时、293T 的 24-30 小时,适配幼儿神经肿瘤缓慢增殖节奏,符合半贴壁细胞代谢异质性特征);② 需分步骤处理(贴壁细胞:0.25% 胰酶 37℃孵育 5-8 分钟消化;悬浮细胞:直接收集上清离心),细胞总密度达 1×10⁶cells/cm²(饱和密度)时按 1:2 传代(贴壁与悬浮细胞按 1:1 比例混合传代,维持半贴壁状态);传代后 24-36 小时内贴壁细胞稳定附着,悬浮细胞均匀分布,需同步观察两类细胞比例(建议贴壁:悬浮 = 6:4~7:3),避免单一形态细胞过度增殖导致特性丢失。
- 细胞形态:上皮细胞样(贴壁细胞呈多边形,胞质含神经相关颗粒,排列松散;悬浮细胞呈圆形,体积略小于贴壁细胞,与 hacat 的 “纯贴壁上皮样(角质颗粒)”、293T 的 “纯贴壁上皮样(均一无颗粒)” 形态相比,具 “贴壁 – 悬浮” 形态异质性,可通过 “半贴壁 + 多巴胺酶活性 + 儿童神经肿瘤来源” 快速鉴别,适配神经母细胞瘤形态学观察及半贴壁细胞纯度验证实验)
- 细胞代数:10 代以内(避免半贴壁比例失衡、上皮形态漂移、多巴胺 -β- 羟基酶活性丢失及核型异常,与 hacat、293T 的代数要求一致;因半贴壁细胞易出现单一形态优势,代数控制更严格,需每 3 代通过细胞计数验证贴壁 – 悬浮比例(维持 6:4~7:3),确保核心生长特性稳定)
- 背景简介:1970 年源自神经母细胞瘤 SK-N-SH 细胞系的三次克隆亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y),具骨髓转移属性,中等水平多巴胺 -β- 羟基酶活性(神经细胞标志物),饱和密度>1×10⁶cells/cm²,无 hacat 的永生化改造或 293T 的基因修饰,是研究儿童神经母细胞瘤、神经肿瘤转移机制、半贴壁细胞培养及神经酶活性调控的理想模型;可与 hacat 对比探索 “神经肿瘤 – 皮肤永生化细胞” 的代谢差异,或与 293T 构建 “半贴壁 – 纯贴壁” 细胞操作对比模型,评估不同生长方式对药物敏感性的影响。
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶(含贴壁 + 悬浮细胞,比例 6:4~7:3)或 1mL 冻存管,复苏后总存活率≥80%(贴壁细胞存活率≥75%,悬浮细胞存活率≥85%,与 hacat、293T 的存活率标准一致;复苏后需 48 小时观察半贴壁比例恢复情况,同步验证多巴胺 -β- 羟基酶活性(比色法检测酶活性≥10U/L),确保细胞属性稳定)
- 支原体检测:无(明确排除微生物污染,与 hacat 的 “阴性”、293T 的 “无支原体” 标准一致;半贴壁细胞因形态异质性,污染易被掩盖,需每 2 代通过 PCR 法复测支原体,避免污染影响神经酶活性及半贴壁比例)
- 保藏机构:ATCC; CRL-2266,DSMZ; ACC-209,ECACC; 94030304;中国典型培养物保藏中心细胞库(国际 + 国内多机构保藏,神经母细胞瘤特性及半贴壁状态经多机构验证,与 hacat 的国内保藏、293T 的国际 + 国内保藏形成互补,可追溯性强,适配儿童神经肿瘤实验的细胞来源合规性要求)
- 培养基:SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞专用培养基(核心配方差异,专用培养基含神经细胞生长必需的神经营养因子(如 NGF),区别于 hacat 的 “DMEM”、293T 的 “DMEM”,不可混用;培养基需现配现用,开封后 1 周内用完,避免神经营养因子失活,无需像 hacat 那样控制血清激素含量)
- 培养条件:95% 空气 + 5% 二氧化碳,37℃,湿度 70%-80%(与 hacat、293T 培养环境参数一致,无需额外调整;半贴壁细胞对气体环境敏感,培养箱 CO₂浓度波动需≤±0.2℃,湿度稳定在 75%±5%(防止悬浮细胞脱水);因倍增慢且需维持半贴壁比例,每 48 小时更换 1 次培养基(更换时保留 1/3 旧培养基,减少对悬浮细胞的刺激),无需像 293T 那样频繁换液)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(2×10⁶cells/mL,贴壁与悬浮细胞按 7:3 比例混合冻存,高于 hacat、293T 的密度;4℃平衡 30 分钟→-20℃ 4 小时→-80℃过夜→液氮储存;冻存前需确保两类细胞活性(贴壁≥80%,悬浮≥90%),添加 5% DMSO+10% FBS 提升抗冻性,避免单一形态细胞冻存导致复苏后比例失衡)
- 染色体与功能特征:① 染色体:81~92 条(异倍体,每 5 代通过核型分析验证,区别于 hacat 的 72~88 条、293T 的未明确核型,适配神经母细胞瘤遗传学研究);② 酶活性与血型:多巴胺 -β- 羟基酶活性阳性(可通过比色法或 Western Blot 验证,酶活性≥10U/L,神经细胞核心功能标志物);血型 A/Rh+(可通过血型抗原检测确认,区别于 hacat、293T 的未明确血型,适配血液肿瘤相关共培养实验)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,因含悬浮细胞,需标注 “避免剧烈震动”,运输后需立即观察悬浮细胞是否沉淀,必要时轻柔摇晃混匀);冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 hacat、293T 限制条款一致;额外需强调:虽为幼儿来源神经肿瘤细胞,但不可用于儿童临床治疗或人体干预实验,严禁用于非科研目的的神经相关研究)
- 特别说明:① 半贴壁操作:换液时先收集上清(含悬浮细胞),再用 PBS 轻柔冲洗贴壁细胞(避免冲走悬浮细胞),添加新鲜培养基后回补收集的悬浮细胞;传代时需分别计数贴壁与悬浮细胞,按比例混合接种,防止单一形态细胞过度增殖;② 功能验证:首次培养通过比色法检测多巴胺 -β- 羟基酶活性(≥10U/L),核型分析验证染色体数目(81~92 条占比≥80%),镜检确认半贴壁比例(6:4~7:3),确保细胞核心特性稳定;③ 实验适配:适合儿童神经母细胞瘤增殖机制研究、神经肿瘤转移模型构建(如骨髓基质共培养)、多巴胺相关神经疾病药物筛选(作为神经肿瘤模型)、半贴壁细胞培养方法优化;可与 hacat 同步开展 “神经肿瘤 – 皮肤细胞” 药物毒性对比,或与 293T 探索 “半贴壁 – 纯贴壁” 细胞对转染试剂的响应差异,也可作为神经酶活性模型用于神经递质代谢研究。


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