一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：SW480 人结肠癌细胞（STR 鉴定正确）（与 SW1116（73 岁男、高 CEA、无 CO₂）、SW620（同患者转移灶）同属消化道肿瘤细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、SNU-216（胃癌），核心特色为 “50 岁男性原位直肠腺癌 + SW620 同患者原发 – 转移配对 + 无 CO₂培养 + p53/ras 双基因突变”，是结直肠癌原发 – 转移机制、基因突变功能、低 CEA 肿瘤研究的关键模型；可与 SW620（同患者淋巴结转移）、SW1116（老年男、高 CEA）、GES-1（正常）组成 “结直肠癌细胞 – 原发 / 转移配对 + 年龄梯度（50 岁→73 岁）+CEA 浓度梯度（0.7ng→2654ng）+ 正常对照” 体系，探索肿瘤从原发到转移的分子演变及年龄、CEA 与恶性程度的关联，同时因基因突变特性，可作为 PCR 突变检测的阳性对照）
- 细胞别称：SW-480; SW 480; SW480E；人结肠癌细胞（别称以 “SW” 为核心前缀，与 SW1116（“SW” 前缀）形成 “同前缀不同编号” 的系列关联，“480” 与 SW620 的 “620” 形成同患者原发 – 转移的编号区分，“SW480E” 为亚型变体，统一标注便于实验记录检索；“人结肠癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，贴合 “结直肠癌细胞 + 字母 + 数字” 体系，防止与肺癌 SW1573、乳腺癌 SW579 等混淆）
- 性别年龄：男；50 岁（明确的中年男性背景，与 SW1116（73 岁男）形成 “中年 – 老年” 男性年龄梯度，与 HT-29（44 岁女）形成 “中年男 – 中年女” 性别对照，与 NCI-H716（33 岁男）形成 “中年 – 年轻” 男性年龄对照；50 岁为临床结直肠癌高发年龄起点，且为原位癌阶段，可用于中年男性结直肠癌早期发病机制（如基因突变累积）、原发癌与转移癌的差异研究，适合模拟临床中年男性直肠原位腺癌的研究场景）
- 组织来源：结直肠癌（明确为原位直肠腺癌，与 SW620 源自同一 50 岁男性患者一年后的淋巴结转移灶，形成 “原发 – 转移” 配对细胞；保留直肠原位癌特有的 “局部浸润倾向、低转移潜能” 特性；区别于 SW1116 的结肠原发、SW620 的淋巴结转移，可用于结直肠癌原发 – 转移分子机制研究（如转移相关基因差异表达）、原位癌治疗方案优化，同时为临床直肠原位腺癌诊断及原发 – 转移配对研究提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 SW1116、SW620 一致；核心特色为中等增殖速度（30-50 小时倍增时间，快于 SW1116 的 96-144 小时，与 LOVO 的 34-52 小时相近）；对数生长期为接种后 24-72 小时，贴壁强度低于 SW1116、与 SW620 相近，细胞间连接紧密，呈单层均匀分布（因增殖中等）；传代需在细胞密度达 80% 时进行（通常需 3-5 天），传代比例 1:2-1:3（高于 SW1116 的 1:2），适合开展原发 – 转移配对实验（与 SW620）、基因突变功能研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞展开后呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，核浆比适中（因原位癌特性），具备直肠腺癌细胞典型上皮形态特征；角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性（验证上皮属性）；与 SW1116（老年细胞、核浆比小）相比，核浆比略大且增殖更快，与 SW620（转移细胞、核浆比大）相比，形态更规整、转移相关表型弱；可通过 “上皮样 + 无 CO₂培养 + 低 CEA” 形态及特性快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过直肠特异性标志物（如 CK20）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “原位癌特性、p53/ras 突变、无 CO₂培养适应、低 CEA 表达” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如增殖速度异常（＜30 小时或＞50 小时）、CEA 表达升高（＞2ng/(10⁶cells・10 天)）、基因突变位点丢失、对 CO₂产生依赖）
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- 无 CO₂培养管理：与 SW1116 一致，严禁通入 CO₂；无专用培养箱时，使用不透气密封盖 T25 瓶，每天开盖换空气 1-2 次（每次 10-15 秒），换空气后立即密封，避免培养基 pH 值升高（L-15 培养基缓冲体系适配无 CO₂环境）；每周检测培养基 pH 值（维持 7.2-7.4），pH＞7.4 时及时换液，防止细胞生长受抑；
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- 原发 – 转移配对使用：与 SW620（同患者转移灶）搭配实验时，需采用相同培养条件（无 CO₂、L15 培养基），确保实验变量仅为 “原发 / 转移” 差异；传代时同步操作，保证两株细胞代数一致（建议均使用 5-8 代细胞），减少代次差异对实验结果的影响；
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- 基因突变检测应用：作为 ras 原癌基因 12 位突变的 PCR 阳性对照时，需选择低代数细胞（＜10 代），提取基因组 DNA 时避免支原体污染（已验证无支原体），PCR 引物设计需覆盖 12 位突变位点（如正向引物：5′-GGCCTGCTGAAAATGACTGA-3’），确保阳性对照有效性。
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “原位癌特性、p53/ras 突变、无 CO₂培养适应、低 CEA 表达” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如增殖速度异常（＜30 小时或＞50 小时）、CEA 表达升高（＞2ng/(10⁶cells・10 天)）、基因突变位点丢失、对 CO₂产生依赖）
- 背景介绍：SW480 细胞来源于 50 岁男性结肠癌患者，核心特性及应用如下：①配对与突变特色：与 SW620 为同一患者 “原位癌 – 淋巴结转移” 配对细胞，是研究结直肠癌转移分子机制的 “黄金配对模型”；p53 基因 273 位（G→A，Arg→His）、309 位（C→T，Pro→Ser）双位点突变，ras 原癌基因 12 位突变，可用于基因突变对肿瘤恶性程度的调控研究；②标志物与功能特色：CSAp、直肠抗体 3 阴性，角蛋白阳性，不表达肿瘤入侵相关金属蛋白酶（低侵袭性），表达 GM-CSF（免疫调控相关）；③应用场景：广泛用于结直肠癌原发 – 转移机制（如差异表达基因筛选）、p53/ras 突变功能、低 CEA 肿瘤诊断靶点研究，同时可作为 ras 突变 PCR 检测的阳性对照，提升实验可靠性。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（与男性性别标注矛盾，推测为 STR 检测时 Y 染色体缺失或标注误差，建议实验前通过 SRY 基因 PCR 验证性别，避免影响男性相关实验（如雄激素对原位癌的影响））; CSF1PO：13，14；D13S317：12（纯合子，与 SW1116 的 8,12 形成部分同源）；D16S539：13（纯合子）；D18S51：13（纯合子）；D19S433：13（纯合子）；D21S11：30，30.2（纯合子，独特位点）；D2S1338：17，24；D3S1358：15（纯合子）；D5S818：13（纯合子）；D7S820：8（纯合子）；D8S1179：13（纯合子）；FGA：24（纯合子）；TH01：8（纯合子）；TPOX：11（纯合子）；vWA：16（纯合子）；（STR 位点含大量纯合子（12 个），与 SW1116、SW620 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC CCL-228 数据比对，确认细胞身份及原位癌特性，同时为与 SW620 的配对关系验证提供依据）
- 生物安全等级：1（与 SW1116、SW620、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因无 CO₂培养需求，需与 SW1116 共用无 CO₂培养环境，避免与其他需 CO₂细胞交叉污染）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（因增殖中等，复苏后 24 小时即可快速贴壁增殖），且低 CEA 表达、上皮样形态无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%，标注 “无 CO₂培养，与 SW620 为配对细胞”，提醒用户合理搭配实验及培养环境）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、基因突变检测及原发 – 转移配对实验结果，保障与 SW1116、SW620 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CCL-228，DSMZ; ACC-313，ECACC; 87092801；中国典型培养物保藏中心细胞库（国际权威机构（ATCC、DSMZ、ECACC）与国内机构三重保藏，细胞来源可追溯性极强，原位癌特性、基因突变及与 SW620 的配对关系经过严格验证，与 SW1116（多机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% L15+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①与 SW1116 的 L-15 培养基配方一致，区别于 SW620 的常规培养基；L15 培养基无需 CO₂平衡 pH 值，含独特缓冲体系，适配无 CO₂培养需求，同时含适配原位癌细胞的营养成分，支持其中等增殖及基因突变表型维持；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中突变诱导因子改变 p53/ras 突变状态；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞 GM-CSF 表达及致瘤性）
- 培养条件：气相：100% 空气；温度：37℃（与 SW1116 的无 CO₂培养条件完全一致，湿度需控制在 70%-80%，防止培养基蒸发导致渗透压升高；无 CO₂培养箱条件下，使用不透气密封盖 T25 瓶，每天换空气 1-2 次；培养过程中避免频繁移动培养瓶，防止贴壁细胞脱落；与 SW1116 可共用培养环境，便于同时开展 “不同年龄男性” 对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配贴壁及无 CO₂特性：①选择对数生长期细胞（密度 80%，增殖活性最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（短于 SW1116 的 3-4 分钟），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于 SW1116 的 2.5×10⁶cells/mL，因增殖更快）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 L15 培养基重悬，接种于无 CO₂环境，避免 DMSO 对 p53/ras 蛋白功能的影响）
- 染色体：51~57（染色体数目高于正常二倍体（46 条），为中低异倍体，与 SW1116（未明确）、SW620（62~68 条，中高异倍体）形成染色体倍性梯度；染色体数目稳定，实验设计中需注意中低异倍体对基因突变检测（如 PCR 扩增效率）的潜在影响，适合开展精准的基因突变功能实验）
- 倍增时间：~30-50 hours（增殖速度中等，介于 SW1116（96-144 小时，慢）与 NCI-H716（50 小时，中慢）之间，对数生长期为接种后 24-72 小时，需每 24 小时镜检 1 次细胞密度，传代间隔 3-5 天；实验设计需适配中周期，如药物处理时间建议 48-72 小时，原发 – 转移配对实验需同步传代以保证增殖节奏一致）
- 致瘤性：Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.（明确的裸鼠高成瘤能力，成瘤周期短（21 天内）、成瘤率 100%，接种密度（1×10^7cells / 只）与 SW620 一致；因是原位癌，成瘤体积通常小于 SW620（转移灶）；建议与 SW620 同步开展裸鼠成瘤实验，对比两株细胞的成瘤速度、体积及病理特征（SW480 分化程度更高），验证原发 – 转移的体内恶性差异）
- 瘤球形成能力：无法形成瘤球（核心特性为无肿瘤干细胞特性，与 SW1116（未明确）、LOVO（可形成瘤球）形成差异；表明该细胞无自我更新及分化潜能，适合开展非肿瘤干细胞依赖的肿瘤机制研究，同时可作为 “瘤球形成能力阴性对照”，验证其他细胞瘤球实验的特异性）
- 受体表达情况：epidermal growth factor (EGF)（表皮生长因子受体，参与肿瘤增殖信号通路，可通过 Western Blot 检测受体蛋白表达，或通过 EGF 刺激实验观察细胞增殖响应（如 CCK-8 法检测增殖率变化），与 SW620 对比分析受体表达与转移潜能的关联）
- 基因表达情况：carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days（结直肠癌标志物，表达量低（仅为 SW1116 的 1/3791），可通过 ELISA 法检测（无需稀释），与 SW1116、LOVO 形成 CEA 浓度梯度，用于低 CEA 肿瘤诊断标志物筛选）; keratin（角蛋白，验证上皮属性，与上皮样形态一致）; transforming growth factor beta（转化生长因子 β，参与肿瘤增殖与分化调控）; myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+（多癌基因及突变 p53 阳性，体现原位癌分子特征）; abl -; ros -; src -（部分癌基因阴性，与阳性基因形成分子表型差异）; HLA A2, B8, B17（HLA 分型明确，可用于肿瘤免疫相关实验）; Blood Type A; Rh+（血型抗原 A 型，与 SW1116（O 型）形成血型差异，可用于 ABO 血型与肿瘤特性关联研究）; The cells are positive for keratin by immunoperoxidase
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