一、细胞基本属性
- 细胞名称：SV-HUC-1 人输尿管上皮永生化细胞（STR 鉴定正确）（与 RT4（膀胱低度恶性）、HK-2（正常肾细胞）同属泌尿生殖系统上皮细胞，但组织来源为输尿管，且为永生化正常细胞，区别于 RT4 的低度恶性、RT112 的恶性，是输尿管上皮生理功能、药物毒性及癌变机制研究的核心正常对照模型，可与膀胱 / 肾肿瘤细胞组成 “输尿管 – 膀胱 – 肾脏” 跨器官对照体系）
- 细胞别称：HUC-1; SV-HUC; SVHUC；人输尿管上皮永生化细胞（别称含 “SV-” 前缀，明确标识 SV40 病毒永生化背景，“HUC” 可对应 “Human Ureteral Cell”，与 RT4（“RT” 前缀）、HK-2（“HK” 前缀）形成泌尿生殖系统不同器官细胞的清晰区分，贴合 “永生化背景 + 组织来源” 的精准命名体系）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；11 岁（明确的儿童男性背景，填补泌尿生殖系统细胞模型中儿童来源的空白，与 RT4（63 岁男）、J82（58 岁男）形成儿童 – 中年 – 老年年龄梯度，为年龄相关泌尿生殖系统发育、疾病机制研究提供独特模型）
- 组织来源：膀胱；输尿管，输尿管上皮（此处需注意：“膀胱” 与 “输尿管” 存在表述矛盾，结合细胞名称 “输尿管上皮永生化细胞” 及尿路上皮特异性基因表达，推测 “膀胱” 为笔误，核心组织来源为输尿管上皮；输尿管上皮属于尿路上皮范畴，保留输尿管特有的物质转运、屏障保护功能，可用于输尿管特异性研究，如输尿管结石形成机制、输尿管药物递送安全性评估）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏与永生化正常细胞特性匹配（介于原代正常细胞与肿瘤细胞之间），贴壁强度与 RT4、HK-2 相近，传代操作可参考泌尿生殖系统上皮细胞通用流程，便于与肿瘤细胞同步开展 “正常 – 恶性” 平行实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列紧密呈铺路石样，胞质均匀，核仁清晰，具备正常输尿管上皮细胞典型形态特征，核浆比正常，无肿瘤细胞的核异形性、结构紊乱等现象；与 RT4（低度恶性，形态接近正常）相比，无潜在恶性形态倾向，可通过形态观察初步判断细胞纯度及是否存在肿瘤细胞污染，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留输尿管上皮的正常生理功能及永生化特性，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致细胞分化表型丢失或异常激活 SV40 病毒，如尿路上皮标志物表达下降、病毒 T 抗原过度表达）
- 背景简介：SV-HUC-1 细胞是正常输尿管上皮组织用 SV40 病毒转染建株获得的永生化细胞，核心特性及应用如下：①永生化背景：通过 SV40 病毒转染实现永生化，反复用非洲绿猴肾细胞平板测试验证无传染性 SV40 生成，但需注意在胁迫条件（如化学试剂暴露）下可能激活病毒，操作时需规避强胁迫因素；永生化过程可追溯，细胞遗传背景稳定，克服原代输尿管上皮细胞传代次数有限的缺陷；②功能特性：保留正常输尿管上皮细胞的核心功能，如尿路上皮屏障功能、物质转运能力，可用于输尿管生理功能研究（如尿液成分重吸收）、药物肾毒性（输尿管排泄途径）评估；③应用场景：广泛用于输尿管上皮基础研究（如尿路上皮分化调控）、泌尿生殖系统肿瘤癌变机制研究（与 RT4、RT112 组成 “正常 – 低度恶性 – 恶性” 模型）、药物安全性评价（如化疗药对正常输尿管上皮的毒性检测），同时可与 HK-2（肾近曲小管上皮）搭配开展 “输尿管 – 肾脏” 跨器官功能对比实验。
- 生物安全等级：2（因含 SV40 病毒永生化背景，虽无传染性，但胁迫下可能激活病毒，生物安全等级高于常规正常细胞（等级 1），操作需在生物安全二级实验室进行，穿戴防护服、手套，避免气溶胶产生，实验废弃物需经高压灭菌处理）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后输尿管上皮特性、SV40 T 抗原表达无显著改变，确保与肿瘤细胞实验起始条件一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型（如肺炎支原体、人型支原体），结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染影响细胞生长及生理功能检测结果）
- 保藏机构：ATCC; CRL-9520；中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（国际权威机构（ATCC）与国内顶尖机构双重保藏，ATCC 编号 CRL-9520 为该细胞专属标识，细胞来源可追溯性强，永生化特性及正常上皮功能经过严格验证，与 RT4（多机构保藏）、HK-2（ATCC 保藏）的保藏体系互补，便于跨地域实验协作）
- 培养基：F12K+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：采用 F12K 培养基，区别于 RT4 的 MCCOY’S 5A、RT112 的 RPMI-1640、HK-2 的专用培养基；F12K 培养基含丰富的微量元素及生长因子，适配输尿管上皮细胞的代谢需求，可维持其正常分化表型；10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中病毒或分化干扰因子影响细胞状态；PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞正常代谢及 SV40 T 抗原稳定表达）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；与 RT4、RT112、HK-2 等泌尿生殖系统相关细胞培养条件完全一致，确保 “跨器官”“正常 – 恶性” 对照实验环境的统一性）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①对数生长期细胞消化离心，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；②分装后 4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议用程序降温盒，减少低温对细胞分化表型的影响）→-80℃过夜→转入液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟内融化，离心去除冻存液，用预热的 F12K 培养基重悬，避免 DMSO 对细胞的毒性影响及普通培养基对细胞表型的干扰）
- 致瘤性：No, nude mice.（明确的裸鼠无致瘤性，与 RT4（条件性致瘤）、RT112（裸鼠致瘤）形成 “无致瘤 – 条件致瘤 – 恶性致瘤” 梯度，是验证细胞正常属性、排除恶性污染的关键依据，适合作为肿瘤研究中的正常对照，评估药物对正常细胞的毒性）
- 基因表达情况：uroepithelial keratins（尿路上皮角蛋白，输尿管上皮特异性标志物，验证细胞输尿管上皮身份）; SV40 T antigen（SV40 病毒 T 抗原，永生化关键蛋白，确保细胞永生化特性稳定）（基因表达覆盖细胞身份标志物与永生化标志物，可通过 Western Blot 或免疫荧光法检测，验证细胞表型稳定性，避免长期传代导致特性漂移）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过 F12K 培养基适应性培养、尿路上皮角蛋白及 SV40 T 抗原表达验证，确保正常输尿管上皮永生化特性稳定，下单后 48 小时内可安排发货，可与 RT4、RT112 同步下单，保障 “正常 – 恶性” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用恒温泡沫箱内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，因细胞为儿童来源且永生化，适应能力较强，24 小时后观察细胞贴壁情况，3 天内首次换液）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及 SV40 病毒异常激活风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因含 SV40 病毒永生化背景，需遵守《基因工程安全管理办法》，实验操作及废弃物处理符合生物安全二级实验室要求，避免病毒激活扩散）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基使用：严格遵循 “F12K+10% FBS+PS” 配方，不可与 RT4 的 MCCOY’S 5A、RT112 的 RPMI-1640 混用；F12K 培养基需单独储存，避免与含化学胁迫剂的试剂交叉污染，防止激活 SV40 病毒；培养基开封后 4℃保存，1 个月内使用完毕，避免营养成分降解影响细胞分化；②消化与传代：因细胞为正常上皮永生化细胞，消化时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大、边缘收缩即可终止，用含血清的 F12K 培养基中和胰酶，轻柔吹打避免细胞破碎（保护上皮细胞间连接结构）；传代比例建议 1:2-1:3，接种密度控制在 2×10⁵cells/T25，确保细胞贴壁后快速进入对数生长期，维持正常分化表型；③病毒激活防控：实验中需规避强胁迫条件，如高浓度化学试剂（如超过 10μM 的化疗药）、紫外线照射等，若开展药物胁迫相关实验，需设置梯度浓度预实验，监测 SV40 病毒激活情况（如通过 PCR 检测病毒 DNA 复制）；④“正常 – 恶性” 对照实验设计：与 RT112（膀胱中分化癌）搭配开展以下研究：a. 药物毒性对比：检测化疗药（如顺铂）对 SV-HUC-1（正常）与 RT112（恶性）的 IC50 值，评估药物的肿瘤特异性杀伤能力，为临床用药安全性提供依据；b. 基因表达差异：对比尿路上皮分化标志物（如 uroplakin）在两株细胞中的表达，分析恶性转化对上皮分化的影响；c. 屏障功能检测：通过跨上皮电阻（TEER）检测，对比正常输尿管上皮与膀胱癌细胞的屏障功能差异，研究肿瘤侵袭对上皮屏障的破坏机制；⑤细胞身份验证：长期培养中，每 5 代通过免疫荧光检测尿路上皮角蛋白（如 CK20）及 SV40 T 抗原，确保细胞输尿管上皮身份及永生化特性稳定；若发现尿路上皮标志物表达下降或 SV40 T 抗原异常升高，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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