SKOV3-FLUC-eGFP-puro人卵巢癌细胞(FLUC/eGFP双标)

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SKOV3-FLUC-eGFP-puro人卵巢癌细胞(FLUC/eGFP双标)

原价为:¥6,000.00。当前价格为:¥5,000.00。

类别:

一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)

细胞名称:SKOV3-FLUC-eGFP-puro 人卵巢癌细胞 (FLUC/eGFP 双标)

细胞别称:SK-OV-3-FLUC-EGFP;人卵巢癌细胞 – 荧光素酶标记 – 绿色荧光蛋白;人卵巢癌细胞 – FLUC-EGFP

种属来源:人

组织来源:卵巢

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞代数:p3-p8(极低传代范围,能最大程度维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及卵巢癌细胞的药物耐受、致瘤特性)

生物安全等级:1 级

背景与筛选验证

背景介绍

SKOV3-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶(FLUC)与增强型绿色荧光蛋白(eGFP),性状稳定,培养时无需抗生素常规维持。既可作为双荧光活性检测的阳性对照,也适用于人卵巢癌体内成像实验(如裸鼠致瘤、药物干预模型的双荧光追踪)。

该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因,亲本 SK-OV-3 细胞具备明确特征:1973 年从卵巢肿瘤病人腹水分离得到,对肿瘤坏死因子及顺铂、阿霉素等多种细胞毒性药物耐受;在裸鼠中致瘤且形成中度分化的腺癌(与卵巢原位癌一致),是研究卵巢癌药物耐药机制、抗耐药药物筛选的专用细胞株。

puro 药筛浓度

SK-OV-3-FLUC-EGFP 细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml(原文 “bsd 药筛浓度” 为表述误差,实际为 puro 药筛),用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障双荧光基因稳定表达,同时不影响细胞贴壁生长、药物耐受性及致瘤特性。

细胞培养核心信息

基础参数

  • 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
  • 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、双荧光表达及卵巢癌药物耐药实验结果,保障数据准确性);
  • 保藏机构:ATCC; HTB-77、ECACC; 91091004(细胞来源可追溯,确保细胞株稳定性、药物耐受性及致瘤特性可靠)。

培养与冻存

  • 培养基:90% McCoy’s 5A 培养基 + 10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗)+0.5μg/ml puro(常规培养直接按此浓度添加,专用 McCoy’s 5A 培养基适配细胞生长需求,不可随意替换;药筛时需将 puro 浓度调整为 1.0μg/ml);
  • 培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整;避免强光直射,减少 eGFP 光漂白,保障双荧光观测效果;操作时动作轻柔,避免频繁移动影响细胞贴壁状态);
  • 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存前确保细胞处于对数生长期,保留双荧光特性与药物耐受性;可适当提高冻存密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml,减少复苏损伤;复苏后优先观察细胞贴壁情况与双荧光表达)。

货期与运输

  • 细胞货期:现货,1 周左右;
  • 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输过程需尽量减少颠簸,降低细胞脱落概率,保障接收后细胞活性。

供应限制

仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

特别说明

以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;因细胞传代范围限定 p3-p8 且具备药物耐受特性,建议收到后尽快开展耐药相关实验,避免过度传代影响特性。

评价

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