一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:SK-MEL-1 人皮肤黑色素瘤细胞(STR 鉴定正确)
核心特色:29 岁男性白人恶性黑色素瘤(淋巴系统转移灶,胸导管分离)+ 悬浮生长(区别于多数贴壁黑色素瘤细胞)+ 球形细胞样形态 + 90% MEM (含 NEAA)+10% FBS+1% PS(NEAA 为必需成分)+~100 小时慢倍增 + 可产黑色素(色素颗粒与合成 / 吞噬相关)+ATCC HTB-67/DSMZ ACC-303 双保藏 + 裸鼠 / 可的松处理仓鼠成瘤(色素性恶性黑色素瘤),可与 A375(黑色素瘤 / 贴壁 / DMEM / 中倍增~48h / 少产黑色素)、M14(黑色素瘤 / 贴壁 / RPMI-1640 / 中倍增~60h / 产黑色素)组成对比体系,用于悬浮型黑色素瘤机制研究、淋巴转移灶特性、慢倍增肿瘤细胞实验及黑色素合成调控研究。 - 细胞别称:SK-Mel-1;SK Mel 1;SK-Mel 1;SK-Mel1;SKMEL-1;SkMEL-1;SKMEL1;SK 1
标注 “恶性黑色素瘤(淋巴转移灶,29 岁男性)+ 悬浮球形 + MEM (含 NEAA)+ 慢倍增 + 产黑色素”,区别于贴壁黑色素瘤细胞(A375/M14),规避生长特性(悬浮 vs 贴壁)及倍增速率混淆。 - 种属来源:人(STR 鉴定正确,种属纯净无交叉污染,保障悬浮黑色素瘤细胞活性、球形形态、NEAA 依赖型培养基适应及黑色素合成稳定性,适配悬浮肿瘤基础研究、黑色素调控实验场景)
- 年龄性别:男性,29 岁(明确患者年龄性别及转移背景,适配年轻男性黑色素瘤转移机制、恶性进展快速型肿瘤研究)
- 组织来源:皮肤(恶性黑色素瘤,源于 29 岁白人男性患者淋巴系统转移灶,从胸导管分离建立),保留黑色素瘤淋巴转移特有的侵袭属性、快速进展特征,核心优势为 “悬浮生长 + 淋巴转移来源 + 产黑色素 + 慢倍增”,适配黑色素瘤淋巴转移机制、悬浮肿瘤细胞代谢及黑色素合成通路实验。
- 生长特性:悬浮生长(纯悬浮,无需胰酶消化,操作核心为密度控制)
直接 1000rpm 离心 5 分钟收集传代(避免胰酶损伤悬浮细胞),细胞密度维持在 1×10⁵-5×10⁵cells/mL(密度过低易凋亡,过高易聚集;慢倍增特性需延长培养周期,传代间隔 4-5 天);每 48 小时轻轻摇匀培养瓶 1 次,避免细胞沉降;换液时保留 1/3 旧培养液(含分泌型生长因子,维持黑色素合成能力),适合开展悬浮肿瘤细胞侵袭(如 Transwell 无基质胶实验)、黑色素合成调控实验。 - 细胞形态:球形细胞样(呈圆形或类圆形,胞质含黑色素颗粒(镜下可见棕褐色颗粒),悬浮状态下呈单个或松散小簇分布,与 A375 的 “上皮样(贴壁,多角形)”、M14 的 “梭形 / 上皮样(贴壁)” 形态差异显著,可通过 “悬浮球形 + 黑色素颗粒” 快速鉴别,适配黑色素瘤形态学验证及纯度检测实验)
- 背景简介:人皮肤恶性黑色素瘤细胞系(STR 鉴定正确),由 Oettgen F 团队从 29 岁快速进展性黑色素瘤男性患者胸导管分离建立;纯悬浮生长呈球形细胞样,需 90% MEM (含 NEAA)+10% FBS+1% PS 培养基培养;核心特征:① 可合成黑色素,电镜可见色素颗粒(与自身合成、吞噬作用相关);② 63% 黑色素瘤患者、10% 其他疾病患者体内存在针对该细胞的抗体(具免疫相关性);无 A375/M14 的贴壁属性,是研究悬浮型黑色素瘤、淋巴转移及黑色素合成的理想模型,可与贴壁黑色素瘤细胞对比探索生长特性对药物敏感性的影响。
- STR 位点信息:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:13,16;D19S433:15,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,23;D3S1358:14,16;D5S818:12,13;D7S820:12;D8S1179:16;FGA:18,20;TH01:6;TPOX:11;vWA:16,17(可与 ATCC HTB-67 标准 STR 图谱比对,确认淋巴转移灶黑色素瘤身份,排除贴壁黑色素瘤细胞污染)
- STR 鉴定图片:SK-MEL-1 人皮肤黑色素瘤细胞 STR 鉴定图片(通过图谱比对验证细胞真实性,确保无交叉污染)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶(悬浮状态,含培养液)或 1mL 冻存管,复苏后存活率≥75%,24 小时内恢复悬浮均一性(聚集率≤15%),需镜检确认含黑色素颗粒的球形细胞占比(≥85%),确保悬浮黑色素瘤属性。
- 支原体检测:无(经 PCR 法或培养法检测,确认无支原体污染,避免影响悬浮细胞增殖及黑色素合成实验结果准确性)
- 保藏机构:ATCC; HTB-67、DSMZ; ACC-303(国际权威机构保藏,细胞悬浮特性、黑色素合成能力及致瘤性经验证,可追溯性强,适配实验细胞来源合规性要求)
- 培养基:90% MEM (含非必需氨基酸 NEAA)+10% FBS+1% PS(NEAA 为核心必需成分:缺失会导致细胞黑色素合成能力下降、活力骤降;MEM 基础培养基不可替换为 DMEM/RPMI-1640,血清选低内毒素≤10EU/mL,开封后 2 周内用完,保障细胞形态及黑色素合成稳定)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃,湿度 70%-80%;每 48 小时换液 1 次(离心收集细胞后,用新鲜培养基重悬,保留 1/3 旧液);培养瓶需预留 1/2 空间确保气体流通,避免密闭环境导致细胞缺氧。
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮(-196℃)中长期储存;冻存液需额外添加 10% FBS+NEAA(匹配常规培养条件,提升复苏后黑色素合成能力保留率),细胞浓度 2×10⁶cells/mL;梯度降温流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃ 4 小时→-80℃过夜→转入液氮;复苏时 37℃水浴 1 分钟快速溶解,直接加入含 NEAA 的 MEM 培养基(无需离心),减少对悬浮细胞的机械损伤。
- 倍增时间:~100 小时(慢倍增特性,实验设计需预留充足时间,如药物干预实验需延长至 96-120 小时检测;可通过细胞计数法绘制生长曲线,验证本实验室条件下的实际倍增时间,偏差需≤15%)
- 致瘤性:Yes(① 裸鼠体内成瘤,形成色素性恶性黑色素瘤;② 可的松处理仓鼠颊囊内成瘤,体现强恶性特征,适配黑色素瘤体内药效验证实验)
- 抗原表达情况:Blood Type A; Rh+(血型 A 型、Rh 阳性,可用于细胞来源追溯及免疫相关实验,如肿瘤免疫原性研究)
- 染色体:53~73,XY(异倍体核型,含 XY 性染色体,符合男性来源肿瘤细胞遗传学特征,每 5 代可通过核型分析验证,适配黑色素瘤遗传学研究)
- 细胞货期:现货,1 周左右
- 运输方式:复苏发货(T25 培养瓶包装,免运输费用,标注 “悬浮细胞,直立放置、避免剧烈摇晃”,运输后轻轻摇匀观察细胞聚集情况);冻存发货(1mL 冻存管包装,需额外支付干冰运输费用),默认顺丰快递(优先冷链运输,确保悬浮细胞活性)。
- 供应限制:仅限于科学研究使用(包括悬浮型黑色素瘤机制、淋巴转移研究、黑色素合成调控、慢倍增肿瘤药物筛选等),绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用,亦不可用于临床诊断或非科研用途。
- 特别说明:① 首次培养需双核心验证:STR 分型比对(与 ATCC HTB-67 一致)、黑色素合成检测(镜下观察棕褐色颗粒占比≥80%),镜检悬浮球形细胞纯度(≥85%);② 黑色素检测建议:通过多巴染色法特异性验证黑色素(阳性率≥75%),避免将无色素悬浮细胞误判为目标细胞;③ 适配实验方向:黑色素合成通路研究(如 MITF 基因调控)、悬浮肿瘤细胞侵袭实验(Transwell 小室,延长培养至 72 小时)、慢反应抗黑色素瘤药物(如 BRAF 抑制剂)筛选、悬浮 vs 贴壁黑色素瘤药物敏感性对比(与 A375/M14),也可作为悬浮肿瘤模型优化黑色素瘤体外培养参数。


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